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MC3T3-E1 Subclone 24
Tecido
Osso

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MC3T3-E1 Subclone 24

Cell line · Número do produto 305186

MC3T3-E1 Subclone 24 cells expressly represent a preosteoblast cell type, which plays a crucial role in bone formation. Morphologically, they exhibit a fi...

€430.00sem impostos nem portes de envio

Personalização / Recomendações

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1

01Informações gerais

Descrição

As células MC3T3-E1 Subclone 24 representam expressamente um tipo de célula pré-osteoblástica, que desempenha um papel crucial na formação óssea. Morfologicamente, apresentam um aspeto semelhante ao dos fibroblastos, caracterizado pela sua forma alongada e estruturas fusiformes. Este subclone específico é derivado do tecido da calvária, uma região do crânio que contribui para a formação óssea. Uma das aplicações críticas das células MC3T3-E1 Subclone 24 reside na cultura de células 3D, onde os investigadores podem estudar o comportamento e as interações destas células num ambiente tridimensional. Este método oferece um modelo fisiologicamente mais relevante do que as tradicionais culturas de células bidimensionais, permitindo uma melhor compreensão dos intrincados processos envolvidos na formação óssea.

Embora estas células possuam inúmeras vantagens, é importante notar as suas caraterísticas específicas. Observou-se que as células MC3T3-E1 Subclone 24 apresentam uma fraca diferenciação de osteoblastos quando expostas ao ácido ascórbico, um componente essencial para promover o crescimento das células ósseas. Além disso, não formam uma matriz extracelular mineralizada, um passo crucial na criação de tecido ósseo. O tempo de duplicação das células MC3T3-E1 Subclone 24 é de aproximadamente 90,5 horas.

Tecido
Osso
Aplicações
cultura de células 3D, Estudos de diferenciação

02Classificação

Organismo
Rato
Sexo
Não especificado
Propriedades de crescimento
Aderente
Nível de biossegurança
1

03Características

Morfologia
Fibroblastos
Tipo de célula
Osteoblastos
Tumorigénico
Sim, em ratinhos imunossuprimidos

04Identificadores

Referência
MC3T3-E1 Subclone 24 (número de catálogo Cytion 305186)
Número de identificação fiscal do NCBI
10090
Cellosaurus
CVCL_5438

05Expressão e suscetibilidade

Receptores expressos
Recetor da proteína relacionada com a hormona paratiroideia (PTHrP)
Expressão proteica
Colagénio, sialoproteína óssea (BSP), osteocalcina (OCN), hormona paratiroideia (PTH)

06Manuseamento e cultura

Meio de cultura
MEM alfa, com: 2,0 mM de glutamina estável, com: Ribonucleósidos, com: Desoxirribonucleósidos, com: 1,0 mM de piruvato de sódio, com: 2,2g/L NaHCO3, sem: Ácido ascórbico (GIBCO, N.º de catálogo A1049001. Não fornecemos este produto; considere outros fornecedores. Por favor, informe-nos se precisar de mais assistência)
Atmosfera de incubação

37°C, 5%CO2, atmosfera humidificada.

Suplementos
Completar o meio com 10% de FBS
Reagente de dissociação
Accutase
Subcultura
Retirar o meio antigo das células aderentes e lavá-las com PBS sem cálcio e magnésio. Nos frascos T25, utilizar 3-5 ml de PBS e nos frascos T75, 5-10 ml. Em seguida, cobrir completamente as células com Accutase, utilizando 1-2 ml para os frascos T25 e 2,5 ml para os frascos T75. Deixar as células incubar à temperatura ambiente durante 8-10 minutos para as destacar. Após a incubação, misturar suavemente as células com 10 ml de meio para as ressuspender e, em seguida, centrifugar a 300xg durante 3 minutos. Deitar fora o sobrenadante, ressuspender as células em meio fresco e transferi-las para novos frascos que já contenham meio fresco.
Descongelamento e cultura
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Controlo de qualidade e criopreservação

Esterilidade

A contaminação por micoplasma é excluída utilizando ensaios baseados em PCR e métodos de deteção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não há contaminação bacteriana, fúngica ou de leveduras, as culturas de células são sujeitas a inspecções visuais diárias.

Meio de congelação
Como meio de criopreservação, utilizamos um meio de crescimento completo (incluindo FBS) + 10% DMSO para uma viabilidade pós-descongelamento adequada, ou CM-1 (número de catálogo Cytion 800100), que inclui osmoprotectores optimizados e estabilizadores metabólicos para melhorar a recuperação e reduzir o stress induzido pela crio.
Condições de armazenamento

Para conservação a longo prazo, colocar os frascos em azoto líquido em fase de vapor a uma temperatura entre -150 e -196 °C. O armazenamento a -80 °C é aceitável apenas como um curto passo intermédio antes da transferência para azoto líquido.

Condições de envio

As linhas celulares criopreservadas são expedidas em gelo seco em embalagens validadas e isoladas com refrigerante suficiente para manter aproximadamente -78 °C durante o transporte. Aquando da receção, inspecionar imediatamente o recipiente e transferir sem demora os frascos para um local de armazenamento adequado.

08Doador

Raça / subespécie
C57BL/6
Idade do dador
1 dia