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MC3T3-E1 Subclone 24
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Knochen

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MC3T3-E1 Subclone 24

Cell line · Artikelnummer 305186

MC3T3-E1 Subclone 24 cells expressly represent a preosteoblast cell type, which plays a crucial role in bone formation. Morphologically, they exhibit a fi...

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01Allgemeine Informationen

Beschreibung

MC3T3-E1-Zellen des Subklons 24 stellen ausdrücklich einen präosteoblastischen Zelltyp dar, der eine entscheidende Rolle bei der Knochenbildung spielt. Morphologisch weisen sie ein fibroblastenähnliches Aussehen auf, das durch ihre längliche Form und spindelförmige Strukturen gekennzeichnet ist. Dieser spezielle Subklon stammt aus dem Kalvariengewebe, einer Schädelregion, die zur Knochenbildung beiträgt. Eine der wichtigsten Anwendungen von MC3T3-E1 Subklon 24 Zellen liegt in der 3D-Zellkultur, wo Forscher das Verhalten und die Interaktionen dieser Zellen in einer dreidimensionalen Umgebung untersuchen können. Diese Methode bietet ein physiologisch relevanteres Modell als herkömmliche zweidimensionale Zellkulturen und ermöglicht ein besseres Verständnis der komplizierten Prozesse bei der Knochenbildung.

Obwohl diese Zellen zahlreiche Vorteile aufweisen, ist es wichtig, ihre spezifischen Eigenschaften zu beachten. Bei MC3T3-E1-Subklon 24-Zellen wurde beobachtet, dass sie eine schlechte Osteoblasten-Differenzierung aufweisen, wenn sie Ascorbinsäure ausgesetzt werden, eine Schlüsselkomponente zur Förderung des Knochenzellwachstums. Außerdem bilden sie keine mineralisierte extrazelluläre Matrix, ein entscheidender Schritt bei der Bildung von Knochengewebe. Die Verdopplungszeit von MC3T3-E1 Subklon 24 Zellen beträgt etwa 90,5 Stunden.

Gewebe
Knochen
Anwendungen
3D-Zellkultur, Differenzierungsstudien

02Klassifizierung

Organismus
Maus
Sex
Nicht näher bezeichnet
Wachstumseigenschaften
Anhänger
Biologische Sicherheitsstufe
1

03Merkmale

Morphologie
Fibroblasten
Zelltyp
Osteoblasten
Tumorauslösend
Ja, bei immunsupprimierten Mäusen

04Bezeichner

Quellenangabe
MC3T3-E1 Subklon 24 (Cytion Katalognummer 305186)
NCBI-Steuer-ID
10090
Cellosaurus
CVCL_5438

05Expression und Anfälligkeit

Exprimierte Rezeptoren
Rezeptor für das Parathormon-verwandte Protein (PTHrP)
Proteinexpression
Kollagen, Knochensialoprotein (BSP), Osteocalcin (OCN), Parathormon (PTH)

06Handhabung und Kultur

Nährmedium
Alpha MEM, w: 2,0 mM stabiles Glutamin, w: Ribonukleoside, w: Deoxyribonukleoside, w: 1,0 mM Natriumpyruvat, w: 2,2g/L NaHCO3, w/o: Ascorbinsäure (GIBCO, Katalog-Nr. A1049001. Wir liefern dieses Produkt nicht; bitte beachten Sie andere Anbieter. Bitte lassen Sie uns wissen, wenn Sie weitere Unterstützung benötigen)
Inkubationsatmosphäre

37°C, 5%CO2, befeuchtete Atmosphäre.

Nahrungsergänzungsmittel
Ergänzen Sie das Medium mit 10% FBS
Dissoziationsreagenz
Accutase
Subkultivierung
Entfernen Sie das alte Medium von den adhärenten Zellen und waschen Sie sie mit PBS, das kein Kalzium und Magnesium enthält. Für T25-Kolben 3-5 ml PBS und für T75-Kolben 5-10 ml verwenden. Anschließend werden die Zellen vollständig mit Accutase bedeckt, wobei 1-2 ml für T25-Kolben und 2,5 ml für T75-Kolben verwendet werden. Lassen Sie die Zellen 8-10 Minuten bei Raumtemperatur inkubieren, um sie abzulösen. Nach der Inkubation mischen Sie die Zellen vorsichtig mit 10 ml Medium, um sie zu resuspendieren, und zentrifugieren sie dann 3 Minuten lang bei 300xg. Den Überstand verwerfen, die Zellen in frischem Medium resuspendieren und in neue Kolben überführen, die bereits frisches Medium enthalten.
Auftauen und Kultivierung
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Qualitätskontrolle und Kryokonservierung

Sterilität

Eine Kontamination mit Mykoplasmen wird sowohl durch PCR-basierte Assays als auch durch lumineszenzbasierte Mykoplasmen-Nachweisverfahren ausgeschlossen.

Um sicherzustellen, dass keine Kontamination mit Bakterien, Pilzen oder Hefen vorliegt, werden die Zellkulturen täglich visuell überprüft.

Gefriermedium
Als Kryokonservierungsmedium verwenden wir komplettes Wachstumsmedium (einschließlich FBS) + 10 % DMSO für eine angemessene Lebensfähigkeit nach dem Auftauen oder CM-1 (Cytion Katalognummer 800100), das optimierte Osmoprotektoren und Stoffwechselstabilisatoren enthält, um die Erholung zu verbessern und kryoinduzierten Stress zu reduzieren.
Lagerbedingungen

Zur Langzeitkonservierung werden die Fläschchen in flüssigem Stickstoff bei etwa -150 bis -196 °C gelagert. Eine Lagerung bei -80 °C ist nur als kurzer Zwischenschritt vor der Überführung in flüssigen Stickstoff akzeptabel.

Versandbedingungen

Kryokonservierte Zelllinien werden auf Trockeneis in einer validierten, isolierten Verpackung mit ausreichend Kühlmittel versandt, um während des gesamten Transports eine Temperatur von etwa -78 °C aufrechtzuerhalten. Prüfen Sie den Behälter bei Erhalt sofort und bringen Sie die Fläschchen unverzüglich in ein geeignetes Lager.

08Spender

Rasse / Unterart
C57BL/6
Alter des Spenders
1 Tag