Prejsť na obsah
MC3T3-E1 Subclone 24
Tkanivo
Kosti

Dokumenty

MC3T3-E1 Subclone 24

Cell line · Číslo výrobku 305186

MC3T3-E1 Subclone 24 cells expressly represent a preosteoblast cell type, which plays a crucial role in bone formation. Morphologically, they exhibit a fi...

€430.00bez DPH a poštovného

Prispôsobenie / Odporúčania

Na sklade
Lot
Odporúčané (najčerstvejšia várka)
  • CoA
1

01Všeobecné informácie

Popis

Bunky MC3T3-E1 Subclone 24 vyslovene predstavujú typ buniek preosteoblastov, ktoré zohrávajú kľúčovú úlohu pri tvorbe kostí. Morfologicky vykazujú vzhľad podobný fibroblastom, charakterizovaný ich predĺženým tvarom a vretenovitými štruktúrami. Tento konkrétny podklón pochádza z tkaniva kalvárie, oblasti lebky, ktorá sa podieľa na tvorbe kostí. Jedno z rozhodujúcich využití buniek subklonu 24 MC3T3-E1 spočíva v 3D bunkovej kultúre, kde môžu výskumníci študovať správanie a interakcie týchto buniek v trojrozmernom prostredí. Táto metóda ponúka fyziologicky relevantnejší model ako tradičné dvojrozmerné bunkové kultúry, čo umožňuje lepšie pochopiť zložité procesy, ktoré sa podieľajú na tvorbe kostí.

Hoci tieto bunky majú množstvo výhod, je dôležité si všimnúť ich špecifické vlastnosti. Bolo pozorované, že bunky subklonu 24 MC3T3-E1 vykazujú slabú diferenciáciu osteoblastov, keď sú vystavené pôsobeniu kyseliny askorbovej, ktorá je kľúčovou zložkou na podporu rastu kostných buniek. Okrem toho netvoria mineralizovanú extracelulárnu matrix, čo je kľúčový krok pri tvorbe kostného tkaniva. Čas zdvojenia buniek MC3T3-E1 Subclone 24 je približne 90,5 hodiny.

Tkanivo
Kosti
Aplikácie
3D bunkové kultúry, diferenciačné štúdie

02Klasifikácia

Organizmus
Myš
Sex
Nešpecifikované
Rastové vlastnosti
Prívrženec
Úroveň biologickej bezpečnosti
1

03Charakteristiky

Morfológia
Fibroblasty
Typ bunky
Osteoblasty
Tumorigenický
Áno, u imunosuprimovaných myší

04Identifikátory

Citácia
MC3T3-E1 subklon 24 (katalógové číslo Cytion 305186)
Daňové identifikačné číslo NCBI
10090
Cellosaurus
CVCL_5438

05Prejav a náchylnosť

Exprimované receptory
Receptor pre proteín príbuzný parathormónu (PTHrP)
Expresia proteínov
Kolagén, kostný sialoproteín (BSP), osteokalcín (OCN), parathormón (PTH)

06Manipulácia a kultivácia

Kultivačné médium
Alfa MEM, w: 2,0 mM stabilný glutamín, w: Ribonukleozidy, w: Deoxyribonukleozidy, w: 1,0 mM pyruvát sodný, w: 2,2 g/L NaHCO3, w/o: Kyselina askorbová (GIBCO, katalógové číslo A1049001. Tento výrobok nedodávame; zvážte prosím iných dodávateľov. Ak potrebujete ďalšiu pomoc, dajte nám prosím vedieť.)
Inkubačná atmosféra

37 °C, 5 %CO2, zvlhčená atmosféra.

Doplnky stravy
Doplňte médium o 10 % FBS
Disociačné činidlo
Accutase
Rozmnožovanie kultúr
Odstráňte staré médium z adherovaných buniek a premyte ich PBS, ktorý neobsahuje vápnik a horčík. Pre banky T25 použite 3 - 5 ml PBS a pre banky T75 použite 5 - 10 ml. Potom bunky úplne pokryte Accutase, pričom použite 1 - 2 ml pre banky T25 a 2,5 ml pre banky T75. Nechajte bunky inkubovať pri izbovej teplote 8-10 minút, aby sa oddelili. Po inkubácii jemne premiešajte bunky s 10 ml média, aby boli znovu suspendované, a potom ich 3 minúty odstreďujte pri 300xg. Supernatant zlikvidujte, bunky znovu rozmiešajte v čerstvom médiu a preneste ich do nových fliaš, ktoré už obsahujú čerstvé médium.
Rozmrazovanie a kultivácia
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kontrola kvality a kryokonzervácia

Sterilita

Kontaminácia mykoplazmami sa vylučuje pomocou testov založených na PCR a metód detekcie mykoplaziem založených na luminiscencii.

Aby sa zabezpečilo, že nedošlo ku kontaminácii baktériami, hubami alebo kvasinkami, bunkové kultúry sa denne vizuálne kontrolujú.

Mrazové médium
Ako kryokonzervačné médium používame kompletné rastové médium (vrátane FBS) + 10 % DMSO na zabezpečenie primeranej životaschopnosti po rozmrazení alebo CM-1 (katalógové číslo 800100 spoločnosti Cytion), ktoré obsahuje optimalizované osmoprotektanty a metabolické stabilizátory na zlepšenie obnovy a zníženie stresu spôsobeného kryo.
Podmienky skladovania

Na dlhodobé uchovávanie umiestnite injekčné liekovky do kvapalnej fázy dusíka v pare pri teplote približne -150 až -196 °C. Skladovanie pri teplote -80 °C je prijateľné len ako krátky prechodný krok pred presunom do tekutého dusíka.

Dopravné podmienky

Kryokonzervované bunkové línie sa prepravujú na suchom ľade v overených, izolovaných obaloch s dostatočným množstvom chladiva na udržanie teploty približne -78 °C počas celej prepravy. Po prijatí ihneď skontrolujte obal a bezodkladne premiestnite injekčné liekovky do vhodného skladu.

08Darca

Plemeno / poddruh
C57BL/6
Vek darcu
1 deň