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MC3T3-E1 Subclone 24
Tessuto
Osso

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MC3T3-E1 Subclone 24

Cell line · Codice prodotto 305186

MC3T3-E1 Subclone 24 cells expressly represent a preosteoblast cell type, which plays a crucial role in bone formation. Morphologically, they exhibit a fi...

€430.00IVA e spese di spedizione escluse

Personalizzazione / Suggerimenti

Disponibile
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1

01Informazioni generali

Descrizione

Le cellule MC3T3-E1 del sottoclone 24 rappresentano espressamente un tipo di cellula preosteoblastica, che svolge un ruolo cruciale nella formazione ossea. Morfologicamente, presentano un aspetto simile a quello dei fibroblasti, caratterizzato da una forma allungata e da strutture simili a fusi. Questo particolare sottoclone deriva dal tessuto calvario, una regione del cranio che contribuisce alla formazione dell'osso. Una delle applicazioni principali delle cellule MC3T3-E1 del sottoclone 24 è la coltura cellulare 3D, in cui i ricercatori possono studiare il comportamento e le interazioni di queste cellule in un ambiente tridimensionale. Questo metodo offre un modello fisiologicamente più rilevante rispetto alle tradizionali colture cellulari bidimensionali, consentendo una migliore comprensione degli intricati processi coinvolti nella formazione ossea.

Sebbene queste cellule presentino numerosi vantaggi, è importante notare le loro caratteristiche specifiche. È stato osservato che le cellule MC3T3-E1 del sottoclone 24 mostrano una scarsa differenziazione degli osteoblasti quando sono esposte all'acido ascorbico, un componente chiave per promuovere la crescita delle cellule ossee. Inoltre, non formano una matrice extracellulare mineralizzata, una fase cruciale nella creazione di tessuto osseo. Il tempo di raddoppio delle cellule MC3T3-E1 Subclone 24 è di circa 90,5 ore.

Tessuto
Osso
Applicazioni
coltura cellulare 3D, studi di differenziazione

02Classificazione

Organismo
Mouse
Sesso
Non specificato
Proprietà di crescita
Aderente
Livello di biosicurezza
1

03Caratteristiche

Morfologia
Fibroblasti
Tipo di cellula
Osteoblasto
Tumorigenico
Sì, in topi immunosoppressi

04Identificatori

Riferimento bibliografico
MC3T3-E1 Sottoclone 24 (catalogo Cytion numero 305186)
Codice fiscale NCBI
10090
Cellosaurus
CVCL_5438

05Espressione e suscettibilità

Recettori espressi
Recettore della proteina correlata all'ormone paratiroideo (PTHrP)
Espressione proteica
Collagene, sialoproteina ossea (BSP), osteocalcina (OCN), ormone paratiroideo (PTH)

06Manipolazione e coltura

Terreno di coltura
Alpha MEM, w: 2,0 mM di glutammina stabile, w: ribonucleosidi, w: desossiribonucleosidi, w: 1,0 mM di piruvato di sodio, w: 2,2 g/L di NaHCO3, w/o: Acido ascorbico (GIBCO, n. di catalogo A1049001. Non forniamo questo prodotto; si prega di prendere in considerazione altri fornitori. Se avete bisogno di ulteriore assistenza, fatecelo sapere)
Atmosfera di incubazione

37°C, 5%CO2, atmosfera umidificata.

Integratori
Integrare il terreno di coltura con il 10% di FBS
Reagente di dissociazione
Accutase
Subcoltura
Rimuovere il vecchio terreno dalle cellule aderenti e lavarle con PBS privo di calcio e magnesio. Per le fiasche T25, utilizzare 3-5 ml di PBS e per le fiasche T75, 5-10 ml. Quindi, coprire completamente le cellule con Accutase, utilizzando 1-2 ml per le fiasche T25 e 2,5 ml per le fiasche T75. Lasciare incubare le cellule a temperatura ambiente per 8-10 minuti per staccarle. Dopo l'incubazione, mescolare delicatamente le cellule con 10 ml di terreno per risospenderle, quindi centrifugare a 300xg per 3 minuti. Scartare il surnatante, risospendere le cellule in terreno fresco e trasferirle in nuove fiasche contenenti terreno fresco.
Scongelamento e coltura
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Controllo di qualità e crioconservazione

Sterilità

La contaminazione da micoplasma viene esclusa utilizzando sia saggi basati sulla PCR sia metodi di rilevamento del micoplasma basati sulla luminescenza.

Per garantire l'assenza di contaminazione batterica, fungina o da lieviti, le colture cellulari sono sottoposte a ispezioni visive quotidiane.

Terreno di coltura congelato
Come terreno di crioconservazione, utilizziamo un terreno di crescita completo (incluso FBS) + 10% DMSO per un'adeguata vitalità post-scongelamento, o CM-1 (numero di catalogo Cytion 800100), che include osmoprotettori e stabilizzatori metabolici ottimizzati per migliorare il recupero e ridurre lo stress crio-indotto.
Condizioni di conservazione

Per la conservazione a lungo termine, porre le fiale in azoto liquido in fase vapore a una temperatura compresa tra -150 e -196 °C circa. La conservazione a -80 °C è accettabile solo come breve fase intermedia prima del trasferimento in azoto liquido.

Condizioni di spedizione

Le linee cellulari crioconservate vengono spedite su ghiaccio secco in confezioni isolate e convalidate, con una quantità di refrigerante sufficiente a mantenere circa -78 °C durante il trasporto. Al ricevimento, ispezionare immediatamente il contenitore e trasferire immediatamente le fiale in un luogo di conservazione appropriato.

08Donatore

Razza / sottospecie
C57BL/6
Età dei donatori
1 giorno