Skip to content
MC3T3-E1 Subclone 24
Tissue
Xương

Documents

MC3T3-E1 Subclone 24

Cell line · Product number 305186

MC3T3-E1 Subclone 24 cells expressly represent a preosteoblast cell type, which plays a crucial role in bone formation. Morphologically, they exhibit a fi...

€430.00excl. tax and shipping

Customization / Recommendations

In stock
Lot
Recommended (freshest lot)
  • CoA
1

01General information

Description

Tế bào MC3T3-E1 Subclone 24 là đại diện điển hình cho loại tế bào tiền osteoblast, đóng vai trò quan trọng trong quá trình hình thành xương. Về mặt hình thái, chúng có hình dạng tương tự như tế bào fibroblast, đặc trưng bởi hình dạng kéo dài và cấu trúc dạng sợi. Subclone này được phân lập từ mô calvaria, một vùng của hộp sọ tham gia vào quá trình hình thành xương. Một trong những ứng dụng quan trọng của tế bào MC3T3-E1 Subclone 24 là trong nuôi cấy tế bào 3D, nơi các nhà nghiên cứu có thể nghiên cứu hành vi và tương tác của các tế bào này trong môi trường ba chiều. Phương pháp này cung cấp một mô hình sinh lý học phù hợp hơn so với nuôi cấy tế bào hai chiều truyền thống, giúp hiểu rõ hơn về các quá trình phức tạp liên quan đến quá trình hình thành xương.

Mặc dù các tế bào này có nhiều ưu điểm, nhưng cần lưu ý đến các đặc điểm cụ thể của chúng. Tế bào MC3T3-E1 Subclone 24 được quan sát thấy có khả năng biệt hóa osteoblast kém khi tiếp xúc với axit ascorbic, một thành phần quan trọng trong việc thúc đẩy sự phát triển của tế bào xương. Hơn nữa, chúng không hình thành ma trận ngoại bào khoáng hóa, một bước quan trọng trong việc tạo ra mô xương. Thời gian nhân đôi của tế bào MC3T3-E1 Subclone 24 là khoảng 90,5 giờ.

Tissue
Xương
Applications
văn hóa tế bào 3D, Nghiên cứu phân hóa

02Classification

Organism
Mouse
Sex
Unspecified
Growth properties
Adherent
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
Tế bào sợi
Cell type
Tế bào tạo xương
Tumourigenic
Đúng, ở chuột bị ức chế miễn dịch

04Identifiers

Citation
MC3T3-E1 Dòng con 24 (Số catalog Cytion 305186)
NCBI TaxID
10090
Cellosaurus
CVCL_5438

05Expression and susceptibility

Receptors expressed
Receptor của protein liên quan đến hormone tuyến cận giáp (PTHrP)
Protein expression
Collagen, protein sialic của xương (BSP), osteocalcin (OCN), hormone tuyến cận giáp (PTH)

06Handling and culture

Culture medium
Alpha MEM, w: 2,0 mM glutamine ổn định, w: ribonucleosides, w: deoxyribonucleosides, w: 1,0 mM natri pyruvate, w: 2,2 g/L NaHCO₃, w/o: axit ascorbic (GIBCO, Số catalog A1049001. Chúng tôi không cung cấp sản phẩm này; vui lòng xem xét các nhà cung cấp khác. Vui lòng cho chúng tôi biết nếu bạn cần hỗ trợ thêm.)
Incubation atmosphere

37°C, 5%CO₂, môi trường ẩm.

Supplements
Bổ sung 10% huyết thanh bò phôi (FBS) vào môi trường nuôi cấy
Dissociation reagent
Accutase
Subculturing
Loại bỏ môi trường nuôi cấy cũ khỏi các tế bào bám dính và rửa chúng bằng PBS không chứa canxi và magiê. Đối với bình T25, sử dụng 3-5 ml PBS, và đối với bình T75, sử dụng 5-10 ml. Sau đó, phủ hoàn toàn các tế bào bằng Accutase, sử dụng 1-2 ml cho bình T25 và 2,5 ml cho bình T75. Để tế bào ủ ở nhiệt độ phòng trong 8-10 phút để tách chúng ra. Sau khi ủ, nhẹ nhàng trộn tế bào với 10 ml môi trường để tái phân tán chúng, sau đó ly tâm ở 300xg trong 3 phút. Loại bỏ dịch trên, tái phân tán tế bào trong môi trường tươi và chuyển chúng vào các bình mới đã chứa môi trường tươi.
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Quality control and cryopreservation

Sterility

Sự nhiễm khuẩn Mycoplasma được loại trừ bằng cả các phương pháp xét nghiệm dựa trên PCR và các phương pháp phát hiện Mycoplasma dựa trên phát quang.

Để đảm bảo không có nhiễm khuẩn vi khuẩn, nấm hoặc men, các mẫu nuôi cấy tế bào được kiểm tra trực quan hàng ngày.

Freeze medium
Như một môi trường bảo quản đông lạnh, chúng tôi sử dụng môi trường tăng trưởng hoàn chỉnh (bao gồm FBS) + 10% DMSO để đảm bảo độ sống sau khi rã đông, hoặc CM-1 (mã sản phẩm Cytion 800100), bao gồm các chất bảo vệ thẩm thấu và chất ổn định chuyển hóa được tối ưu hóa để cải thiện quá trình phục hồi và giảm stress do đông lạnh gây ra.
Storage conditions

Để bảo quản lâu dài, hãy đặt ống nghiệm vào nitơ lỏng ở pha hơi ở nhiệt độ khoảng −150 đến −196 °C. Việc bảo quản ở −80 °C chỉ được chấp nhận như một bước trung gian ngắn hạn trước khi chuyển sang nitơ lỏng.

Shipping conditions

Các dòng tế bào được bảo quản bằng phương pháp đông lạnh được vận chuyển trên đá khô trong bao bì cách nhiệt đã được kiểm định, kèm theo lượng chất làm lạnh đủ để duy trì nhiệt độ khoảng −78 °C trong suốt quá trình vận chuyển. Khi nhận hàng, hãy kiểm tra ngay lập tức bao bì và chuyển các ống nghiệm sang nơi lưu trữ phù hợp mà không chậm trễ.

08Donor

Breed / subspecies
C57BL/6
Donor age
1 ngày