Přejít na obsah
MC3T3-E1 Subclone 24
Tkáň
Kost

Dokumenty

MC3T3-E1 Subclone 24

Cell line · Číslo výrobku 305186

MC3T3-E1 Subclone 24 cells expressly represent a preosteoblast cell type, which plays a crucial role in bone formation. Morphologically, they exhibit a fi...

€430.00bez DPH a poštovného

Přizpůsobení / Doporučení

Skladem
Lot
Doporučeno (nejčerstvější šarže)
  • CoA
1

01Obecné informace

Popis

Buňky subklonu 24 MC3T3-E1 výslovně představují preosteoblastový typ buněk, který hraje klíčovou roli při tvorbě kostí. Morfologicky vykazují vzhled podobný fibroblastům, vyznačují se protáhlým tvarem a vřetenovitými strukturami. Tento konkrétní subklon pochází z tkáně calvaria, oblasti lebky, která se podílí na tvorbě kostí. Jedno z rozhodujících využití buněk subklonu 24 MC3T3-E1 spočívá v 3D buněčné kultuře, kde mohou výzkumníci studovat chování a interakce těchto buněk v trojrozměrném prostředí. Tato metoda nabízí fyziologicky relevantnější model než tradiční dvourozměrné buněčné kultury, což umožňuje lépe porozumět složitým procesům, které se podílejí na tvorbě kostí.

I když tyto buňky mají řadu výhod, je důležité si uvědomit jejich specifické vlastnosti. Bylo zjištěno, že buňky subklonu 24 MC3T3-E1 vykazují špatnou diferenciaci osteoblastů, pokud jsou vystaveny působení kyseliny askorbové, která je klíčovou složkou pro podporu růstu kostních buněk. Navíc netvoří mineralizovanou extracelulární matrix, což je klíčový krok při tvorbě kostní tkáně. Doba zdvojení buněk MC3T3-E1 Subclone 24 je přibližně 90,5 hodiny.

Tkáň
Kost
Aplikace
3D buněčné kultury, diferenciační studie

02Klasifikace

Organismus
Myš
Sex
Nespecifikováno
Růstové vlastnosti
Přívrženec
Úroveň biologické bezpečnosti
1

03Charakteristika

Morfologie
Fibroblasty
Typ buňky
Osteoblasty
Tumorogenní
Ano, u imunosuprimovaných myší

04Identifikátory

Citace
MC3T3-E1 subklon 24 (katalogové číslo Cytion 305186)
Daňové identifikační číslo NCBI
10090
Cellosaurus
CVCL_5438

05Exprese a náchylnost

Exprimované receptory
Receptor pro protein související s parathormonem (PTHrP)
Exprese proteinů
Kolagen, kostní sialoprotein (BSP), osteokalcin (OCN), parathormon (PTH)

06Manipulace a chov

Pěstovací médium
Alpha MEM, w: 2,0 mM stabilní glutamin, w: ribonukleosidy, w: deoxyribonukleosidy, w: 1,0 mM pyruvát sodný, w: 2,2 g/l NaHCO3, w/o: Kyselina askorbová (GIBCO, katalogové číslo A1049001. Tento produkt nedodáváme; zvažte prosím jiné dodavatele. Pokud potřebujete další pomoc, dejte nám prosím vědět.)
Inkubační atmosféra

37 °C, 5 %CO2, zvlhčená atmosféra.

Doplňky stravy
Doplňte médium o 10% FBS
Disociační činidlo
Accutase
Subkultivace
Odstraňte staré médium z adherovaných buněk a promyjte je PBS bez vápníku a hořčíku. Pro baňky T25 použijte 3-5 ml PBS a pro baňky T75 5-10 ml. Poté buňky zcela zakryjte přípravkem Accutase, přičemž použijte 1-2 ml pro baňky T25 a 2,5 ml pro baňky T75. Nechte buňky inkubovat při pokojové teplotě po dobu 8-10 minut, aby se oddělily. Po inkubaci jemně promíchejte buňky s 10 ml média, aby byly znovu suspendovány, a poté je odstřeďte při 300xg po dobu 3 minut. Supernatant vyhoďte, buňky znovu rozpusťte v čerstvém médiu a přeneste je do nových baněk, které již obsahují čerstvé médium.
Rozmrazování a kultivace
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kontrola kvality a kryokonzervace

Sterilita

Kontaminace mykoplazmaty je vyloučena jak pomocí testů založených na PCR, tak pomocí luminiscenčních metod detekce mykoplazmy.

Aby se zajistilo, že nedojde ke kontaminaci bakteriemi, plísněmi nebo kvasinkami, jsou buněčné kultury denně podrobovány vizuálním kontrolám.

Mrazicí médium
Jako kryokonzervační médium používáme kompletní růstové médium (včetně FBS) + 10 % DMSO pro zajištění dostatečné životaschopnosti po rozmrazení nebo CM-1 (katalogové číslo 800100 společnosti Cytion), které obsahuje optimalizované osmoprotektanty a metabolické stabilizátory pro zlepšení regenerace a snížení stresu způsobeného kryo.
Podmínky skladování

Pro dlouhodobé uchování umístěte lahvičky do kapalného dusíku v plynné fázi při teplotě přibližně -150 až -196 °C. Skladování při -80 °C je přijatelné pouze jako krátký přechodný krok před přemístěním do kapalného dusíku.

Dopravní podmínky

Kryokonzervované buněčné linie se přepravují na suchém ledu v ověřených, izolovaných obalech s dostatečným množstvím chladiva, aby se po celou dobu přepravy udržovala teplota přibližně -78 °C. Po obdržení ihned zkontrolujte obal a neprodleně přeneste lahvičky do vhodného skladu.

08Dárce

Plemeno / poddruh
C57BL/6
Věk dárce
1 den