MC3T3-E1 Subclone 24

As células do subclone 24 do MC3T3-E1 representam expressamente um tipo celular de pré-osteoblasto, que desempenha um papel crucial na formação óssea. Morfologicamente, elas apresentam uma aparência semelhante à dos fibroblastos, caracterizada por sua forma alongada e estruturas fusiformes. Esse subclone específico é derivado do tecido da calvária, uma região do crânio que contribui para a formação óssea. Uma das principais aplicações das células do subclone 24 da linha MC3T3-E1 está na cultura celular 3D, na qual os pesquisadores podem estudar o comportamento e as interações dessas células em um ambiente tridimensional. Esse método oferece um modelo fisiologicamente mais relevante do que as culturas celulares bidimensionais tradicionais, permitindo uma melhor compreensão dos processos complexos envolvidos na formação óssea.

Embora essas células possuam inúmeras vantagens, é importante observar suas características específicas. Observou-se que as células do subclone 24 do MC3T3-E1 apresentam baixa diferenciação osteoblástica quando expostas ao ácido ascórbico, um componente essencial para promover o crescimento das células ósseas. Além disso, elas não formam uma matriz extracelular mineralizada, etapa crucial na formação do tecido ósseo. O tempo de duplicação das células do subclone 24 da linha MC3T3-E1 é de aproximadamente 90,5 horas.

37 °C, 5% de CO₂, atmosfera umidificada.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

A contaminação por micoplasma é descartada por meio de ensaios baseados em PCR e de métodos de detecção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não haja contaminação por bactérias, fungos ou leveduras, as culturas celulares são submetidas a inspeções visuais diárias.

Para preservação a longo prazo, coloque os frascos em nitrogênio líquido em fase de vapor a uma temperatura entre aproximadamente −150 e −196 °C. O armazenamento a −80 °C é aceitável apenas como uma etapa intermediária de curta duração antes da transferência para o nitrogênio líquido.

As linhagens celulares criopreservadas são enviadas em gelo seco, em embalagens isoladas e validadas, com refrigerante suficiente para manter a temperatura em aproximadamente −78 °C durante todo o transporte. Ao receber a remessa, inspecione o recipiente imediatamente e transfira os frascos sem demora para o local de armazenamento adequado.

Na Cytion, garantimos a qualidade e a viabilidade de nossos produtos. Garantimos que nossas células permanecerão viáveis no início da cultura por 60 dias após o envio de nossas instalações. Asseguramos que todos os materiais estão em conformidade com as especificações descritas no Certificado de Análise e/ou na Ficha Técnica do Produto.

Para obter todos os detalhes, consulte nossa Declaração de Garantia.