HBL-100 ląstelės
Cell line · Prekės numeris 300178
HBL-100 – tai žmogaus krūties epitelio ląstelių linija, iš pradžių gauta iš maitinančios motinos krūties pieno. Pienas buvo surinktas praėjus trims dienoms po gimdymo...
Pritaikymas / Rekomendacijos
- HBL-100 ląstelėsCell line€430.00
Rekomenduojama (šviežiausia partija)
01Bendra informacija
- Aprašymas
HBL-100 yra žmogaus krūties epitelio ląstelių linija, iš pradžių gauta iš maitinančios motinos pieno. Pienas buvo surinktas praėjus trims dienoms po gimdymo, ir, nepaisant to, kad donorė neturėjo jokių krūties pažeidimų ir šeimoje nebuvo krūties vėžio atvejų, ląstelėms buvo nustatytas nenormalus kariotipas iki 7 stadijos. Ši ląstelių linija išsiskiria gebėjimu sintetinti nedidelį kiekį laktozės ir reaguoti į prolaktino ar estrogenų stimuliaciją didinant kazeino gamybą. Mikroskopinės analizės, pavyzdžiui, elektroninės mikrografijos, patvirtino, kad šiose ląstelėse yra mikrovilių, tonofibrilių ir desmosomų, išryškinančių joms būdingas epitelio savybes.
Tačiau HBL-100 ląstelių linija susidūrė su dideliais sunkumais, susijusiais su jos identifikavimu ir apibūdinimu. Nustatyta, kad joje yra Y chromosoma, o tai leidžia manyti, kad ši ląstelių linija buvo klaidingai identifikuota, nes iš pradžių manyta, kad ji yra moteriškos kilmės. Dar daugiau keblumų kyla dėl to, kad ląstelių linijoje yra SV40 genomo sekų, o tai prieštarauja ankstesniems įsitikinimams, kad ji buvo spontaniškai imortalizuota. Dėl šių išvadų kilo diskusijų dėl HBL-100 kilmės ir genetinės sudėties, todėl, išsamiai nepatvirtinus jos savybių ir kilmės, ji tampa problemiška mokslinių tyrimų ląstelių linija.
- Audinys
- Krūtys
- Liga
- Karcinoma
- Sinonimai
- HBL 100
- HBL100
02Klasifikacija
- Organizmas
- Žmogus
- Seksas
- Moteris
- Augimo savybės
- Prisijungęs
- Biologinio saugumo lygis
- 1
03Charakteristikos
- Morfologija
- Į epitelį panašus
- Tumorogeninis
- Taip, nuogoms pelėms. Esant mažesniam nei 35 pasažų lygiui, linija nėra navikinė nuogoms pelėms, tačiau minkštame agare sudaro kolonijas. Buvo pranešta, kad navikiškumas didėja, kai yra daugiau nei 35 pasažų.
- Ploidijos būklė
- Aneuploidinis
- MSI būsena
- Stabilus (MSS)
- Kariotipas
- Kamieninių chromosomų skaičius yra artimas triploidiniam, o modalinis chromosomų skaičius yra 67 chromosomos, 2S komponentas sudaro 0,6 %. Daugumą chromosomų komplektų sudaro maždaug 39 normalios ir 28 žyminčios chromosomos. Daugumai metafazių būdingi tokie žymenys kaip 2q, 11q+, 11q, t(2q.12), t(2q.5q?), t(6p?.16), 16pt ir daugelis kitų. Normalių 11, 14, 15 ir 16 chromosomų nėra. 2, 12, 17 ir 19 yra monosominės, o x yra disominė. DNR profilio nustatymas amelogeninui, lytinėms chromosomoms specifiniam PGR tyrimui, kuriuo galima atskirti x chromosomai būdingus produktus nuo Y chromosomai būdingų produktų, atskleidė, kad šioje spėjamos moteriškos kilmės ląstelių linijoje yra Y chromosomų. Bendrieji duomenys buvo patvirtinti QM dažymu, C-banding ir FISH, naudojant visos chromosomos dažų zondą su žmogaus Y chromosoma.
04Identifikatoriai
- Nuoroda
- HBL-100 (Cytion katalogo numeris 300178)
- NCBI mokesčių identifikavimo kodas
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_4362
05Išraiška ir jautrumas
- Antigeno ekspresija
- HLA A1, A10, A11, B7, B8
- Izofermentai
- G6PD, B, PGM1, 1, PGM3, 2, ES-D, 1, Me-2, 0, GLO-1, 2, AK-1, 1-2, Fenotipo dažnio produktas: 0.0008
- Virusai
- Ląstelėse yra tamdemly integruotas SV40 genomas, pranešta, kad jose gali būti D tipo retrovirusas, panašus arba identiškas Mason-Pfizer beždžionių virusui (MPMV).
- Atvirkštinė transkriptazė
- Teigiamas
06Laikymas ir auginimas
- Maitinamoji terpė
- McCoys 5a, w: 3,0 g/l gliukozės, w: stabilus glutaminas, w: 2,0 mM natrio piruvatas, w: 2,2 g/l NaHCO3 (Cytion gaminio numeris 820200a)
- Inkubacijos aplinka
37 °C, 5 %CO2, drėkintoje atmosferoje.
- Maisto papildai
- Papildykite terpę 10 % FBS
- Disociacijos reagentas
- Accutase
- Subkultūrinis auginimas
- Pašalinkite seną terpę nuo prilipusių ląstelių ir nuplaukite jas PBS, kuriame nėra kalcio ir magnio. T25 kolboms naudokite 3-5 ml PBS, o T75 kolboms - 5-10 ml. Tuomet visiškai užpilkite ląsteles "Accutase", naudodami 1-2 ml T25 kolboms ir 2,5 ml T75 kolboms. Leiskite ląstelėms inkubuotis kambario temperatūroje 8-10 minučių, kad jos atsiskirtų. Po inkubacijos atsargiai sumaišykite ląsteles su 10 ml terpės, kad jos vėl suspenduotų, tada 3 minutes centrifuguokite 300xg greičiu. Išmeskite supernatantą, vėl sutirpinkite ląsteles šviežioje terpėje ir perkelkite jas į naujas kolbas, kuriose jau yra šviežia terpė.
- Sėjos tankis
- 1 x 104 ląstelės/cm2
- Skysčių atnaujinimas
- 2-3 kartus per savaitę
- Atkūrimas po atšilimo
- Atšildžius, išdėliokite ląsteles 5 x 104 ląstelių/cm2 tankumu ir leiskite ląstelėms atsigauti po užšaldymo proceso ir prisitvirtinti bent 24 valandas.
- Atšildymas ir auginimas
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Kokybės kontrolė ir kriokonservavimas
- Sterilumas
Mikoplazmos užterštumas atmetamas taikant PGR pagrįstus tyrimus ir liuminescencinius mikoplazmos aptikimo metodus.
Siekiant užtikrinti, kad nebūtų užteršimo bakterijomis, grybeliais ar mielėmis, ląstelių kultūros kasdien vizualiai tikrinamos.
- Šaldymo terpė
- Kaip kriokonservavimo terpę naudojame visišką augimo terpę (įskaitant FBS) + 10 % DMSO, kad būtų užtikrintas tinkamas gyvybingumas po atšildymo, arba CM-1 (Cytion katalogo numeris 800100), kurioje yra optimizuotų osmoprotektorių ir medžiagų apykaitos stabilizatorių, kad būtų pagerintas atsigavimas ir sumažintas kriokonservavimo sukeltas stresas.
- Laikymo sąlygos
Norėdami ilgai saugoti, įdėkite buteliukus į garų fazės skystą azotą maždaug -150-196 °C temperatūroje. Laikymas -80 °C temperatūroje yra priimtinas tik kaip trumpas tarpinis etapas prieš perkeliant į skystąjį azotą.
- Pristatymo sąlygos
Kriokonservuotos ląstelių linijos gabenamos ant sauso ledo patvirtintoje, izoliuotoje pakuotėje su pakankamu kiekiu šaldymo skysčio, kad pervežimo metu būtų palaikoma maždaug -78 °C temperatūra. Gavę pakuotę, nedelsdami ją apžiūrėkite ir nedelsdami perkelkite mėgintuvėlius į tinkamą saugyklą.
08Donoras
- Donoro amžius
- 27 metai
- Etninė priklausomybė
- Kaukaziečių
09Teisiniai ir saugos klausimai
- Saugos priemonės
- Planuojant saugoti kriovaistinę skystame azote, kad ateityje ją būtų galima atšildyti, būtina laikytis griežtų saugos priemonių. Būtina mūvėti tinkamas apsaugines pirštines ir drabužius, o perkeliant užšaldytus mėginius į skystojo azoto talpyklą arba iš jos būtina naudoti veido kaukę arba apsauginius akinius. Taip siekiama sumažinti sužeidimų riziką dėl galimo kriokomponentų sprogimo išėmimo metu, kai gali išsiveržti aštrūs fragmentai.
- Garantija
" Cytion" garantuoja savo produktų kokybę ir gyvybingumą. Garantuojame, kad mūsų ląstelės bus gyvybingos kultūrų auginimo pradžioje 60 dienų po išsiuntimo iš mūsų gamyklos. Užtikriname, kad visos medžiagos atitinka analizės sertifikate ir (arba) gaminio lape aprašytas specifikacijas
Išsamią informaciją rasite mūsų <a href=""/Kas mes esame/garantijos/" hreflang=""x-default"">Garantijos pareiškime
- Reikalinga medžiagų perdavimo sutartis
- Taip
.jpg)