İçeriğe atla
MC3T3-E1 Subclone 24
Doku
Kemik

MC3T3-E1 Subclone 24

Cell line · Ürün numarası 305186

MC3T3-E1 Subclone 24 cells expressly represent a preosteoblast cell type, which plays a crucial role in bone formation. Morphologically, they exhibit a fi...

€430.00vergi ve kargo hariç

Kişiselleştirme / Öneriler

Stokta mevcut
Lot
Önerilen (en taze parti)
  • CoA
1

01Genel bilgiler

Açıklama

MC3T3-E1 Subclone 24 hücreleri, kemik oluşumunda önemli bir rol oynayan bir preosteoblast hücre tipini açıkça temsil eder. Morfolojik olarak, uzun şekilleri ve iğ benzeri yapıları ile karakterize fibroblast benzeri bir görünüm sergilerler. Bu özel alt klon, kemik oluşumuna katkıda bulunan bir kafatası bölgesi olan kalvarya dokusundan türetilmiştir. MC3T3-E1 Subclone 24 Hücrelerinin kritik uygulamalarından biri, araştırmacıların bu hücrelerin davranışlarını ve etkileşimlerini üç boyutlu bir ortamda inceleyebilecekleri 3D hücre kültüründe yatmaktadır. Bu yöntem, geleneksel iki boyutlu hücre kültürlerine kıyasla fizyolojik açıdan daha uygun bir model sunarak kemik oluşumunda yer alan karmaşık süreçlerin daha iyi anlaşılmasını sağlar.

Bu hücreler çok sayıda avantaja sahip olsa da, spesifik özelliklerine dikkat etmek önemlidir. MC3T3-E1 Subclone 24 Hücrelerinin, kemik hücresi büyümesini teşvik etmek için anahtar bir bileşen olan askorbik aside maruz kaldıklarında zayıf osteoblast farklılaşması sergiledikleri gözlemlenmiştir. Ayrıca, kemik dokusu oluşturmada çok önemli bir adım olan mineralize bir hücre dışı matris oluşturmazlar. MC3T3-E1 Subclone 24 Hücrelerinin iki katına çıkma süresi yaklaşık 90,5 saattir.

Doku
Kemik
Uygulamalar
3D hücre kültürü, Farklılaşma çalışmaları

02Sınıflandırma

Canlı
Fare
Cinsiyet
Belirtilmemiş
Büyüme özellikleri
Bağlı
Biyogüvenlik seviyesi
1

03Özellikler

Morfoloji
Fibroblast
Hücre türü
Osteoblast
Tümör oluşturucu
Evet, bağışıklık sistemi baskılanmış farelerde

04Tanımlayıcılar

Kaynak gösterimi
MC3T3-E1 Subclone 24 (Cytion katalog numarası 305186)
NCBI Vergi Kimlik Numarası
10090
Cellosaurus
CVCL_5438

05İfade ve duyarlılık

Eksprese edilen reseptörler
Paratiroid hormonuyla ilişkili protein (PTHrP) reseptörü
Protein ekspresyonu
Kolajen, kemik sialoproteini (BSP), osteokalsin (OCN), paratiroid hormonu (PTH)

06İşleme ve yetiştirme

Besiyeri
Alfa MEM, w: 2.0 mM stabil Glutamin, w: Ribonükleozitler, w: Deoksiribonükleozitler, w: 1.0 mM Sodyum piruvat, w: 2.2g/L NaHCO3, w/o: Askorbik asit (GIBCO, Katalog No. A1049001. Bu ürünü tedarik etmiyoruz; lütfen diğer tedarikçileri değerlendirin. Daha fazla yardıma ihtiyacınız olursa lütfen bize bildirin)
Kuluçka ortamı

37°C, %5CO2, nemlendirilmiş atmosfer.

Takviyeler
Ortamı %10 FBS ile takviye edin
Ayrıştırma reaktifi
Accutase
Alt kültür oluşturma
Yapışık hücrelerden eski ortamı çıkarın ve kalsiyum ve magnezyum içermeyen PBS ile yıkayın. T25 şişeleri için 3-5 ml PBS ve T75 şişeleri için 5-10 ml kullanın. Ardından, T25 flasklar için 1-2 ml ve T75 flasklar için 2,5 ml kullanarak hücreleri Accutase ile tamamen kaplayın. Hücreleri ayırmak için oda sıcaklığında 8-10 dakika inkübasyona bırakın. İnkübasyondan sonra, hücreleri yeniden süspanse etmek için 10 ml besiyeriyle hafifçe karıştırın, ardından 300xg'de 3 dakika santrifüjleyin. Süpernatantı atın, hücreleri taze besiyerinde yeniden süspanse edin ve zaten taze besiyeri içeren yeni şişelere aktarın.
Çözme ve kültürleme
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kalite kontrol ve kriyoprezervasyon

Kısırlık

Mikoplazma kontaminasyonu hem PCR tabanlı tahliller hem de lüminesans tabanlı mikoplazma tespit yöntemleri kullanılarak dışlanır.

Bakteriyel, fungal veya maya kontaminasyonu olmadığından emin olmak için hücre kültürleri günlük görsel incelemelere tabi tutulur.

Dondurma ortamı
Kriyoprezervasyon ortamı olarak, yeterli çözülme sonrası canlılık için tam büyüme ortamı (FBS dahil) + %10 DMSO veya iyileşmeyi artırmak ve kriyo-indüklenmiş stresi azaltmak için optimize edilmiş ozmoprotektanlar ve metabolik stabilizatörler içeren CM-1 (Cytion katalog numarası 800100) kullanıyoruz.
Saklama koşulları

Uzun süreli muhafaza için flakonları yaklaşık -150 ila -196 °C'de buhar fazlı sıvı nitrojen içine yerleştirin. 80 °C'de saklama yalnızca sıvı nitrojene aktarılmadan önce kısa bir ara adım olarak kabul edilebilir.

Nakliye koşulları

Kriyoprezerve edilmiş hücre hatları, nakliye boyunca yaklaşık -78 °C'yi korumak için yeterli soğutucu akışkan içeren, onaylanmış, yalıtılmış ambalajlarda kuru buz üzerinde gönderilir. Teslim aldığınızda, kabı hemen inceleyin ve flakonları gecikmeden uygun depoya aktarın.

08Bağışçı

Tür / alt tür
C57BL/6
Bağışçının yaşı
1 gün