الانتقال إلى المحتوى
MC3T3-E1 Subclone 24
الأنسجة
العظام

المستندات

MC3T3-E1 Subclone 24

Cell line · رقم المنتج 305186

MC3T3-E1 Subclone 24 cells expressly represent a preosteoblast cell type, which plays a crucial role in bone formation. Morphologically, they exhibit a fi...

€430.00باستثناء الضريبة وتكاليف الشحن

التخصيص / التوصيات

متوفر
لوت
موصى بها (أحدث دفعة)
  • CoA
1

01معلومات عامة

الوصف

تمثل خلايا MC3T3-E1 الفرعية 24 صراحةً نوعاً من خلايا ما قبل الأرومة الأرومية قبل العظمية التي تلعب دوراً حاسماً في تكوين العظام. ومن الناحية الشكلية، تُظهر هذه الخلايا مظهراً شبيهاً بالخلايا الليفية، وتتميز بشكلها الممدود وهياكلها الشبيهة بالمغزل. تُشتق هذه السلالة الفرعية الخاصة من نسيج الكالفاريا، وهي منطقة الجمجمة التي تساهم في تكوين العظام. ويكمن أحد التطبيقات الهامة لخلايا MC3T3-E1 Subclone 24 المستنسخة الفرعية في زراعة الخلايا ثلاثية الأبعاد، حيث يمكن للباحثين دراسة سلوك هذه الخلايا وتفاعلاتها في بيئة ثلاثية الأبعاد. وتوفر هذه الطريقة نموذجاً أكثر ملاءمة من الناحية الفسيولوجية من مزارع الخلايا التقليدية ثنائية الأبعاد، مما يسمح بفهم أفضل للعمليات المعقدة التي ينطوي عليها تكوين العظام.

وفي حين أن هذه الخلايا تتمتع بالعديد من المزايا، إلا أنه من المهم ملاحظة خصائصها المحددة. فقد لوحظ أن خلايا MC3T3-E1 Subclone 24 تُظهر تمايزاً ضعيفاً للأرومة العظمية عند تعرضها لحمض الأسكوربيك، وهو مكون رئيسي لتعزيز نمو خلايا العظام. وعلاوة على ذلك، فإنها لا تشكل مصفوفة معدنية خارج الخلية، وهي خطوة حاسمة في تكوين النسيج العظمي. يبلغ زمن تضاعف خلايا MC3T3-E1 الفرعية 24 حوالي 90.5 ساعة.

الأنسجة
العظام
التطبيقات
زراعة الخلايا ثلاثية الأبعاد، دراسات التمايز

02التصنيف

كائن حي
الماوس
الجنس
غير محدد
خصائص النمو
الملتزم
مستوى السلامة البيولوجية
1

03الخصائص

المورفولوجيا
الأرومة الليفية
نوع الخلية
الأرومة العظمية
مُسبِّب للأورام
نعم، في الفئران المثبطة للمناعة

04المعرّفات

المرجع
السلالة الفرعية MC3T3-E1 24 (كتالوج سيتيون رقم الكتالوج 305186)
رقم التعريف الضريبي لدى NCBI
10090
سيلوصور
CVCL_5438

05التعبير والقابلية للإصابة

المستقبلات المُعبَّر عنها
مستقبلات البروتين المرتبط بهرمون الغدة الجار درقية (PTHrP)
التعبير البروتيني
الكولاجين، البروتين السيالوبروتي العظمي (BSP)، أوستيوكالسين (OCN)، هرمون الغدة الجار درقية (PTH)

06التعامل مع النباتات وزراعتها

وسط الاستزراع
Alpha MEM، ث: 2.0 مللي مولار جلوتامين مستقر، ث: ريبونوكليوسيدات، ث: ديوكسي ريبونوكليوسيدات، ث: 1.0 مللي مولار بيروفات الصوديوم، ث: 2.2 جم/لتر NaHCO3، ث: 1.0 مللي مولار بيروفات الصوديوم، ث: 2.2 جم/لتر NaHCO3، ث حمض الأسكوربيك (GIBCO، رقم الكتالوج A1049001. نحن لا نوفر هذا المنتج؛ يرجى النظر في الموردين الآخرين. يرجى إعلامنا إذا كنت بحاجة إلى مزيد من المساعدة)
بيئة الحضانة

37 درجة مئوية، و5% من ثاني أكسيد الكربون في جو مرطب.

المكملات الغذائية
قم بتزويد الوسط ب 10٪ من ال FBS
كاشف التفكك
أكوتاس
إعادة الاستنبات
قم بإزالة الوسط القديم من الخلايا الملتصقة واغسلها باستخدام PBS الذي يفتقر إلى الكالسيوم والمغنيسيوم. بالنسبة لقوارير T25، استخدم 3-5 مل من PBS، وبالنسبة لقوارير T75، استخدم 5-10 مل. ثم، قم بتغطية الخلايا بالكامل باستخدام أكوتاز، باستخدام 1-2 مل لقوارير T25 و2.5 مل لقوارير T75. دع الخلايا تحتضن في درجة حرارة الغرفة لمدة 8-10 دقائق لفصلها. بعد الحضانة، اخلط الخلايا برفق مع 10 مل من الوسط لإعادة ترسيبها، ثم اطردها مركزيًا بسرعة 300xg لمدة 3 دقائق. تخلص من المادة الطافية، وأعد غمر الخلايا في وسط جديد وانقلها إلى قوارير جديدة تحتوي بالفعل على وسط جديد.
إذابة الثلج والزراعة
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07مراقبة الجودة والحفظ بالتبريد

العقم

يُستبعد التلوث بالميكوبلازما باستخدام كل من المقايسات القائمة على تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR) وطرق الكشف عن الميكوبلازما القائمة على التألق.

ولضمان عدم وجود تلوث بكتيري أو فطري أو خميرة يتم إخضاع مزارع الخلايا للفحص البصري اليومي.

وسط التجميد
كوسيط للحفظ بالتبريد، نستخدم وسط نمو كامل (بما في ذلك FBS) + 10% DMSO من أجل الحفاظ على حيوية كافية بعد ذوبان الجليد أو CM-1 (كتالوج Cytion رقم 800100)، والذي يتضمن مواد حماية أسموزموبيروتيكتية ومثبتات أيضية مُحسّنة لتعزيز التعافي وتقليل الإجهاد الناجم عن التبريد.
شروط التخزين

للحفظ طويل الأمد، ضع القوارير في نيتروجين سائل في طور البخار عند درجة حرارة تتراوح بين -150 و -196 درجة مئوية تقريباً. يُقبل التخزين عند درجة حرارة -80 درجة مئوية فقط كخطوة مؤقتة قصيرة قبل النقل إلى النيتروجين السائل.

شروط الشحن

تُشحن خطوط الخلايا المحفوظة بالتبريد على ثلج جاف في عبوات معزولة وموثوقة مع مبرد كافٍ للحفاظ على درجة حرارة -78 درجة مئوية تقريبًا طوال فترة النقل. عند الاستلام، افحص الحاوية على الفور وانقل القوارير دون تأخير إلى المخزن المناسب.

08المانح

السلالة / النوع الفرعي
C57BL/6
عمر المتبرع
1 يوم واحد