İçeriğe atla
HBL-100 Hücreleri
Doku
Meme
Hastalık
Karsinom
Eş anlamlılar
HBL 100, HBL100

HBL-100 Hücreleri

Cell line · Ürün numarası 300178

HBL-100, emziren bir annenin anne sütünden elde edilen bir insan meme epitel hücre hattıdır. Süt, doğumdan üç gün sonra toplanmıştır...

€430.00vergi ve kargo hariç
Stok az
Lot
Önerilen (en taze parti)
  • CoA
1

01Genel bilgiler

Açıklama

HBL-100, aslen emziren bir annenin anne sütünden elde edilen bir insan meme epitel hücre hattıdır. Süt, doğumdan üç gün sonra toplanmıştır ve donörde meme lezyonuna dair bir kanıt olmamasına ve ailede meme kanseri öyküsü bulunmamasına rağmen, hücreler 7. geçişte anormal bir karyotip sergilemiştir. Bu hücre hattı, az miktarda laktoz sentezleme ve kazein üretimini artırarak prolaktin veya östrojen uyarımına yanıt verme kabiliyetiyle dikkat çekmektedir. Elektron mikrografları gibi mikroskobik analizler, bu hücrelerde mikrovillus, tonofibril ve desmozomların varlığını doğrulayarak tipik epitelyal özelliklerini vurgulamıştır.

Bununla birlikte, HBL-100 hücre hattı, tanımlanması ve karakterizasyonu ile ilgili önemli komplikasyonlarla karşılaşmıştır. Hücre hattının başlangıçta kadın kökenli olduğu düşünüldüğünden yanlış bir tanımlamaya işaret eden bir Y kromozomu içerdiği tespit edilmiştir. Hücre hattında SV40 genomik dizilerinin bulunması, kendiliğinden ölümsüzleştiğine dair daha önceki inanışlarla çelişerek daha fazla karmaşıklığa yol açmıştır. Bu bulgular, HBL-100'ün kökeni ve genetik yapısıyla ilgili tartışmalara yol açmış, bu da onu özellikleri ve kökeni tam olarak doğrulanmadan araştırma için sorunlu bir hücre hattı haline getirmiştir.

Doku
Meme
Hastalık
Karsinom
Eş anlamlılar
  • HBL 100
  • HBL100

02Sınıflandırma

Canlı
İnsan
Cinsiyet
Kadın
Büyüme özellikleri
Bağlı
Biyogüvenlik seviyesi
1

03Özellikler

Morfoloji
Epitel benzeri
Tümör oluşturucu
Evet, çıplak farelerde. 35'in altındaki pasaj seviyelerinde hat çıplak farelerde tümörijenik değildir, ancak yumuşak agarda koloniler oluşturur. Tümörijenisitenin 35. pasajın üzerinde arttığı bildirilmiştir.
Ploidi durumu
Aneuploid
MSI durumu
Kararlı (MSS)
Karyotip
Kök kromozom sayısı triploide yakın olup modal kromozom sayısı 67'dir ve 2S bileşeni %0,6 oranında görülür. Çoğu kromozom komplementi yaklaşık 39 normal ve 28 marker kromozomdan oluşur. 2q, 11q+, 11q, t(2q.12), t(2q.5q?), t(6p?.16), 16pt ve diğerleri gibi belirteçler çoğu metafazda ortaktır. Normal kromozomlar 11, 14, 15 ve 16 yoktur. 2, 12, 17 ve 19 monosomiktir ve x disomiktir. X kromozomuna özgü ürünleri Y kromozomuna özgü ürünlerden ayırt edebilen cinsiyet kromozomuna özgü bir PCR testi olan amelogenin için DNA profili, varsayılan dişi kökenli bu hücre hattında Y kromozomlarının varlığını ortaya koymuştur. Genel bulguların doğrulanması QM boyama, C-bantlama ve insan Y kromozomuna yönelik bir tüm kromozom boya probu ile FISH ile gerçekleştirilmiştir.

04Tanımlayıcılar

Kaynak gösterimi
HBL-100 (Cytion katalog numarası 300178)
NCBI Vergi Kimlik Numarası
9606
Cellosaurus
CVCL_4362

05İfade ve duyarlılık

Antijen ekspresyonu
HLA A1, A10, A11, B7, B8
İzoenzimler
G6PD, B, PGM1, 1, PGM3, 2, ES-D, 1, Me-2, 0, GLO-1, 2, AK-1, 1-2, Fenotip Frekans Ürünü: 0.0008
Virüsler
Hücreler, Mason-Pfizer maymun virüsü (MPMV) ile benzer veya aynı olan bir D tipi retrovirüs içerebilecekleri bildirilen tam entegre bir SV40 genomu içerir.
Ters transkriptaz
Pozitif

06İşleme ve yetiştirme

Besiyeri
McCoys 5a, w: 3.0 g/L Glukoz, w: stabil Glutamin, w: 2.0 mM Sodyum piruvat, w: 2.2 g/L NaHCO3 (Cytion makale numarası 820200a)
Kuluçka ortamı

37°C, %5CO2, nemlendirilmiş atmosfer.

Takviyeler
Ortamı %10 FBS ile takviye edin
Ayrıştırma reaktifi
Accutase
Alt kültür oluşturma
Yapışık hücrelerden eski ortamı çıkarın ve kalsiyum ve magnezyum içermeyen PBS ile yıkayın. T25 şişeleri için 3-5 ml PBS ve T75 şişeleri için 5-10 ml kullanın. Ardından, T25 flasklar için 1-2 ml ve T75 flasklar için 2,5 ml kullanarak hücreleri Accutase ile tamamen kaplayın. Hücreleri ayırmak için oda sıcaklığında 8-10 dakika inkübasyona bırakın. İnkübasyondan sonra, hücreleri yeniden süspanse etmek için 10 ml besiyeriyle hafifçe karıştırın, ardından 300xg'de 3 dakika santrifüjleyin. Süpernatantı atın, hücreleri taze besiyerinde yeniden süspanse edin ve zaten taze besiyeri içeren yeni şişelere aktarın.
Ekim yoğunluğu
1 x 104 hücre/cm2
Sıvı değişimi
haftada 2 ila 3 kez
Çözülme sonrası toparlanma
Çözüldükten sonra, hücreleri 5 x 104 hücre/cm2 olarak plakaya yerleştirin ve hücrelerin dondurma işleminden kurtulmasını ve en az 24 saat boyunca yapışmasını bekleyin.
Çözme ve kültürleme
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kalite kontrol ve kriyoprezervasyon

Kısırlık

Mikoplazma kontaminasyonu hem PCR tabanlı tahliller hem de lüminesans tabanlı mikoplazma tespit yöntemleri kullanılarak dışlanır.

Bakteriyel, fungal veya maya kontaminasyonu olmadığından emin olmak için hücre kültürleri günlük görsel incelemelere tabi tutulur.

Dondurma ortamı
Kriyoprezervasyon ortamı olarak, yeterli çözülme sonrası canlılık için tam büyüme ortamı (FBS dahil) + %10 DMSO veya iyileşmeyi artırmak ve kriyo-indüklenmiş stresi azaltmak için optimize edilmiş ozmoprotektanlar ve metabolik stabilizatörler içeren CM-1 (Cytion katalog numarası 800100) kullanıyoruz.
Saklama koşulları

Uzun süreli muhafaza için flakonları yaklaşık -150 ila -196 °C'de buhar fazlı sıvı nitrojen içine yerleştirin. 80 °C'de saklama yalnızca sıvı nitrojene aktarılmadan önce kısa bir ara adım olarak kabul edilebilir.

Nakliye koşulları

Kriyoprezerve edilmiş hücre hatları, nakliye boyunca yaklaşık -78 °C'yi korumak için yeterli soğutucu akışkan içeren, onaylanmış, yalıtılmış ambalajlarda kuru buz üzerinde gönderilir. Teslim aldığınızda, kabı hemen inceleyin ve flakonları gecikmeden uygun depoya aktarın.

08Bağışçı

Bağışçının yaşı
27 yıl
Etnik köken
Kafkas