Перейти до вмісту
MC3T3-E1 Subclone 24
Тканина
Кость

Документи

MC3T3-E1 Subclone 24

Cell line · Номер товару 305186

MC3T3-E1 Subclone 24 cells expressly represent a preosteoblast cell type, which plays a crucial role in bone formation. Morphologically, they exhibit a fi...

€430.00без урахування податків та вартості доставки

Налаштування / Рекомендації

Є в наявності
Лот
Рекомендовано (найсвіжіша партія)
  • CoA
1

01Загальна інформація

Опис

Клітини субклону 24 MC3T3-E1 експресивно представляють тип клітин преостеобластів, які відіграють вирішальну роль у формуванні кісткової тканини. Морфологічно вони мають фібробластоподібний вигляд, характеризуються видовженою формою та веретеноподібною структурою. Цей конкретний субклон походить з тканини кальварії - ділянки черепа, яка бере участь у формуванні кісток. Одне з найважливіших застосувань клітин субклону MC3T3-E1 24 полягає в 3D культурі клітин, де дослідники можуть вивчати поведінку та взаємодію цих клітин у тривимірному середовищі. Цей метод пропонує більш фізіологічно релевантну модель, ніж традиційні двовимірні культури клітин, що дозволяє краще зрозуміти складні процеси, пов'язані з формуванням кісткової тканини.

Хоча ці клітини мають численні переваги, важливо відзначити їх специфічні характеристики. Клітини субклону 24 MC3T3-E1 демонструють слабку диференціацію остеобластів під впливом аскорбінової кислоти, яка є ключовим компонентом для стимуляції росту кісткових клітин. Крім того, вони не утворюють мінералізованого позаклітинного матриксу, що є вирішальним етапом у створенні кісткової тканини. Час подвоєння клітин субклону 24 MC3T3-E1 становить приблизно 90,5 годин.

Тканина
Кость
Застосування
3D-культура клітин, Дослідження диференціації

02Класифікація

Організм
Миша
Секс
Не вказано
Характеристики росту
Прихильник
Рівень біобезпеки
1

03Характеристики

Морфологія
Фібробласт
Тип клітини
Остеобласт
Пухлиноутворювальний
Так, у мишей з пригніченим імунітетом

04Ідентифікатори

Посилання
MC3T3-E1 Субклон 24 (каталожний номер 305186)
Ідентифікаційний номер платника податків NCBI
10090
Целозавр
CVCL_5438

05Експресія та сприйнятливість

Рецептори, що експресуються
Рецептор білка, пов'язаного з паратиреоїдним гормоном (PTHrP)
Експресія білків
Колаген, кістковий сіалопротеїн (BSP), остеокальцин (OCN), паратиреоїдний гормон (PTH)

06Обробка та вирощування

Живильне середовище
Альфа MEM, w: 2,0 мМ стабільний глутамін, w: рибонуклеозиди, w: дезоксирибонуклеозиди, w: 1,0 мМ піруват натрію, w: 2,2 г/л NaHCO3, w/o: Аскорбінова кислота (GIBCO, каталожний номер A1049001. Ми не постачаємо цей продукт; будь ласка, зверніться до інших постачальників. Будь ласка, дайте нам знати, якщо вам потрібна подальша допомога)
Атмосфера інкубації

37°C, 5% CO2, волога атмосфера.

Добавки
Додайте до середовища 10% FBS
Реагент для дисоціації
Аккутаза
Пересадка в нове середовище
Видаліть старе середовище з прилиплих клітин і промийте їх PBS, в якому бракує кальцію і магнію. Для колб T25 використовуйте 3-5 мл PBS, а для колб T75 - 5-10 мл. Потім повністю покрийте клітини аккутазою, використовуючи 1-2 мл для колб Т25 і 2,5 мл для колб Т75. Залиште клітини інкубуватися при кімнатній температурі протягом 8-10 хвилин, щоб відокремити їх. Після інкубації обережно змішайте клітини з 10 мл середовища, щоб ресуспендувати їх, а потім центрифугуйте при 300xg протягом 3 хвилин. Викиньте надосадову рідину, ресуспендуйте клітини у свіжому середовищі та перенесіть їх у нові колби, які вже містять свіже середовище.
Розморожування та культивування
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Контроль якості та кріоконсервація

Стерильність

Зараження мікоплазмою виключається за допомогою аналізів на основі ПЛР та люмінесцентних методів виявлення мікоплазми.

Щоб переконатися у відсутності бактеріального, грибкового або дріжджового забруднення, клітинні культури піддаються щоденному візуальному контролю.

Середовище для заморожування
Як середовище кріоконсервування ми використовуємо повне живильне середовище (включаючи FBS) + 10% ДМСО для адекватної життєздатності після відтавання або CM-1 (номер за каталогом Cytion 800100), до складу якого входять оптимізовані осмопротектори та метаболічні стабілізатори для прискорення відновлення та зменшення кріоіндукованого стресу.
Умови зберігання

Для тривалого зберігання помістіть флакони в парофазний рідкий азот при температурі від -150 до -196 °C. Зберігання при -80 °C допустиме лише як короткий проміжний етап перед перенесенням у рідкий азот.

Умови доставки

Кріоконсервовані клітинні лінії транспортуються на сухому льоду в перевіреній ізольованій упаковці з достатньою кількістю холодоагенту для підтримання температури приблизно -78 °C під час транспортування. При отриманні негайно огляньте контейнер і без зволікань перемістіть флакони у відповідне місце зберігання.

08Донор

Порода / підвид
C57BL/6
Вік донора
1 день