Gå direkte til indholdet
MC3T3-E1 Subclone 24
Væv
Knogle

Dokumenter

MC3T3-E1 Subclone 24

Cell line · Varenummer 305186

MC3T3-E1 Subclone 24 cells expressly represent a preosteoblast cell type, which plays a crucial role in bone formation. Morphologically, they exhibit a fi...

€430.00ekskl. moms og fragt

Tilpasning / Anbefalinger

På lager
Lot
Anbefalet (det nyeste parti)
  • CoA
1

01Generelle oplysninger

Beskrivelse

MC3T3-E1 Subclone 24-celler repræsenterer udtrykkeligt en præosteoblast-celletype, som spiller en afgørende rolle i knogledannelsen. Morfologisk udviser de et fibroblastlignende udseende, der er kendetegnet ved deres langstrakte form og spindellignende strukturer. Denne særlige subklon stammer fra calvarievæv, en kranieregion, der bidrager til knogledannelse. En af de vigtigste anvendelser af MC3T3-E1 Subclone 24 Cells ligger i 3D-cellekultur, hvor forskere kan studere disse cellers adfærd og interaktioner i et tredimensionelt miljø. Denne metode giver en mere fysiologisk relevant model end traditionelle todimensionelle cellekulturer, hvilket giver mulighed for en bedre forståelse af de indviklede processer, der er involveret i knogledannelse.

Selv om disse celler har mange fordele, er det vigtigt at være opmærksom på deres specifikke egenskaber. MC3T3-E1 Subclone 24 Cells har vist sig at udvise dårlig osteoblastdifferentiering, når de udsættes for ascorbinsyre, en nøglekomponent til fremme af knoglecellevækst. Desuden danner de ikke en mineraliseret ekstracellulær matrix, som er et afgørende trin i dannelsen af knoglevæv. Fordoblingstiden for MC3T3-E1 Subclone 24 Cells er ca. 90,5 timer.

Væv
Knogle
Anvendelser
3D-cellekultur, differentieringsundersøgelser

02Klassificering

Organisme
Mus
Køn
Uspecificeret
Vækstegenskaber
Tilhænger
Biosikkerhedsniveau
1

03Egenskaber

Morfologi
Fibroblast
Celletype
Osteoblast
Tumorfremkaldende
Yeees, i immunsupprimerede mus

04Identifikatorer

Kildehenvisning
MC3T3-E1 Subclone 24 (Cytion katalognummer 305186)
NCBI-skattenummer
10090
Cellosaurus
CVCL_5438

05Udtryk og modtagelighed

Udtrykte receptorer
Parathyreoideahormon-relateret protein (PTHrP) receptor
Proteinekspression
Kollagen, knoglesialoprotein (BSP), osteocalcin (OCN), parathyreoideahormon (PTH)

06Håndtering og opdræt

Næringsmedium
Alpha MEM, w: 2,0 mM stabil glutamin, w: Ribonukleosider, w: Deoxyribonukleosider, w: 1,0 mM natriumpyruvat, w: 2,2 g/L NaHCO3, w/o: Ascorbinsyre (GIBCO, katalognr. A1049001. Vi leverer ikke dette produkt; overvej venligst andre leverandører. Lad os vide, hvis du har brug for yderligere hjælp)
Inkubationsatmosfære

37°C, 5%CO2, befugtet atmosfære.

Kosttilskud
Suppler mediet med 10% FBS
Dissociationsreagens
Accutase
Oddyrkning
Fjern det gamle medium fra de klæbende celler, og vask dem med PBS, der ikke indeholder calcium og magnesium. Brug 3-5 ml PBS til T25-kolber og 5-10 ml til T75-kolber. Dæk derefter cellerne helt med Accutase, brug 1-2 ml til T25-kolber og 2,5 ml til T75-kolber. Lad cellerne inkubere ved stuetemperatur i 8-10 minutter for at løsne dem. Efter inkubationen blandes cellerne forsigtigt med 10 ml medium for at resuspendere dem, og centrifugeres derefter ved 300xg i 3 minutter. Kassér supernatanten, resuspender cellerne i frisk medium, og overfør dem til nye kolber, der allerede indeholder frisk medium.
Optøning og dyrkning
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitetskontrol og kryopræservering

Sterilitet

Mycoplasma-kontaminering udelukkes ved hjælp af både PCR-baserede assays og luminescensbaserede mycoplasma-detektionsmetoder.

For at sikre, at der ikke er nogen bakterie-, svampe- eller gærforurening, underkastes cellekulturerne daglige visuelle inspektioner.

Frysemedium
Som kryopræserveringsmedium bruger vi komplet vækstmedium (inklusive FBS) + 10 % DMSO for tilstrækkelig levedygtighed efter optøning eller CM-1 (Cytion-katalognummer 800100), som indeholder optimerede osmobeskyttende stoffer og metaboliske stabilisatorer for at forbedre genopretningen og reducere kryo-induceret stress.
Opbevaringsbetingelser

For langtidsopbevaring anbringes hætteglas i flydende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Opbevaring ved -80 °C er kun acceptabelt som et kort mellemtrin før overførsel til flydende nitrogen.

Leveringsbetingelser

Kryopræserverede cellelinjer sendes på tøris i valideret, isoleret emballage med tilstrækkeligt kølemiddel til at opretholde ca. -78 °C under hele transporten. Ved modtagelse skal beholderen straks inspiceres, og hætteglassene skal straks overføres til passende opbevaring.

08Donor

Race / underart
C57BL/6
Donorens alder
1 dag