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MC3T3-E1 Subclone 24
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MC3T3-E1 Subclone 24

Cell line · Référence du produit 305186

MC3T3-E1 Subclone 24 cells expressly represent a preosteoblast cell type, which plays a crucial role in bone formation. Morphologically, they exhibit a fi...

€430.00hors taxes et frais de port

Personnalisation / Recommandations

En stock
Lot
Recommandé (lot le plus récent)
  • CoA
1

01Informations générales

Description

Les cellules MC3T3-E1 Subclone 24 représentent expressément un type de cellule préostéoblastique, qui joue un rôle crucial dans la formation des os. Morphologiquement, elles présentent un aspect fibroblastique, caractérisé par leur forme allongée et leurs structures fusiformes. Ce sous-clone particulier est dérivé du tissu calvaire, une région du crâne qui contribue à la formation des os. L'une des applications essentielles des cellules MC3T3-E1 Subclone 24 réside dans la culture cellulaire en 3D, où les chercheurs peuvent étudier le comportement et les interactions de ces cellules dans un environnement tridimensionnel. Cette méthode offre un modèle physiologique plus pertinent que les cultures cellulaires bidimensionnelles traditionnelles, ce qui permet de mieux comprendre les processus complexes impliqués dans la formation osseuse.

Bien que ces cellules présentent de nombreux avantages, il est important de noter leurs caractéristiques spécifiques. On a observé que les cellules MC3T3-E1 Subclone 24 présentent une faible différenciation ostéoblastique lorsqu'elles sont exposées à l'acide ascorbique, un composant clé pour la promotion de la croissance des cellules osseuses. En outre, elles ne forment pas de matrice extracellulaire minéralisée, une étape cruciale dans la création du tissu osseux. Le temps de doublement des cellules MC3T3-E1 Subclone 24 est d'environ 90,5 heures.

Tissu
Os
Applications
culture cellulaire en 3D, études de différenciation

02Classification

Organisme
Souris
Sexe
Non précisé
Propriétés de croissance
Adepte
Niveau de biosécurité
1

03Caractéristiques

Morphologie
Fibroblaste
Type de cellule
Ostéoblaste
Tumorigène
Oui, chez les souris immunodéprimées

04Identifiants

Référence
MC3T3-E1 Subclone 24 (numéro de catalogue Cytion 305186)
Numéro d'identification fiscale NCBI
10090
Cellosaurus
CVCL_5438

05Expression et sensibilité

Récepteurs exprimés
Récepteur de la protéine liée à l'hormone parathyroïdienne (PTHrP)
Expression des protéines
Collagène, sialoprotéine osseuse (BSP), ostéocalcine (OCN), hormone parathyroïdienne (PTH)

06Manipulation et culture

Milieu de culture
Alpha MEM, w : 2.0 mM Glutamine stable, w : Ribonucléosides, w : Désoxyribonucléosides, w : 1.0 mM Pyruvate de sodium, w : 2.2g/L NaHCO3, w/o : Acide ascorbique (GIBCO, n° de catalogue A1049001. Nous ne fournissons pas ce produit ; veuillez considérer d'autres fournisseurs. N'hésitez pas à nous contacter si vous avez besoin d'aide supplémentaire)
Atmosphère d'incubation

37°C, 5%CO2, atmosphère humidifiée.

Compléments alimentaires
Compléter le milieu avec 10% de FBS
Réactif de dissociation
Accutase
Repiquage
Retirer l'ancien milieu des cellules adhérentes et les laver avec du PBS dépourvu de calcium et de magnésium. Pour les flacons T25, utiliser 3-5 ml de PBS, et pour les flacons T75, 5-10 ml. Ensuite, recouvrir complètement les cellules avec Accutase, en utilisant 1 à 2 ml pour les flacons T25 et 2,5 ml pour les flacons T75. Laisser les cellules incuber à température ambiante pendant 8-10 minutes pour les détacher. Après incubation, mélanger délicatement les cellules avec 10 ml de milieu pour les remettre en suspension, puis centrifuger à 300xg pendant 3 minutes. Jeter le surnageant, remettre les cellules en suspension dans du milieu frais et les transférer dans de nouveaux flacons contenant déjà du milieu frais.
Décongélation et mise en culture
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Contrôle qualité et cryoconservation

Stérilité

La contamination par les mycoplasmes est exclue à l'aide de tests basés sur la PCR et de méthodes de détection des mycoplasmes basées sur la luminescence.

Pour s'assurer de l'absence de contamination bactérienne, fongique ou levurienne, les cultures cellulaires font l'objet d'inspections visuelles quotidiennes.

Milieu de congélation
Comme milieu de cryoconservation, nous utilisons un milieu de croissance complet (comprenant du FBS) + 10 % de DMSO pour une viabilité adéquate après décongélation, ou CM-1 (numéro de catalogue 800100 de Cytion), qui comprend des osmoprotectants et des stabilisateurs métaboliques optimisés pour améliorer la récupération et réduire le stress induit par la cryogénisation.
Conditions de stockage

Pour une conservation à long terme, placer les flacons dans de l'azote liquide en phase vapeur à une température comprise entre -150 et -196 °C environ. Le stockage à -80 °C n'est acceptable qu'en tant qu'étape intermédiaire de courte durée avant le transfert dans l'azote liquide.

Conditions de livraison

Les lignées cellulaires cryoconservées sont expédiées sur glace sèche dans des emballages isolés et validés, avec suffisamment de réfrigérant pour maintenir une température d'environ -78 °C tout au long du transport. À la réception, inspecter immédiatement le conteneur et transférer sans délai les flacons dans un lieu de stockage approprié.

08Donateur

Race / sous-espèce
C57BL/6
Âge du donneur
1 jour