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Células HBL-100
Pañuelo de papel
Pecho
Enfermedad
Carcinoma
Sinónimos
HBL 100, HBL100

Documentos

Células HBL-100

Cell line · Número de producto 300178

La HBL-100 es una línea celular epitelial mamaria humana derivada originalmente de la leche materna de una madre lactante. La leche se extrajo tres días después del parto...

€430.00sin impuestos ni gastos de envío

Personalización / Recomendaciones

Existencias escasas
Lote
Recomendado (lote más fresco)
  • CoA
1

01Información general

Descripción

HBL-100 es una línea celular epitelial mamaria humana derivada originalmente de la leche materna de una madre lactante. La leche se recogió tres días después del parto y, a pesar de que no había indicios de lesión mamaria en la donante ni antecedentes familiares de cáncer de mama, las células presentaban un cariotipo anormal en el séptimo pasaje. Esta línea celular destaca por su capacidad de sintetizar una pequeña cantidad de lactosa y de responder a la estimulación por prolactina o estrógenos aumentando la producción de caseína. Los análisis microscópicos, como las micrografías electrónicas, han confirmado la presencia de microvellosidades, tonofibrillas y desmosomas en estas células, lo que pone de relieve sus características epiteliales típicas.

Sin embargo, la línea celular HBL-100 ha encontrado importantes complicaciones en lo que respecta a su identificación y caracterización. Se descubrió que contenía un cromosoma Y, lo que sugiere un error de identificación, ya que inicialmente se pensó que la línea celular era de origen femenino. La presencia de secuencias genómicas de SV40 en la línea celular es también compleja, lo que contradice la creencia anterior de que se trataba de una inmortalización espontánea. Estos hallazgos han dado lugar a debates sobre el origen y la composición genética de HBL-100, lo que la convierte en una línea celular problemática para la investigación sin una validación exhaustiva de sus características y origen.

Pañuelo de papel
Pecho
Enfermedad
Carcinoma
Sinónimos
  • HBL 100
  • HBL100

02Clasificación

Organismo
Humano
Sexo
Mujer
Propiedades de crecimiento
Adherente
Nivel de bioseguridad
1

03Características

Morfología
De tipo epitelial
Tumorigénico
Sí, en ratones desnudos. En niveles de pasaje inferiores a 35, la línea no es tumorigénica en ratones desnudos, pero forma colonias en agar blando. Se ha informado de que la tumorigenicidad aumenta por encima del pasaje 35.
Estado de ploidía
Aneuploide
Estado de MSI
Estable (MSS)
Cariotipo
El número de cromosomas de la línea madre es casi triploide, con un número modal de 67 cromosomas y un componente 2S del 0,6%. La mayoría de los complementos cromosómicos están formados por unos 39 cromosomas normales y 28 cromosomas marcadores. Marcadores como 2q, 11q+, 11q, t(2q.12), t(2q.5q?), t(6p?.16), 16pt y muchos otros son comunes en la mayoría de las metafases. Los cromosomas normales 11, 14, 15 y 16 están ausentes. los cromosomas 2, 12, 17 y 19 son monosómicos, y el x es disómico. El perfil de ADN para amelogenina, un ensayo PCR específico del cromosoma sexual que puede distinguir los productos específicos del cromosoma x de los productos específicos del cromosoma Y, reveló la presencia de cromosomas Y en esta línea celular de supuesto origen femenino. La confirmación de los hallazgos generales se llevó a cabo mediante tinción QM, C-banding y FISH, con una sonda de pintura de cromosoma completo para el cromosoma Y humano.

04Identificadores

Referencia
HBL-100 (número de catálogo 300178 de Cytion)
N.º de identificación fiscal del NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_4362

05Expresión y susceptibilidad

Expresión de antígenos
HLA A1, A10, A11, B7, B8
Isoenzimas
G6PD, B, PGM1, 1, PGM3, 2, ES-D, 1, Me-2, 0, GLO-1, 2, AK-1, 1-2, Producto de Frecuencia de Fenotipo: 0.0008
Virus
Las células contienen un genoma SV40 tamdemly integrado se ha informado de que pueden contener un retrovirus de tipo D que es similar o idéntico al virus del mono Mason-Pfizer (MPMV).
Transcriptasa inversa
Positivo

06Manejo y cultivo

Medio de cultivo
McCoys 5a, w: 3,0 g/L Glucosa, w: Glutamina estable, w: 2,0 mM Piruvato sódico, w: 2,2 g/L NaHCO3 (número de artículo de Cytion 820200a)
Atmósfera de incubación

37°C, 5%CO2, atmósfera humidificada.

Suplementos
Complementar el medio con un 10% de FBS
Reactivo de disociación
Accutase
Subcultivo
Retire el medio antiguo de las células adheridas y lávelas con PBS que carezca de calcio y magnesio. Para matraces T25, utilice 3-5 ml de PBS, y para matraces T75, utilice 5-10 ml. A continuación, cubra completamente las células con Accutase, utilizando 1-2 ml para matraces T25 y 2,5 ml para matraces T75. Deje incubar las células a temperatura ambiente durante 8-10 minutos para desprenderlas. Tras la incubación, mezclar suavemente las células con 10 ml de medio para resuspenderlas y, a continuación, centrifugar a 300xg durante 3 minutos. Desechar el sobrenadante, resuspender las células en medio fresco y transferirlas a nuevos matraces que ya contengan medio fresco.
Densidad de siembra
1 x 104 células/cm2
Renovación de fluidos
de 2 a 3 veces por semana
Recuperación tras la descongelación
Después de descongelar, siembre las células a 5 x 104 células/cm2 y deje que las células se recuperen del proceso de congelación y se adhieran durante al menos 24 horas.
Descongelación y cultivo

  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Control de calidad y criopreservación

Esterilidad

La contaminación por micoplasma se excluye utilizando tanto ensayos basados en la PCR como métodos de detección de micoplasma basados en la luminiscencia.

Para garantizar la ausencia de contaminación bacteriana, fúngica o por levaduras, los cultivos celulares se someten a inspecciones visuales diarias.

Medio de congelación
Como medio de criopreservación, utilizamos el medio de crecimiento completo (incluido FBS) + 10% DMSO para una viabilidad adecuada tras la descongelación, o CM-1 (número de catálogo 800100 de Cytion), que incluye osmoprotectores optimizados y estabilizadores metabólicos para mejorar la recuperación y reducir el estrés crioinducido.
Condiciones de almacenamiento

Para la conservación a largo plazo, colocar los viales en nitrógeno líquido en fase vapor a una temperatura aproximada de -150 a -196 °C. El almacenamiento a -80 °C sólo es aceptable como breve paso intermedio antes de la transferencia al nitrógeno líquido.

Condiciones de envío

Las líneas celulares crioconservadas se envían en hielo seco en envases validados y aislados con suficiente refrigerante para mantener aproximadamente -78 °C durante el tránsito. A la recepción, inspeccione el envase inmediatamente y transfiera los viales sin demora al almacenamiento adecuado.

08Donante

Edad del donante
27 años
Origen étnico
Caucásico