Skip to content
MC3T3-E1 Subclone 24
Tissue
กระดูก

Documents

MC3T3-E1 Subclone 24

Cell line · Product number 305186

MC3T3-E1 Subclone 24 cells expressly represent a preosteoblast cell type, which plays a crucial role in bone formation. Morphologically, they exhibit a fi...

€430.00excl. tax and shipping

Customization / Recommendations

In stock
Lot
Recommended (freshest lot)
  • CoA
1

01General information

Description

เซลล์ MC3T3-E1 Subclone 24 เป็นตัวแทนของเซลล์ชนิด preosteoblast ซึ่งทำหน้าที่สำคัญในการสร้างกระดูก ในเชิงสัณฐานวิทยา เซลล์เหล่านี้มีลักษณะคล้ายไฟโบรบลาสต์ โดยมีรูปร่างยาวและโครงสร้างคล้ายแกนหมุน ซับโคลนนี้ได้มาจากเนื้อเยื่อกะโหลกศีรษะ ซึ่งเป็นส่วนหนึ่งของกะโหลกศีรษะที่มีส่วนในการสร้างกระดูกหนึ่งในแอปพลิเคชันที่สำคัญของเซลล์ MC3T3-E1 Subclone 24 คือการเพาะเลี้ยงเซลล์แบบ 3 มิติ ซึ่งนักวิจัยสามารถศึกษาพฤติกรรมและการปฏิสัมพันธ์ของเซลล์เหล่านี้ในสภาพแวดล้อมสามมิติได้ วิธีการนี้ให้แบบจำลองที่มีความเกี่ยวข้องทางสรีรวิทยามากกว่าการเพาะเลี้ยงเซลล์แบบสองมิติแบบดั้งเดิม ทำให้เข้าใจกระบวนการซับซ้อนที่เกี่ยวข้องกับการสร้างกระดูกได้ดียิ่งขึ้น

แม้ว่าเซลล์เหล่านี้จะมีข้อดีมากมาย แต่สิ่งสำคัญคือต้องทราบถึงลักษณะเฉพาะของพวกมัน เซลล์ MC3T3-E1 Subclone 24 ได้ถูกสังเกตว่ามีการเปลี่ยนแปลงเป็นเซลล์สร้างกระดูก (osteoblast) ได้ไม่ดีนักเมื่อถูกสัมผัสกับกรดแอสคอร์บิก ซึ่งเป็นองค์ประกอบสำคัญที่ช่วยส่งเสริมการเจริญเติบโตของเซลล์กระดูกนอกจากนี้ พวกมันไม่สามารถสร้างเมทริกซ์นอกเซลล์ที่มีการแร่ธาตุ ซึ่งเป็นขั้นตอนสำคัญในการสร้างเนื้อเยื่อกระดูกได้ ระยะเวลาในการเพิ่มจำนวนเป็นสองเท่าของเซลล์ MC3T3-E1 Subclone 24 คือประมาณ 90.5 ชั่วโมง

Tissue
กระดูก
Applications
การเพาะเลี้ยงเซลล์แบบสามมิติ, การศึกษาการเปลี่ยนแปลงของเซลล์

02Classification

Organism
Mouse
Sex
Unspecified
Growth properties
Adherent
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
ไฟโบรบลาสต์
Cell type
ออสทีโอบลาสต์
Tumourigenic
ใช่ ในหนูที่มีภาวะภูมิคุ้มกันบกพร่อง

04Identifiers

Citation
MC3T3-E1 ซับโคลน 24 (หมายเลขแคตตาล็อก Cytion 305186)
NCBI TaxID
10090
Cellosaurus
CVCL_5438

05Expression and susceptibility

Receptors expressed
โปรตีนที่เกี่ยวข้องกับฮอร์โมนพาราไทรอยด์ (PTHrP) ตัวรับ
Protein expression
คอลลาเจน, โบーンไซอะโลโปรตีน (BSP), ออสทีโอแคลซิน (OCN), พาราไทรอยด์ฮอร์โมน (PTH)

06Handling and culture

Culture medium
อัลฟา MEM, w: กลูตามีนเสถียร 2.0 มิลลิโมลาร์, w: ไรโบนิวคลีโอไซด์, w: เดซอกซีไรโบนิวคลีโอไซด์, w: โซเดียมไพรูเวต 1.0 มิลลิโมลาร์, w: 2.2 กรัม/ลิตร NaHCO3, w/o: กรดแอสคอร์บิก (GIBCO, หมายเลขแคตตาล็อก A1049001)เราไม่ได้จัดจำหน่ายสินค้าชิ้นนี้ กรุณาพิจารณาผู้จัดจำหน่ายรายอื่น หากท่านต้องการความช่วยเหลือเพิ่มเติม กรุณาแจ้งให้เราทราบ
Incubation atmosphere

37°C, 5%CO2, บรรยากาศชื้น

Supplements
เติมอาหารเลี้ยงเชื้อด้วย FBS 10%
Dissociation reagent
แอคคูเทส
Subculturing
นำอาหารเลี้ยงเซลล์เก่าออกจากเซลล์ที่เกาะติดและล้างด้วย PBS ที่ไม่มีแคลเซียมและแมกนีเซียม สำหรับขวด T25 ให้ใช้ PBS 3-5 มล. และสำหรับขวด T75 ให้ใช้ 5-10 มล. จากนั้นปิดเซลล์ให้มิดด้วย Accutase โดยใช้ 1-2 มล. สำหรับขวด T25 และ 2.5 มล. สำหรับขวด T75ปล่อยให้เซลล์บ่มที่อุณหภูมิห้องเป็นเวลา 8-10 นาทีเพื่อให้เซลล์หลุดออกจากกัน หลังจากบ่มแล้ว ให้ผสมเซลล์เบา ๆ กับอาหารเลี้ยงเซลล์ 10 มิลลิลิตรเพื่อทำให้เซลล์แขวนลอยอีกครั้ง จากนั้นปั่นเหวี่ยงที่ 300 เท่าของแรงโน้มถ่วงโลก (300xg) เป็นเวลา 3 นาที เทส่วนใสที่ได้ทิ้งไป แล้วแขวนลอยเซลล์ในอาหารเลี้ยงเซลล์ใหม่ จากนั้นถ่ายเซลล์ไปยังขวดเพาะเลี้ยงใหม่ที่เติมอาหารเลี้ยงเซลล์ใหม่ไว้แล้ว
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Quality control and cryopreservation

Sterility

การปนเปื้อนของไมโคพลาสมาถูกตัดออกโดยใช้ทั้งการทดสอบแบบ PCR และการตรวจหาไมโคพลาสมาโดยใช้วิธีการเรืองแสง

เพื่อให้แน่ใจว่าไม่มีการปนเปื้อนของแบคทีเรีย เชื้อรา หรือยีสต์ การเพาะเลี้ยงเซลล์จะถูกตรวจสอบด้วยสายตาทุกวัน

Freeze medium
ในฐานะที่เป็นสารอาหารสำหรับการแช่แข็ง เราใช้สารอาหารสำหรับการเจริญเติบโตแบบครบถ้วน (รวมถึง FBS) + 10% DMSO เพื่อความมีชีวิตหลังการละลายที่เพียงพอ หรือ CM-1 (หมายเลขแคตตาล็อก Cytion 800100) ซึ่งรวมถึงสารป้องกันออสโมติกและสารรักษาเสถียรภาพเมตาบอลิซึมที่ได้รับการปรับให้เหมาะสมเพื่อเพิ่มการฟื้นตัวและลดความเครียดที่เกิดจากการแช่แข็ง
Storage conditions

สำหรับการเก็บรักษาในระยะยาว ให้วางหลอดบรรจุในไนโตรเจนเหลวในสถานะไอที่อุณหภูมิประมาณ −150 ถึง −196 °C การเก็บรักษาที่อุณหภูมิ −80 °C สามารถใช้ได้เฉพาะในระยะสั้นก่อนการย้ายไปยังไนโตรเจนเหลวเท่านั้น

Shipping conditions

เซลล์ไลน์ที่แช่แข็งในไนโตรเจนเหลวจะถูกจัดส่งในบรรจุภัณฑ์ที่ผ่านการตรวจสอบแล้วและมีการเก็บรักษาความเย็นด้วยน้ำแข็งแห้ง พร้อมสารทำความเย็นที่เพียงพอเพื่อรักษาอุณหภูมิประมาณ −78 °C ตลอดการขนส่ง เมื่อได้รับสินค้า ให้ตรวจสอบภาชนะทันทีและถ่ายโอนหลอดทดลองไปยังที่เก็บที่เหมาะสมโดยไม่ล่าช้า

08Donor

Breed / subspecies
C57BL/6
Donor age
1 วัน