Mine otse sisu juurde
MC3T3-E1 Subclone 24
Kude
Bone

Dokumendid

MC3T3-E1 Subclone 24

Cell line · Toote number 305186

MC3T3-E1 Subclone 24 cells expressly represent a preosteoblast cell type, which plays a crucial role in bone formation. Morphologically, they exhibit a fi...

€430.00ilma käibemaksu ja saatmiskuludeta

Kohandamine / Soovitused

Laos
Lot
Soovitatav (värskeim partii)
  • CoA
1

01Üldine teave

Kirjeldus

MC3T3-E1 subkloon 24 rakud esindavad selgelt preosteoblastide rakutüüpi, millel on oluline roll luustiku moodustamisel. Morfoloogiliselt on neil fibroblastide sarnane välimus, mida iseloomustavad nende piklik kuju ja spindlilaadsed struktuurid. See konkreetne alamkloon pärineb calvaria koest, mis on kolju piirkond, mis aitab kaasa luu moodustumisele. MC3T3-E1 subkloon 24 rakkude üks olulisemaid rakendusi on 3D rakukultuur, kus teadlased saavad uurida nende rakkude käitumist ja koostoimet kolmemõõtmelises keskkonnas. See meetod pakub füsioloogiliselt asjakohasemat mudelit kui traditsioonilised kahemõõtmelised rakukultuurid, mis võimaldab paremini mõista luu moodustamisega seotud keerulisi protsesse.

Kuigi neil rakkudel on mitmeid eeliseid, on oluline märkida nende eripära. MC3T3-E1 subkloon 24 rakkude puhul on täheldatud, et need diferentseeruvad halvasti osteoblastideks, kui nad puutuvad kokku askorbiinhappega, mis on peamine komponent luurakkude kasvu soodustamiseks. Lisaks ei moodusta nad mineraliseerunud rakuvälise maatriksi, mis on oluline samm luukoe loomisel. MC3T3-E1 Subclone 24 rakkude kahekordistumisaeg on ligikaudu 90,5 tundi.

Kude
Bone
Rakendused
3D rakukultuur, diferentseerumise uuringud

02Klassifikatsioon

Organism
Hiir
Sugu
Määratlemata
Kasvuvõime
Järgija
Bioloogilise ohutuse tase
1

03Omadused

Morfoloogia
Fibroblastide
Rakutüüp
Osteoblastid
Tuumorigeenne
Jah, immuunsupressiooniga hiirtel

04Tunnused

Viide
MC3T3-E1 subkloon 24 (Cytion katalooginumber 305186)
NCBI maksukood
10090
Cellosaurus
CVCL_5438

05Avaldumine ja vastuvõtlikkus

Ekspresseeritud retseptorid
Kõrvalkilpnäärme hormooniga seotud valgu (PTHrP) retseptor
Valgu ekspressioon
Kollageen, luu sialoproteiin (BSP), osteokaltsiin (OCN), parathormoon (PTH)

06Käsitlemine ja kasvatamine

Kasvatuskeskkond
Alpha MEM, w: 2,0 mM stabiilne glutamiin, w: ribonukleosiidid, w: desoksüribonukleosiidid, w: 1,0 mM naatriumpüruvaat, w: 2,2g/L NaHCO3, w/o: Askorbiinhape (GIBCO, kataloogi nr A1049001. Me ei tarni seda toodet; palun kaaluge teisi tarnijaid. Palun andke meile teada, kui vajate täiendavat abi)
Inkubatsiooni keskkond

37°C, 5%CO2, niisutatud atmosfäär.

Toidulisandid
Täiendada söötme 10% FBS-ga
Dissotsiatsioonireaktiiv
Accutase
Kultuuri edasikasvatamine
Eemaldage kleepunud rakkudelt vana söötme ja peske neid PBS-ga, milles puudub kaltsium ja magneesium. T25 kolbide puhul kasutage 3-5 ml PBS-i ja T75 kolbide puhul 5-10 ml. Seejärel katke rakud täielikult Accutase'iga, kasutades 1-2 ml T25 kolbide puhul ja 2,5 ml T75 kolbide puhul. Laske rakkudel inkubeerida 8-10 minutit toatemperatuuril, et need eralduksid. Pärast inkubeerimist segage rakud ettevaatlikult 10 ml söötmega, et neid resuspenseerida, seejärel tsentrifuugige 3 minutit 300xg juures. Visake supernatant ära, suspenseerige rakud uuesti värskes keskkonnas ja viige need uutesse kolvidesse, mis sisaldavad juba värsket keskkonda.
Sulatamine ja kasvatamine
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvaliteedikontroll ja krüokonserveerimine

Viljatus

Mükoplasmakontaminatsioon on välistatud nii PCR-põhiste analüüside kui ka luminestsentsil põhinevate mükoplasma tuvastamise meetodite abil.

Bakteriaalse, seene- või pärmsaaste puudumise tagamiseks kontrollitakse rakukultuure iga päev visuaalselt.

Külmutuskeskkond
Krüosäilitusvedelikusena kasutame täielikku kasvukeskkonda (sh FBS) + 10% DMSO, et tagada piisav elujõulisus pärast sulatamist, või CM-1 (Cytioni katalooginumber 800100), mis sisaldab optimeeritud osmoprotektante ja metaboolseid stabilisaatoreid, et parandada taastumist ja vähendada krüostressi.
Säilitamistingimused

Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.

Tarne- ja kohaletoimetamistingimused

Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.

08Annetaja

Tõug / alamliik
C57BL/6
Doonori vanus
1 päev