Pāriet uz saturu
MC3T3-E1 Subclone 24
Audums
Bone

Dokumenti

MC3T3-E1 Subclone 24

Cell line · Preces numurs 305186

MC3T3-E1 Subclone 24 cells expressly represent a preosteoblast cell type, which plays a crucial role in bone formation. Morphologically, they exhibit a fi...

€430.00bez nodokļa un piegādes izmaksām

Pielāgošana / Ieteikumi

Noliktavā
Lot
Ieteicams (jaunākā partija)
  • CoA
1

01Vispārīga informācija

Apraksts

MC3T3-E1 24. subklona šūnas nepārprotami pārstāv preosteoblastu šūnu tipu, kam ir izšķiroša nozīme kaulu veidošanā. Morfoloģiski tām piemīt fibroblastiem līdzīgs izskats, kam raksturīga iegarena forma un vārpstiņveida struktūras. Šis konkrētais apakšklons ir atvasināts no kalvarijas audiem, kas ir galvaskausa reģions, kurš veicina kaulu veidošanos. Viens no būtiskākajiem MC3T3-E1 24. subklona šūnu lietojumiem ir 3D šūnu kultūras, kur pētnieki var pētīt šo šūnu uzvedību un mijiedarbību trīsdimensiju vidē. Šī metode piedāvā fizioloģiski atbilstošāku modeli nekā tradicionālās divdimensiju šūnu kultūras, ļaujot labāk izprast sarežģītos kaulu veidošanās procesus.

Lai gan šīm šūnām ir daudz priekšrocību, ir svarīgi atzīmēt to specifiskās īpašības. Ir novērots, ka MC3T3-E1 24. subklona šūnām piemīt vāja osteoblastu diferenciācija, ja tās tiek pakļautas askorbīnskābes - galvenā komponenta, kas veicina kaulu šūnu augšanu, - iedarbībai. Turklāt tās neveido mineralizētu āršūnu matricu, kas ir būtisks solis kaulaudu veidošanā. MC3T3-E1 24 subklona šūnu dubultošanās laiks ir aptuveni 90,5 stundas.

Audums
Bone
Pieteikumi
3D šūnu kultūras, diferenciācijas pētījumi

02Klasifikācija

Organisms
Pele
Sekss
Nav norādīts
Augšanas īpašības
Atbalstītājs
Bioloģiskās drošības līmenis
1

03Raksturlielumi

Morfoloģija
Fibroblasti
Šūnu tips
Osteoblasts
Tumorogēns
Jā, imunosupresētām pelēm

04Identifikatori

Atsauce
MC3T3-E1 subklons 24 (Cytion kataloga numurs 305186)
NCBI nodokļu identifikācijas numurs
10090
Cellosaurus
CVCL_5438

05Pazīmes un uzņēmība

Ekspresētie receptori
Ar parathormonu saistītā proteīna (PTHrP) receptors
Proteīnu ekspresija
Kolagēns, kaulu sialoproteīns (BSP), osteokalcīns (OCN), parathormons (PTH)

06Apstrāde un audzēšana

Barotne
Alpha MEM, w: 2,0 mM stabils glutamīns, w: Ribonukleozīdi, w: Deoksiribonukleozīdi, w: 1,0 mM nātrija piruvāts, w: 2,2 g/L NaHCO3, w/o: Askorbīnskābe (GIBCO, kataloga Nr. A1049001. Mēs nepiegādājam šo produktu; lūdzu, apsveriet citus piegādātājus. Lūdzu, informējiet mūs, ja jums nepieciešama papildu palīdzība.)
Inkubācijas vide

37°C, 5%CO2, mitrināta atmosfēra.

Papildinājumi
Papildināt barotni ar 10% FBS
Disociācijas reaģents
Accutase
Pārstādīšana
Noņemt veco barotni no pielipušajām šūnām un mazgāt tās ar PBS, kurā nav kalcija un magnija. T25 kolbām izmantojiet 3-5 ml PBS, bet T75 kolbām - 5-10 ml. Pēc tam pilnībā pārklājiet šūnas ar Accutase, izmantojot 1-2 ml T25 kolbām un 2,5 ml T75 kolbām. Ļaujiet šūnām inkubēties istabas temperatūrā 8-10 minūtes, lai tās atdalītos. Pēc inkubācijas uzmanīgi samaisiet šūnas ar 10 ml barotnes, lai tās atkārtoti suspendētu, pēc tam centrifugējiet 3 minūtes ar 300xg. Izmetiet supernatantu, atkārtoti suspendējiet šūnas svaigā barotnē un pārvietojiet tās jaunās kolbās, kurās jau ir svaiga barotne.
Atkausēšana un kultivēšana
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitātes kontrole un kriokonservācija

Sterilitāte

Mikoplazmas piesārņojums tiek izslēgts, izmantojot gan uz PCR balstītus testus, gan uz luminiscenci balstītas mikoplazmas noteikšanas metodes.

Lai pārliecinātos, ka nav baktēriju, sēnīšu vai rauga piesārņojuma, šūnu kultūras katru dienu vizuāli pārbauda.

Saldēšanas barotne
Kā kriokonservēšanas barotni mēs izmantojam pilnvērtīgu augšanas barotni (ieskaitot FBS) + 10 % DMSO, lai nodrošinātu pietiekamu dzīvotspēju pēc atkausēšanas, vai CM-1 (Cytion kataloga numurs 800100), kas ietver optimizētus osmoprotektorus un metaboliskos stabilizatorus, lai uzlabotu atveseļošanos un samazinātu krioinducēto stresu.
Uzglabāšanas nosacījumi

Ilgstošai uzglabāšanai flakonus ievietojiet šķidrā slāpeklī ar tvaika fāzi aptuveni -150 līdz -196 °C temperatūrā. Uzglabāšana -80 °C temperatūrā ir pieļaujama tikai kā īss starpposms pirms pārvietošanas uz šķidro slāpekli.

Piegādes nosacījumi

Kriokonservētas šūnu līnijas tiek sūtītas uz sausā ledus apstiprinātā, izolētā iepakojumā ar pietiekamu dzesēšanas šķidruma daudzumu, lai visā transportēšanas laikā uzturētu aptuveni -78 °C temperatūru. Pēc saņemšanas nekavējoties pārbaudiet iepakojumu un nekavējoties pārvietojiet flakonus uz atbilstošu uzglabāšanas vietu.

08Ziedotājs

Šķirne / pasuga
C57BL/6
Donora vecums
1 diena