Ga naar de inhoud
MC3T3-E1 Subclone 24
Weefsel
Bot

Documenten

MC3T3-E1 Subclone 24

Cell line · Productnummer 305186

MC3T3-E1 Subclone 24 cells expressly represent a preosteoblast cell type, which plays a crucial role in bone formation. Morphologically, they exhibit a fi...

€430.00excl. btw en verzendkosten

Maatwerk / Aanbevelingen

Op voorraad
Lot
Aanbevolen (verste partij)
  • CoA
1

01Algemene informatie

Beschrijving

MC3T3-E1 Subklon 24 cellen vertegenwoordigen uitdrukkelijk een preosteoblast celtype, dat een cruciale rol speelt in de botvorming. Morfologisch vertonen ze een fibroblastachtig uiterlijk, gekenmerkt door hun langgerekte vorm en spoelvormige structuren. Deze specifieke subkloon is afkomstig van het calvaria-weefsel, een schedelgebied dat bijdraagt aan de botvorming. Een van de belangrijkste toepassingen van MC3T3-E1 Subklon 24 Cellen ligt in de 3D-celkweek, waar onderzoekers het gedrag en de interacties van deze cellen in een driedimensionale omgeving kunnen bestuderen. Deze methode biedt een fysiologisch relevanter model dan traditionele tweedimensionale celculturen, waardoor de ingewikkelde processen die betrokken zijn bij botvorming beter begrepen kunnen worden.

Hoewel deze cellen tal van voordelen hebben, is het belangrijk om hun specifieke kenmerken op te merken. Van MC3T3-E1 Subklon 24 cellen is waargenomen dat ze een slechte differentiatie in osteoblasten vertonen wanneer ze worden blootgesteld aan ascorbinezuur, een sleutelcomponent voor het bevorderen van de groei van botcellen. Bovendien vormen ze geen gemineraliseerde extracellulaire matrix, een cruciale stap in het creëren van botweefsel. De verdubbelingstijd van MC3T3-E1 Subklon 24 Cellen is ongeveer 90,5 uur.

Weefsel
Bot
Toepassingen
3D celkweek, Differentiatiestudies

02Classificatie

Organisme
Muis
Seks
Niet gespecificeerd
Groei-eigenschappen
Aanhanger
Bioveiligheidsniveau
1

03Kenmerken

Morfologie
Fibroblast
Celtype
Osteoblast
Tumorverwekkend
Ja, in immuunonderdrukte muizen

04Identificatiegegevens

Bronvermelding
MC3T3-E1 Subkloon 24 (Cytion catalogusnummer 305186)
NCBI-belastingnummer
10090
Cellosaurus
CVCL_5438

05Expressie en vatbaarheid

Tot expressie gebrachte receptoren
Aan bijschildklierhormoon gerelateerd eiwit (PTHrP)-receptor
Eiwit-expressie
Collageen, botsialoproteïne (BSP), osteocalcine (OCN), bijschildklierhormoon (PTH)

06Behandeling en kweek

Kweekmedium
Alpha MEM, w: 2,0 mM stabiele Glutamine, w: Ribonucleosiden, w: Desoxyribonucleosiden, w: 1,0 mM Natriumpyruvaat, w: 2,2g/L NaHCO3, w/o: Ascorbinezuur (GIBCO, catalogusnr. A1049001. Wij leveren dit product niet; overweeg andere leveranciers. Laat het ons weten als je meer hulp nodig hebt)
Incubatieomgeving

37°C, 5%CO2, bevochtigde atmosfeer.

Supplementen
Vul het medium aan met 10% FBS
Dissociatiereagens
Accutase
Heruitplanten
Verwijder het oude medium van de adherente cellen en was ze met PBS zonder calcium en magnesium. Gebruik voor T25-flesjes 3-5 ml PBS en voor T75-flesjes 5-10 ml. Bedek de cellen vervolgens volledig met Accutase, met 1-2 ml voor T25-flesjes en 2,5 ml voor T75-flesjes. Laat de cellen gedurende 8-10 minuten bij kamertemperatuur incuberen om ze los te maken. Na incubatie de cellen voorzichtig mengen met 10 ml medium om ze te resuspenderen en vervolgens centrifugeren bij 300xg gedurende 3 minuten. Gooi het supernatant weg, resuspendeer de cellen in vers medium en breng ze over in nieuwe kolven die al vers medium bevatten.
Ontdooien en kweken
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kwaliteitscontrole en cryopreservatie

Onvruchtbaarheid

Mycoplasmaverontreiniging wordt uitgesloten met zowel PCR-gebaseerde testen als op luminescentie gebaseerde mycoplasmadetectiemethoden.

Om er zeker van te zijn dat er geen besmetting is met bacteriën, schimmels of gisten, worden de celculturen dagelijks onderworpen aan visuele inspecties.

Kweekmedium invriezen
Als cryoconserveringsmedium gebruiken we volledig groeimedium (inclusief FBS) + 10% DMSO voor voldoende levensvatbaarheid na het ontdooien, of CM-1 (Cytion catalogusnummer 800100), dat geoptimaliseerde osmoprotectanten en metabolische stabilisatoren bevat om het herstel te verbeteren en door cryo geïnduceerde stress te verminderen.
Opslagvoorwaarden

Voor langdurige bewaring plaatst u flesjes in vloeibare stikstof in dampfase bij ongeveer -150 tot -196 °C. Opslag bij -80 °C is alleen aanvaardbaar als korte tussenstap vóór overbrenging naar vloeibare stikstof.

Verzendvoorwaarden

Gecryopreserveerde cellijnen worden verzonden op droog ijs in gevalideerde, geïsoleerde verpakkingen met voldoende koelmiddel om gedurende het transport ongeveer -78 °C te handhaven. Inspecteer de verpakking onmiddellijk na ontvangst en breng de flacons onverwijld over naar de juiste opslagplaats.

08Donateur

Soort / ondersoort
C57BL/6
Leeftijd van de donor
1 dag