Tartalomra ugrás
MC3T3-E1 Subclone 24
Szövet
Csont

Dokumentumok

MC3T3-E1 Subclone 24

Cell line · Termékszám 305186

MC3T3-E1 Subclone 24 cells expressly represent a preosteoblast cell type, which plays a crucial role in bone formation. Morphologically, they exhibit a fi...

€430.00adó és szállítási költség nélkül

Személyre szabás / Ajánlások

Raktáron van
Lot
Ajánlott (a legfrissebb tétel)
  • CoA
1

01Általános információk

Leírás

Az MC3T3-E1 Subclone 24 sejtek kifejezetten egy preosteoblaszt sejttípust képviselnek, amely döntő szerepet játszik a csontképződésben. Morfológiailag fibroblaszt-szerű megjelenést mutatnak, amelyet megnyúlt alakjuk és orsószerű struktúrájuk jellemez. Ez a különleges szubklón a calvaria szövetből származik, amely a csontképzéshez hozzájáruló koponyarégió. Az MC3T3-E1 24-es szubklón sejtek egyik kritikus alkalmazása a 3D-s sejtkultúrában rejlik, ahol a kutatók tanulmányozhatják e sejtek viselkedését és kölcsönhatásait háromdimenziós környezetben. Ez a módszer fiziológiailag relevánsabb modellt kínál, mint a hagyományos kétdimenziós sejtkultúrák, lehetővé téve a csontképzésben részt vevő bonyolult folyamatok jobb megértését.

Bár ezek a sejtek számos előnnyel rendelkeznek, fontos megjegyezni a sajátos jellemzőiket. Az MC3T3-E1 szubklón 24 sejteknél megfigyelték, hogy a csontsejtek növekedését elősegítő kulcsfontosságú komponens, az aszkorbinsav hatására gyenge oszteoblaszt-differenciálódást mutatnak. Továbbá, nem képeznek mineralizált extracelluláris mátrixot, ami a csontszövet létrehozásának döntő lépése. Az MC3T3-E1 Subclone 24 sejtek megduplázódási ideje körülbelül 90,5 óra.

Szövet
Csont
Alkalmazások
3D sejtkultúra, differenciálódási vizsgálatok

02Osztályozás

Organizmus
Egér
Szex
Nem meghatározott
Növekedési tulajdonságok
Hűséges
Biológiai biztonsági szint
1

03Jellemzők

Morfológia
Fibroblasztok
Sejttípus
Osteoblast
Daganatképző
Igen, immunszupprimált egerekben

04Azonosítók

Hivatkozás
MC3T3-E1 24-es szubklón (Cytion katalógusszám: 305186)
NCBI adóazonosító szám
10090
Cellosaurus
CVCL_5438

05Kifejeződés és fogékonyság

Kifejeződő receptorok
A mellékpajzsmirigyhormonnal kapcsolatos fehérje (PTHrP) receptor
Fehérjeexpresszió
Kollagén, csontsialoprotein (BSP), oszteokalcin (OCN), parathormon (PTH)

06Kezelés és tenyésztés

Táptalaj
Alpha MEM, w: 2,0 mM stabil glutamin, w: Ribonukleozidok, w: dezoxiribonukleozidok, w: 1,0 mM nátrium-piruvát, w: 2,2g/L NaHCO3, w/o: Aszkorbinsav (GIBCO, katalógusszám: A1049001. Ezt a terméket nem szállítjuk; kérjük, vegyen figyelembe más beszállítókat. Kérjük, jelezze, ha további segítségre van szüksége)
Inkubációs környezet

37°C, 5%CO2, párásított légkör.

Kiegészítők
A táptalajt egészítsük ki 10% FBS-szel
Diszociációs reagens
Accutase
Átültetés
Távolítsa el a régi táptalajt a megtapadt sejtekről, és mossa őket kalcium- és magnéziummentes PBS-szel. T25-ös lombikokhoz 3-5 ml PBS-t, T75-ös lombikokhoz pedig 5-10 ml-t használjunk. Ezután fedjük be a sejteket teljesen Accutase-zal, T25 lombikok esetében 1-2 ml-t, T75 lombikok esetében 2,5 ml-t használva. A sejteket 8-10 percig hagyjuk szobahőmérsékleten inkubálni, hogy leváljanak. Az inkubálás után óvatosan keverjük össze a sejteket 10 ml tápfolyadékkal, hogy reszuszpendáljuk őket, majd centrifugáljuk 300xg-nél 3 percig. Dobja el a felülúszót, szuszpendálja újra a sejteket friss tápfolyadékban, és helyezze át őket új lombikokba, amelyek már friss tápfolyadékot tartalmaznak.
Felolvasztás és tenyésztés
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Minőségellenőrzés és kriokonzerválás

Meddőség

A mikoplazma-szennyeződést mind a PCR-alapú vizsgálatokkal, mind a lumineszcencia-alapú mikoplazma-kimutatási módszerekkel kizárják.

A bakteriális, gombás vagy élesztőgombás szennyeződés elkerülése érdekében a sejtkultúrákat napi vizuális ellenőrzésnek vetik alá.

Fagyasztóközeg
Krioprezerváló táptalajként teljes növekedési táptalajt (beleértve az FBS-t) + 10% DMSO-t használunk a megfelelő kiolvasztás utáni életképesség érdekében, vagy CM-1-et (Cytion katalógusszám: 800100), amely optimalizált ozmoprotektánsokat és metabolikus stabilizátorokat tartalmaz a regenerálódás fokozása és a krio-indukált stressz csökkentése érdekében.
Tárolási feltételek

Hosszú távú tartósítás céljából helyezze az üvegeket gőzfázisú folyékony nitrogénbe, körülbelül -150 és -196 °C közötti hőmérsékleten. A -80 °C-on történő tárolás csak rövid átmeneti lépésként fogadható el a folyékony nitrogénbe való átvitel előtt.

Szállítási feltételek

A kriokonzervált sejtvonalakat szárazjégen, validált, szigetelt csomagolásban szállítják, elegendő hűtőközeggel, hogy a szállítás során a hőmérsékletet körülbelül -78 °C-on tartsák. Átvételkor azonnal vizsgálja meg a tárolóedényt, és haladéktalanul helyezze át az injekciós üvegeket a megfelelő tárolóhelyre.

08Adományozó

Faj / alfaj
C57BL/6
Az adományozó életkora
1 nap