Μετάβαση στο περιεχόμενο
MC3T3-E1 Subclone 24
Ιστός
Οστά

Έγγραφα

MC3T3-E1 Subclone 24

Cell line · Αριθμός προϊόντος 305186

MC3T3-E1 Subclone 24 cells expressly represent a preosteoblast cell type, which plays a crucial role in bone formation. Morphologically, they exhibit a fi...

€430.00χωρίς ΦΠΑ και έξοδα αποστολής

Προσαρμογή / Προτάσεις

Σε απόθεμα
Lot
Συνιστάται (η πιο φρέσκια παρτίδα)
  • CoA
1

01Γενικές πληροφορίες

Περιγραφή

Τα κύτταρα MC3T3-E1 Subclone 24 αντιπροσωπεύουν ρητά έναν τύπο κυττάρων προοστεοβλαστών, ο οποίος διαδραματίζει κρίσιμο ρόλο στον σχηματισμό των οστών. Μορφολογικά, παρουσιάζουν μια εμφάνιση που μοιάζει με ινοβλάστη, η οποία χαρακτηρίζεται από το επιμήκες σχήμα τους και τις ατρακτοειδείς δομές τους. Ο συγκεκριμένος υποκλώνος προέρχεται από τον ιστό της καλυβικής, μια περιοχή του κρανίου που συμβάλλει στον σχηματισμό των οστών. Μία από τις κρίσιμες εφαρμογές των κυττάρων του υποκλώνου 24 MC3T3-E1 έγκειται στην τρισδιάστατη κυτταρική καλλιέργεια, όπου οι ερευνητές μπορούν να μελετήσουν τη συμπεριφορά και τις αλληλεπιδράσεις αυτών των κυττάρων μέσα σε ένα τρισδιάστατο περιβάλλον. Η μέθοδος αυτή προσφέρει ένα πιο φυσιολογικά σχετικό μοντέλο από τις παραδοσιακές δισδιάστατες κυτταροκαλλιέργειες, επιτρέποντας την καλύτερη κατανόηση των περίπλοκων διαδικασιών που εμπλέκονται στον σχηματισμό των οστών.

Ενώ τα κύτταρα αυτά διαθέτουν πολυάριθμα πλεονεκτήματα, είναι σημαντικό να σημειωθούν τα ιδιαίτερα χαρακτηριστικά τους. Έχει παρατηρηθεί ότι τα κύτταρα MC3T3-E1 Subclone 24 παρουσιάζουν φτωχή διαφοροποίηση των οστεοβλαστών όταν εκτίθενται σε ασκορβικό οξύ, ένα βασικό συστατικό για την προώθηση της ανάπτυξης των οστικών κυττάρων. Επιπλέον, δεν σχηματίζουν μια ανοργανοποιημένη εξωκυτταρική μήτρα, ένα κρίσιμο βήμα για τη δημιουργία οστικού ιστού. Ο χρόνος διπλασιασμού των κυττάρων MC3T3-E1 Subclone 24 είναι περίπου 90,5 ώρες.

Ιστός
Οστά
Εφαρμογές
τρισδιάστατη κυτταρική καλλιέργεια, μελέτες διαφοροποίησης

02Ταξινόμηση

Οργανισμός
Ποντίκι
Σεξ
Μη καθορισμένο
Ιδιότητες ανάπτυξης
Πιστός
Επίπεδο βιοασφάλειας
1

03Χαρακτηριστικά

Μορφολογία
Ινοβλάστες
Τύπος κυττάρου
Οστεοβλάστες
Ογκογόνος
Ναι, σε ανοσοκατασταλμένα ποντίκια

04Αναγνωριστικά

Παραπομπή
MC3T3-E1 Υποκλώνος 24 (αριθμός καταλόγου Cytion 305186)
Αριθμός φορολογικού μητρώου NCBI
10090
Κελλοσαύρος
CVCL_5438

05Έκφραση και ευαισθησία

Υποδοχείς που εκφράζονται
Υποδοχέας πρωτεΐνης σχετιζόμενης με την παραθορμόνη (PTHrP)
Έκφραση πρωτεϊνών
Κολλαγόνο, σιαλοπρωτεΐνη των οστών (BSP), οστεοκαλσίνη (OCN), παραθορμόνη (PTH)

06Χειρισμός και καλλιέργεια

Θρεπτικό μέσο
Alpha MEM, w: 2,0 mM σταθερή γλουταμίνη, w: ριβονουκλεοζίτες, w: δεοξυριβονουκλεοζίτες, w: 1,0 mM πυρουβικό νάτριο, w: 2,2g/L NaHCO3, w/o: Ασκορβικό οξύ (GIBCO, αριθ. καταλόγου A1049001. Δεν προμηθεύουμε αυτό το προϊόν- παρακαλούμε να εξετάσετε άλλους προμηθευτές. Παρακαλούμε ενημερώστε μας εάν χρειάζεστε περαιτέρω βοήθεια)
Ατμόσφαιρα επώασης

37°C, 5%CO2, υγροποιημένη ατμόσφαιρα.

Συμπληρώματα
Συμπληρώστε το μέσο με 10% FBS
Αντιδραστήριο αποσύνδεσης
Accutase
Αναπαραγωγή σε υποκαλλιέργεια
Αφαιρέστε το παλιό μέσο από τα προσκολλημένα κύτταρα και πλύντε τα με PBS που δεν περιέχει ασβέστιο και μαγνήσιο. Για φιάλες T25, χρησιμοποιήστε 3-5 ml PBS και για φιάλες T75, χρησιμοποιήστε 5-10 ml. Στη συνέχεια, καλύψτε πλήρως τα κύτταρα με Accutase, χρησιμοποιώντας 1-2 ml για φιάλες T25 και 2,5 ml για φιάλες T75. Αφήστε τα κύτταρα να επωαστούν σε θερμοκρασία δωματίου για 8-10 λεπτά για να αποκολληθούν. Μετά την επώαση, αναμείξτε απαλά τα κύτταρα με 10 ml μέσου για να ανασυσταθούν και, στη συνέχεια, φυγοκεντρίστε στα 300xg για 3 λεπτά. Απορρίψτε το υπερκείμενο υγρό, ανασυστάστε τα κύτταρα σε φρέσκο μέσο και μεταφέρετέ τα σε νέες φιάλες που περιέχουν ήδη φρέσκο μέσο.
Απόψυξη και καλλιέργεια
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Έλεγχος ποιότητας και κρυοσυντήρηση

Στειρότητα

Η μόλυνση από μυκόπλασμα αποκλείεται με τη χρήση τόσο των δοκιμασιών που βασίζονται στην PCR όσο και των μεθόδων ανίχνευσης μυκοπλάσματος με βάση τη φωταύγεια.

Για να διασφαλιστεί ότι δεν υπάρχει μόλυνση από βακτήρια, μύκητες ή ζύμες, οι κυτταροκαλλιέργειες υποβάλλονται σε καθημερινές οπτικές επιθεωρήσεις.

Μέσο κατάψυξης
Ως μέσο κρυοσυντήρησης, χρησιμοποιούμε πλήρες μέσο ανάπτυξης (συμπεριλαμβανομένου του FBS) + 10% DMSO για επαρκή βιωσιμότητα μετά την απόψυξη, ή CM-1 (αριθμός καταλόγου Cytion 800100), το οποίο περιλαμβάνει βελτιστοποιημένα ωσμοπροστατευτικά και μεταβολικούς σταθεροποιητές για την ενίσχυση της ανάκαμψης και τη μείωση του στρες που προκαλείται από την κρυοσυντήρηση.
Συνθήκες αποθήκευσης

Για μακροχρόνια συντήρηση, τοποθετήστε τα φιαλίδια σε υγρό άζωτο σε φάση ατμών σε θερμοκρασία περίπου -150 έως -196 °C. Η αποθήκευση στους -80 °C είναι αποδεκτή μόνο ως σύντομο ενδιάμεσο βήμα πριν από τη μεταφορά σε υγρό άζωτο.

Όροι αποστολής

Οι κρυοσυντηρημένες κυτταρικές σειρές αποστέλλονται σε ξηρό πάγο σε επικυρωμένη, μονωμένη συσκευασία με επαρκές ψυκτικό μέσο για τη διατήρηση περίπου των -78 °C καθ' όλη τη διάρκεια της μεταφοράς. Κατά την παραλαβή, επιθεωρήστε αμέσως τον περιέκτη και μεταφέρετε τα φιαλίδια χωρίς καθυστέρηση στην κατάλληλη αποθήκη.

08Δωρητής

Φυλή / υποείδος
C57BL/6
Ηλικία δωρητή
1 ημέρα