Preskoči na vsebino
MC3T3-E1 Subclone 24
Tkivo
Kosti

Dokumenti

MC3T3-E1 Subclone 24

Cell line · Številka izdelka 305186

MC3T3-E1 Subclone 24 cells expressly represent a preosteoblast cell type, which plays a crucial role in bone formation. Morphologically, they exhibit a fi...

€430.00brez davka in stroškov poštnine

Prilagajanje / Priporočila

Na zalogi
Lot
Priporočeno (najsvežja pošiljka)
  • CoA
1

01Splošne informacije

Opis

Celice MC3T3-E1 podklona 24 izrecno predstavljajo tip celic preosteoblastov, ki imajo ključno vlogo pri tvorbi kosti. Morfološko so podobne fibroblastom, za katere sta značilni podolgovata oblika in vretenaste strukture. Ta posebni podklon izhaja iz tkiva kalvarija, področja lobanje, ki prispeva k tvorbi kosti. Ena od ključnih uporab celic podklona 24 MC3T3-E1 je v 3D-celični kulturi, kjer lahko raziskovalci preučujejo obnašanje in interakcije teh celic v tridimenzionalnem okolju. Ta metoda ponuja bolj fiziološko ustrezen model kot tradicionalne dvodimenzionalne celične kulture, kar omogoča boljše razumevanje zapletenih procesov, vključenih v tvorbo kosti.

Čeprav imajo te celice številne prednosti, je pomembno opozoriti na njihove posebne značilnosti. Pri celicah podklona 24 MC3T3-E1 je bilo ugotovljeno, da se ob izpostavljenosti askorbinski kislini, ki je ključna sestavina za spodbujanje rasti kostnih celic, slabo diferencirajo v osteoblaste. Poleg tega ne tvorijo mineraliziranega zunajceličnega matriksa, kar je ključni korak pri ustvarjanju kostnega tkiva. Čas podvojitve celic MC3T3-E1 subklon 24 je približno 90,5 ure.

Tkivo
Kosti
Uporaba
3D celična kultura, študije diferenciacije

02Razvrstitev

Organizem
Miška
Seks
Ni navedeno
Lastnosti rasti
Pripadnik
Stopnja biološke varnosti
1

03Značilnosti

Morfologija
Fibroblast
Vrsta celice
Osteoblast
Tumorigeničen
Da, pri imunosuprimiranih miših

04Identifikatorji

Navajanje vira
MC3T3-E1 podklon 24 (kataloška številka Cytion 305186)
Davčna identifikacijska številka NCBI
10090
Cellosaurus
CVCL_5438

05Izražanje in dovzetnost

Izraženi receptorji
Receptor za protein, povezan s parathormonom (PTHrP)
Ekspresija beljakovin
Kolagen, kostni sialoprotein (BSP), osteokalcin (OCN), paratiroidni hormon (PTH)

06Ravnanje in gojenje

Gojišče
Alpha MEM, w: 2,0 mM stabilnega glutamina, w: Ribonukleozidi, w: Deoksiribonukleozidi, w: 1,0 mM natrijevega piruvata, w: 2,2 g/L NaHCO3, w/o: Askorbinska kislina (GIBCO, kat. št. A1049001. Tega izdelka ne dobavljamo; prosimo, upoštevajte druge dobavitelje. Če potrebujete dodatno pomoč, nam to sporočite.)
Inkubacijska atmosfera

37 °C, 5 %CO2, vlažno ozračje.

Prehranska dopolnila
Gojišče dopolnite z 10 % FBS
Reagenca za disociacijo
Accutase
Preusmeritev v drugo kulturo
Odstranite staro gojišče z adherentnih celic in jih sperite s PBS, ki ne vsebuje kalcija in magnezija. Za bučke T25 uporabite 3-5 ml PBS, za bučke T75 pa 5-10 ml. Nato celice popolnoma prekrijte z Accutase, pri čemer uporabite 1-2 ml za bučke T25 in 2,5 ml za bučke T75. Celice pustite inkubirati pri sobni temperaturi 8-10 minut, da se ločijo. Po inkubaciji celice nežno premešajte z 10 ml gojišča, da se ponovno suspendirajo, nato jih 3 minute centrifugirajte pri 300xg. Zavrzite supernatant, ponovno suspendirajte celice v svežem gojišču in jih prenesite v nove bučke, ki že vsebujejo sveže gojišče.
Odtaljevanje in gojenje
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kontrola kakovosti in krioprezervacija

Sterilnost

Kontaminacija z mikoplazmo se izključi z uporabo testov na podlagi PCR in metod za odkrivanje mikoplazme na podlagi luminiscence.

Da se zagotovi, da ni kontaminacije z bakterijami, glivami ali kvasovkami, se celične kulture dnevno vizualno pregledujejo.

Medij za zamrzovanje
Kot gojišče za kriokonzervacijo uporabljamo popolno rastno gojišče (vključno s FBS) + 10 % DMSO za ustrezno vitalnost po odmrznitvi ali CM-1 (kataloška številka 800100 podjetja Cytion), ki vključuje optimizirane osmoprotektante in presnovne stabilizatorje za izboljšanje okrevanja in zmanjšanje stresa, povzročenega s kriom.
Pogoji shranjevanja

Za dolgotrajno shranjevanje viale postavite v tekoči dušik v parni fazi pri približno -150 do -196 °C. Shranjevanje pri -80 °C je sprejemljivo le kot kratek vmesni korak pred prenosom v tekoči dušik.

Pogoji dostave

Kriokonzervirane celične linije se pošiljajo na suhem ledu v potrjeni, izolirani embalaži z zadostno količino hladilnega sredstva, da se med prevozom vzdržuje približno -78 °C. Ob prejemu takoj preglejte embalažo in viale nemudoma prenesite v ustrezno skladišče.

08Donator

Pasma / podvrsta
C57BL/6
Starost darovalca
1 dan