MC3T3-E1 Subclone 24
Cell line · Product number 305186
MC3T3-E1 Subclone 24 cells expressly represent a preosteoblast cell type, which plays a crucial role in bone formation. Morphologically, they exhibit a fi...
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01General information
- Description
MC3T3-E1 Subclone 24 细胞明确代表了前成骨细胞类型，在骨形成过程中起着至关重要的作用。从形态上看，它们呈现出类似成纤维细胞的外观，其特点是形状修长，结构呈纺锤形。这种特殊的亚克隆来源于颅骨组织--有助于骨骼形成的颅骨区域。MC3T3-E1 亚克隆 24 细胞的关键应用之一在于三维细胞培养，研究人员可以在三维环境中研究这些细胞的行为和相互作用。与传统的二维细胞培养相比，这种方法提供了一种更贴近生理的模型，可以更好地了解骨形成的复杂过程。
虽然这些细胞具有众多优点，但重要的是要注意它们的具体特征。据观察，MC3T3-E1 亚克隆 24 细胞在暴露于抗坏血酸（促进骨细胞生长的关键成分）时，成骨细胞分化能力较差。此外，它们不能形成矿化的细胞外基质，而这是形成骨组织的关键步骤。MC3T3-E1 亚克隆 24 细胞的倍增时间约为 90.5 小时。
- Tissue
- 骨质
- Applications
- 三维细胞培养、分化研究
02Classification
- Organism
- Mouse
- Sex
- Unspecified
- Growth properties
- Adherent
- Biosafety level
- 1
03Characteristics
- Morphology
- 成纤维细胞
- Cell type
- 成骨细胞
- Tumourigenic
- 是，在免疫抑制小鼠中
04Identifiers
- Citation
- MC3T3-E1 亚克隆 24（Cytion 目录编号 305186）
- NCBI TaxID
- 10090
- Cellosaurus
- CVCL_5438
05Expression and susceptibility
- Receptors expressed
- 甲状旁腺激素相关蛋白（PTHrP）受体
- Protein expression
- 胶原蛋白、骨硅蛋白 (BSP)、骨钙素 (OCN)、甲状旁腺激素 (PTH)
06Handling and culture
- Culture medium
- α-MEM，w：2.0 mM 稳定谷氨酰胺，w：核糖核苷，w：脱氧核糖核苷，w：1.0 mM 丙酮酸钠，w：2.2g/L NaHCO3，w/o：抗坏血酸（GIBCO，目录号 A1049001。我们不供应该产品，请考虑其他供应商。如需进一步帮助，请告知我们）。
- Incubation atmosphere
37°C, 5%CO2, 加湿环境。
- Supplements
- 在培养基中添加 10% FBS
- Dissociation reagent
- Accutase
- Subculturing
- 去除粘附细胞上的旧培养基，用不含钙和镁的 PBS 冲洗。T25 烧瓶用 3-5 毫升 PBS，T75 烧瓶用 5-10 毫升。然后用 Accutase 完全覆盖细胞，T25 烧瓶用 1-2 毫升，T75 烧瓶用 2.5 毫升。让细胞在室温下孵育 8-10 分钟，使其分离。孵育后，用 10 毫升培养基轻轻混合细胞使其重悬，然后用 300xg 离心 3 分钟。弃去上清液，用新鲜培养基重悬细胞，并将其转移到已装有新鲜培养基的新烧瓶中。
- Thawing and culturing
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Quality control and cryopreservation
- Sterility
使用基于 PCR 的检测方法和基于发光的支原体检测方法排除支原体污染。
为确保没有细菌、真菌或酵母菌污染，每天都要对细胞培养物进行目视检查。
- Freeze medium
- 我们使用完全生长培养基（包括 FBS）+10% DMSO 或 CM-1（Cytion 商品目录编号 800100）作为冷冻保存培养基，以获得足够的解冻后存活率，CM-1（Cytion 商品目录编号 800100）含有优化的渗透保护剂和代谢稳定剂，可提高恢复能力并减少冷冻引起的应激。
- Storage conditions
如需长期保存，可将样品瓶放入气相液氮中，温度约为 -150 至 -196 ℃。在-80 °C下保存只能作为转入液氮前的短暂过渡。
- Shipping conditions
冷冻保存的细胞系用干冰装运，并用经过验证的隔热包装和足够的制冷剂在整个运输过程中保持约 -78 °C 的温度。收到货后，应立即检查容器，并立即将小瓶转移到适当的储藏室。
08Donor
- Breed / subspecies
- C57BL/6
- Donor age
- 1 天
09Legal and safety
- Safety precautions
- 计划将低温样品储存在液氮中以便将来解冻时，必须遵守严格的安全措施。在将冷冻样本移入或移出液氮罐时，必须穿戴适当的防护手套和防护服，并使用面罩或安全护目镜。这样做是为了降低在移出时因冷冻样品爆炸而造成伤害的风险，因为爆炸可能导致锋利的碎片飞溅。
- Warranty
在Cytion，我们保证产品的质量和活力。 我们保证，从我们的工厂发货后 60 天内，我们的细胞在开始培养时都是存活的。 我们保证所有材料均符合分析证书和/或产品说明书中描述的规格。
有关详细信息，请参阅我们的 <a href="" /Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">保修声明 。
- Material Transfer Agreement required
- Yes