Langsung ke isi
Sel HBL-100
Tisu
Payudara
Penyakit
Karsinoma
Sinonim
HBL 100, HBL100

Sel HBL-100

Cell line · Nomor produk 300178

HBL-100 adalah garis sel epitel payudara manusia yang awalnya diisolasi dari ASI seorang ibu menyusui. ASI tersebut dikumpulkan tiga hari setelah melahirkan...

€430.00belum termasuk pajak dan ongkos kirim
Stok menipis
Lot
Direkomendasikan (stok terbaru)
  • CoA
1

01Informasi umum

Deskripsi

HBL-100 adalah garis sel epitel payudara manusia yang awalnya berasal dari ASI seorang ibu menyusui. ASI dikumpulkan tiga hari setelah melahirkan, dan meskipun tidak ada bukti lesi payudara pada donor dan tidak ada riwayat kanker payudara dalam keluarga, sel-sel tersebut menunjukkan kariotipe abnormal pada bagian 7. Garis sel ini terkenal karena kemampuannya untuk mensintesis sejumlah kecil laktosa dan merespons stimulasi prolaktin atau estrogen dengan meningkatkan produksi kasein. Analisis mikroskopis, seperti mikrograf elektron, telah mengkonfirmasi keberadaan mikrovili, tonofibril, dan desmosom dalam sel-sel ini, yang menyoroti karakteristik epitelnya yang khas.

Namun, garis sel HBL-100 telah mengalami komplikasi yang signifikan terkait identifikasi dan karakterisasinya. Ditemukan mengandung kromosom Y, yang menunjukkan adanya kesalahan identifikasi karena pada awalnya garis sel tersebut dianggap berasal dari perempuan. Kerumitan lebih lanjut muncul dari adanya sekuens genom SV40 di dalam garis sel, yang bertentangan dengan keyakinan sebelumnya bahwa itu diabadikan secara spontan. Temuan ini telah menimbulkan perdebatan mengenai asal-usul dan susunan genetik HBL-100, menjadikannya garis sel yang bermasalah untuk penelitian tanpa validasi menyeluruh mengenai karakteristik dan asal-usulnya.

Tisu
Payudara
Penyakit
Karsinoma
Sinonim
  • HBL 100
  • HBL100

02Klasifikasi

Organisme
Manusia
Seks
Perempuan
Sifat-sifat pertumbuhan
Pengikut
Tingkat keamanan hayati
1

03Karakteristik

Morfologi
Seperti epitel
Tumorigenik
Ya, pada tikus telanjang. Pada tingkat bagian di bawah 35, garis ini tidak bersifat tumorigenik pada tikus telanjang, tetapi membentuk koloni dalam agar lunak. Tumorigenitas telah dilaporkan meningkat di atas bagian 35.
Status ploidi
Aneuploid
Status MSI
Stabil (MSS)
Kariotipe
Jumlah kromosom stemline mendekati triploid dengan jumlah modal 67 kromosom, dan komponen 2S muncul sebesar 0,6%. Sebagian besar komplemen kromosom terdiri dari sekitar 39 kromosom normal dan 28 kromosom penanda. Penanda seperti 2q, 11q+, 11q, t (2q.12), t (2q.5q?), t (6p?.16), 16pt, dan banyak lagi yang lainnya adalah umum pada sebagian besar metafase. Kromosom normal 11, 14, 15 dan 16 tidak ada. 2, 12, 17 dan 19 adalah monosom, dan x adalah disom. Profil DNA untuk amelogenin, uji PCR spesifik kromosom seks yang dapat membedakan produk spesifik kromosom x dari produk spesifik kromosom Y mengungkapkan adanya kromosom Y dalam garis sel yang diduga berasal dari perempuan ini. Konfirmasi temuan umum dilakukan dengan pewarnaan QM, C-banding, dan FISH, dengan probe cat kromosom utuh ke kromosom Y manusia.

04Pengidentifikasi

Referensi
HBL-100 (Nomor katalog Cytion 300178)
Nomor Identifikasi Pajak NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_4362

05Ekspresi dan kerentanan

Ekspresi antigen
HLA A1, A10, A11, B7, B8
Isoenzim
G6PD, B, PGM1, 1, PGM3, 2, ES-D, 1, Me-2, 0, GLO-1, 2, AK-1, 1-2, Produk Frekuensi Fenotipe: 0.0008
Virus
Sel-sel tersebut mengandung genom SV40 yang terintegrasi secara tamdemly dan telah dilaporkan bahwa mereka mungkin mengandung retrovirus tipe D yang mirip atau identik dengan virus monyet Mason-Pfizer (MPMV).
Transkriptase balik
Positif

06Penanganan dan budidaya

Media kultur
McCoys 5a, w: 3,0 g/L Glukosa, w: stabil Glutamin, w: 2,0 mM Natrium piruvat, w: 2,2 g/L NaHCO3 (Nomor artikel Cytion 820200a)
Suasana inkubasi

37°C, 5%CO2, atmosfer yang dilembabkan.

Suplemen
Tambahkan media dengan 10% FBS
Reagen disosiasi
Accutase
Perbanyakan sel
Buang media lama dari sel yang melekat dan cuci dengan PBS yang tidak mengandung kalsium dan magnesium. Untuk labu T25, gunakan 3-5 ml PBS, dan untuk labu T75, gunakan 5-10 ml. Kemudian, tutupi sel sepenuhnya dengan Accutase, menggunakan 1-2 ml untuk labu T25 dan 2,5 ml untuk labu T75. Biarkan sel diinkubasi pada suhu kamar selama 8-10 menit untuk melepaskannya. Setelah inkubasi, campurkan sel secara perlahan dengan 10 ml medium untuk meresuspensi sel, kemudian sentrifugasi pada 300xg selama 3 menit. Buang supernatan, resuspensi sel dalam medium segar, dan pindahkan ke dalam labu baru yang sudah berisi medium segar.
Kepadatan penanaman
1 x 10⁴ sel/cm²
Pergantian cairan
2 hingga 3 kali per minggu
Pemulihan pasca-pencairan
Setelah dicairkan, tanam sel pada kepadatan 5 x 10⁴ sel/cm² dan biarkan sel pulih dari proses pembekuan serta menempel setidaknya selama 24 jam.
Pencairan dan pembiakan
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Pengendalian mutu dan kriopreservasi

Kemandulan

Kontaminasi mikoplasma disingkirkan dengan menggunakan tes berbasis PCR dan metode deteksi mikoplasma berbasis pendaran.

Untuk memastikan tidak ada kontaminasi bakteri, jamur, atau ragi, kultur sel menjalani inspeksi visual setiap hari.

Media pembekuan
Sebagai media kriopreservasi, kami menggunakan media pertumbuhan lengkap (termasuk FBS) + 10% DMSO untuk viabilitas pasca-pencairan yang memadai, atau CM-1 (nomor katalog Cytion 800100), yang mencakup osmoprotektan yang dioptimalkan dan penstabil metabolisme untuk meningkatkan pemulihan dan mengurangi stres yang diinduksi kriopreservasi.
Kondisi penyimpanan

Untuk pengawetan jangka panjang, tempatkan botol dalam nitrogen cair fase uap pada suhu sekitar -150 hingga -196 °C. Penyimpanan pada suhu -80 °C hanya dapat diterima sebagai langkah sementara sebelum dipindahkan ke nitrogen cair.

Ketentuan pengiriman

Lini sel kriopreservasi dikirim di atas es kering dalam kemasan terisolasi yang divalidasi dengan refrigeran yang cukup untuk mempertahankan suhu sekitar -78 ° C selama perjalanan. Setelah diterima, segera periksa wadah dan pindahkan botol tanpa penundaan ke tempat penyimpanan yang sesuai.

08Donatur

Usia donor
27 tahun
Etnis
Kaukasia