Siirry sisältöön
MC3T3-E1 Subclone 24
Kudos
Luu

Asiakirjat

MC3T3-E1 Subclone 24

Cell line · Tuotenumero 305186

MC3T3-E1 Subclone 24 cells expressly represent a preosteoblast cell type, which plays a crucial role in bone formation. Morphologically, they exhibit a fi...

€430.00ilman veroja ja toimituskuluja

Räätälöinti / Suositukset

Varastossa
Lot
Suositeltava (tuorein erä)
  • CoA
1

01Yleistä tietoa

Kuvaus

MC3T3-E1 Subclone 24 -solut edustavat nimenomaisesti preosteoblastisolutyyppiä, jolla on ratkaiseva rooli luun muodostumisessa. Morfologisesti ne ovat fibroblastien kaltaisia, ja niille on ominaista niiden pitkänomainen muoto ja karamaiset rakenteet. Tämä erityinen alaklooni on peräisin calvaria-kudoksesta, joka on kallon alue, joka edistää luun muodostumista. Yksi MC3T3-E1 Subclone 24 -solujen kriittisistä sovelluksista on 3D-soluviljely, jossa tutkijat voivat tutkia näiden solujen käyttäytymistä ja vuorovaikutusta kolmiulotteisessa ympäristössä. Tämä menetelmä tarjoaa fysiologisesti relevantimman mallin kuin perinteiset kaksiulotteiset soluviljelmät, mikä mahdollistaa luunmuodostukseen liittyvien monimutkaisten prosessien paremman ymmärtämisen.

Vaikka näillä soluilla on lukuisia etuja, on tärkeää huomata niiden erityispiirteet. MC3T3-E1 Subclone 24 -solujen on havaittu osoittavan heikkoa osteoblastien erilaistumista, kun ne altistetaan askorbiinihapolle, joka on keskeinen luusolujen kasvua edistävä komponentti. Ne eivät myöskään muodosta mineralisoitunutta solunulkoista matriisia, joka on ratkaiseva vaihe luukudoksen luomisessa. MC3T3-E1 Subclone 24 -solujen kaksinkertaistumisaika on noin 90,5 tuntia.

Kudos
Luu
Sovellukset
3D-soluviljely, erilaistumistutkimukset

02Luokittelu

Organismi
Hiiri
Sukupuoli
Määrittelemätön
Kasvuominaisuudet
Kiinnittynyt
Bioturvallisuustaso
1

03Ominaisuudet

Morfologia
Fibroblastit
Solutyyppi
Osteoblastit
Kasvaimia aiheuttava
Kyllä, immunosuppressoituneissa hiirissä

04Tunnisteet

Lähdeviite
MC3T3-E1 Alaklooni 24 (Cytionin luettelonumero 305186)
NCBI-verotunnus
10090
Cellosaurus
CVCL_5438

05Ilmentyminen ja alttius

Ilmentyvät reseptorit
Lisäkilpirauhashormoniin liittyvä proteiini (PTHrP) reseptori
Proteiinin ilmentyminen
Kollageeni, luun sialoproteiini (BSP), osteokalsiini (OCN), lisäkilpirauhashormoni (PTH)

06Käsittely ja viljely

Viljelyalusta
Alpha MEM, w: 2,0 mM stabiili glutamiini, w: ribonukleosidit, w: deoksiribonukleosidit, w: 1,0 mM natriumpyruvaatti, w: 2,2 g/l NaHCO3, w/o: Askorbiinihappo (GIBCO, luettelo nro A1049001. Emme toimita tätä tuotetta; harkitkaa muita toimittajia. Ilmoittakaa meille, jos tarvitsette lisäapua)
Inkubaatioilma

37 °C, 5 %CO2, kostutettu ilmakehä.

Ravintolisät
Täydennetään elatusainetta 10 %:lla FBS:llä
Dissosiaatioreagenssi
Accutase
Soluviljely
Poista vanha väliaine tarttuneista soluista ja pese ne PBS:llä, josta puuttuu kalsiumia ja magnesiumia. Käytä T25-pulloissa 3-5 ml PBS:ää ja T75-pulloissa 5-10 ml. Peitä sitten solut kokonaan Accutase-valmisteella, käyttäen 1-2 ml T25-pulloissa ja 2,5 ml T75-pulloissa. Anna solujen inkuboitua huoneenlämmössä 8-10 minuuttia solujen irtoamiseksi. Inkuboinnin jälkeen solut sekoitetaan varovasti 10 ml:n väliaineella niiden resuspendoimiseksi ja sentrifugoidaan sitten 300xg:n nopeudella 3 minuutin ajan. Hävitä supernatantti, suspendoi solut uudelleen tuoreeseen väliaineeseen ja siirrä ne uusiin pulloihin, jotka sisältävät jo tuoretta väliaineita.
Sulatus ja viljely
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Laadunvalvonta ja kryosäilytys

Hedelmättömyys

Mykoplasmakontaminaatio suljetaan pois sekä PCR-pohjaisilla määrityksillä että luminesenssiin perustuvilla mykoplasman osoitusmenetelmillä.

Bakteeri-, sieni- tai hiivakontaminaation välttämiseksi soluviljelmät tarkastetaan päivittäin silmämääräisesti.

Jäädytysaine
Kryosäilytysmediana käytämme täydellistä kasvualustaa (mukaan lukien FBS) + 10 % DMSO:ta riittävän sulatuksen jälkeisen elinkelpoisuuden varmistamiseksi tai CM-1:tä (Cytionin luettelonumero 800100), joka sisältää optimoituja osmoprotectantteja ja metabolisia stabilisaattoreita, jotka parantavat elpymistä ja vähentävät kryosäilytyksen aiheuttamaa stressiä.
Säilytysolosuhteet

Pitkäaikaissäilytystä varten injektiopullot asetetaan höyryfaasissa olevaan nestemäiseen typpeen noin -150 - -196 °C:een. Säilytys -80 °C:ssa on hyväksyttävää vain lyhyenä välivaiheena ennen siirtoa nestemäiseen typpeen.

Toimitusehdot

Kryosäilytetyt solulinjat kuljetetaan kuivajäässä validoidussa, eristetyssä pakkauksessa, jossa on riittävästi kylmäainetta, jotta lämpötila pysyy noin -78 °C:ssa koko kuljetuksen ajan. Pakkaus on tarkastettava välittömästi sen vastaanottamisen jälkeen ja injektiopullot on siirrettävä viipymättä asianmukaiseen varastoon.

08Lahjoittaja

Rotua / alalajia
C57BL/6
Luovuttajan ikä
1 päivä