MC3T3-E1 Subclone 24
Cell line · Numer produktu 305186
MC3T3-E1 Subclone 24 cells expressly represent a preosteoblast cell type, which plays a crucial role in bone formation. Morphologically, they exhibit a fi...
Dostosowanie / Zalecenia
- MC3T3-E1 Subclone 24Cell line€430.00
Polecane (najświeższa partia)
01Informacje ogólne
- Opis
Komórki MC3T3-E1 Subclone 24 wyraźnie reprezentują typ komórek preosteoblastycznych, który odgrywa kluczową rolę w tworzeniu kości. Morfologicznie wykazują one wygląd podobny do fibroblastów, charakteryzujący się wydłużonym kształtem i wrzecionowatymi strukturami. Ten konkretny podklon pochodzi z tkanki kalwarii, regionu czaszki przyczyniającego się do tworzenia kości. Jednym z kluczowych zastosowań komórek podklonu 24 MC3T3-E1 jest hodowla komórkowa 3D, w której naukowcy mogą badać zachowanie i interakcje tych komórek w trójwymiarowym środowisku. Metoda ta oferuje bardziej fizjologiczny model niż tradycyjne dwuwymiarowe hodowle komórkowe, pozwalając na lepsze zrozumienie skomplikowanych procesów związanych z tworzeniem kości.
Chociaż komórki te mają wiele zalet, ważne jest, aby zwrócić uwagę na ich specyficzne cechy. Zaobserwowano, że komórki MC3T3-E1 Subclone 24 wykazują słabe różnicowanie osteoblastów pod wpływem kwasu askorbinowego, kluczowego składnika promującego wzrost komórek kostnych. Co więcej, nie tworzą one zmineralizowanej macierzy zewnątrzkomórkowej, co jest kluczowym etapem w tworzeniu tkanki kostnej. Czas podwojenia komórek MC3T3-E1 Subclone 24 wynosi około 90,5 godziny.
- Chusteczka
- Kość
- Zastosowania
- hodowla komórek 3D, badania różnicowania
02Klasyfikacja
- Organizm
- Mysz
- Seks
- Nieokreślone
- Właściwości związane ze wzrostem
- Zwolennik
- Poziom bezpieczeństwa biologicznego
- 1
03Cechy charakterystyczne
- Morfologia
- Fibroblast
- Typ komórki
- Osteoblast
- Nowotworotwórczy
- Tak, u myszy z obniżoną odpornością
04Identyfikatory
- Źródło
- Subklon 24 MC3T3-E1 (numer katalogowy Cytion 305186)
- Numer identyfikacji podatkowej NCBI
- 10090
- Cellosaurus
- CVCL_5438
05Ekspresja i podatność
- Receptory ulegające ekspresji
- Receptor białka związanego z hormonem przytarczyc (PTHrP)
- Ekspresja białek
- Kolagen, sialoproteina kostna (BSP), osteokalcyna (OCN), hormon przytarczyc (PTH)
06Postępowanie i hodowla
- Pożywka hodowlana
- Alpha MEM, w: 2.0 mM stabilna Glutamina, w: Rybonukleozydy, w: Deoksyrybonukleozydy, w: 1.0 mM Pirogronian sodu, w: 2.2g/L NaHCO3, w/o: Kwas askorbinowy (GIBCO, nr katalogowy A1049001. Nie dostarczamy tego produktu; prosimy o rozważenie innych dostawców. Jeśli potrzebujesz dalszej pomocy, daj nam znać)
- Atmosfera inkubacyjna
37°C, 5%CO2, nawilżona atmosfera.
- Suplementy
- Uzupełnić podłoże 10% FBS
- Odczynnik dysocjacyjny
- Accutase
- Hodowla komórek w subkulturze
- Usuń starą pożywkę z przylegających komórek i przemyj je PBS, który nie zawiera wapnia i magnezu. W przypadku kolb T25 należy użyć 3-5 ml PBS, a w przypadku kolb T75 5-10 ml. Następnie całkowicie pokryj komórki Accutase, używając 1-2 ml dla kolb T25 i 2,5 ml dla kolb T75. Pozwól komórkom inkubować w temperaturze pokojowej przez 8-10 minut, aby je oddzielić. Po inkubacji delikatnie wymieszaj komórki z 10 ml pożywki, aby ponownie je zawiesić, a następnie odwiruj przy 300xg przez 3 minuty. Odrzucić supernatant, ponownie zawiesić komórki w świeżej pożywce i przenieść je do nowych kolb zawierających już świeżą pożywkę.
- Rozmrażanie i hodowla
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Kontrola jakości i kriokonserwacja
- Bezpłodność
Zanieczyszczenie mykoplazmą jest wykluczane przy użyciu zarówno testów opartych na PCR, jak i metod wykrywania mykoplazmy opartych na luminescencji.
Aby upewnić się, że nie ma zanieczyszczenia bakteriami, grzybami lub drożdżami, hodowle komórkowe są poddawane codziennym kontrolom wizualnym.
- Pożywka do zamrażania
- Jako pożywki do kriokonserwacji używamy kompletnej pożywki wzrostowej (w tym FBS) + 10% DMSO w celu zapewnienia odpowiedniej żywotności po rozmrożeniu lub CM-1 (numer katalogowy Cytion 800100), która zawiera zoptymalizowane osmoprotektanty i stabilizatory metaboliczne w celu zwiększenia regeneracji i zmniejszenia stresu wywołanego kriokonserwacją.
- Warunki przechowywania
W celu długotrwałego przechowywania należy umieścić fiolki w ciekłym azocie w fazie lotnej w temperaturze od -150 do -196 °C. Przechowywanie w temperaturze -80 °C jest dopuszczalne tylko jako krótki etap przejściowy przed przeniesieniem do ciekłego azotu.
- Warunki wysyłki
Linie komórkowe poddane kriokonserwacji są wysyłane w suchym lodzie w zatwierdzonych, izolowanych opakowaniach z wystarczającą ilością czynnika chłodniczego, aby utrzymać temperaturę około -78°C przez cały czas transportu. Po otrzymaniu przesyłki należy natychmiast sprawdzić pojemnik i bezzwłocznie przenieść fiolki do odpowiedniego miejsca przechowywania.
08Darczyńca
- Rasa / podgatunek
- C57BL/6
- Wiek dawcy
- 1 dzień
09Kwestie prawne i bezpieczeństwo
- Środki bezpieczeństwa
- Planując przechowywanie kriofiolek w ciekłym azocie w celu ich późniejszego rozmrożenia, należy bezwzględnie przestrzegać rygorystycznych środków bezpieczeństwa. Niezbędne są odpowiednie rękawice i odzież ochronna, a podczas przenoszenia zamrożonych próbek do lub ze zbiornika z ciekłym azotem wymagane jest stosowanie maski lub okularów ochronnych. Ma to na celu zmniejszenie ryzyka obrażeń spowodowanych potencjalnymi eksplozjami kriowialu podczas wyjmowania, które mogą skutkować wyrzuceniem ostrych fragmentów.
- Gwarancja
W Cytion gwarantujemy jakość i żywotność naszych produktów. Gwarantujemy, że nasze komórki będą żywotne na początku hodowli przez 60 dni po wysyłce z naszych zakładów. Zapewniamy, że wszystkie materiały są zgodne ze specyfikacjami opisanymi w certyfikacie analizy i/lub karcie produktu
Szczegółowe informacje można znaleźć w naszej <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Oświadczeniu gwarancyjnym
- Wymagana umowa o transferze materiałów
- Tak
