Células HBL-100

A HBL-100 é uma linha de células epiteliais da mama humana originalmente derivada do leite materno de uma mãe lactante. O leite foi recolhido três dias após o parto e, apesar de não haver indícios de lesões mamárias na dadora nem história familiar de cancro da mama, as células apresentavam um cariótipo anormal na passagem 7. Esta linha celular é notável pela sua capacidade de sintetizar uma pequena quantidade de lactose e de responder à estimulação com prolactina ou estrogénio, aumentando a produção de caseína. Análises microscópicas, como as micrografias electrónicas, confirmaram a presença de microvilosidades, tonofibrilas e desmossomas nestas células, realçando as suas caraterísticas epiteliais típicas.

No entanto, a linha celular HBL-100 deparou-se com complicações significativas relativamente à sua identificação e caraterização. Verificou-se que contém um cromossoma Y, o que sugere uma identificação incorrecta, uma vez que se pensava inicialmente que a linha celular era de origem feminina. A complexidade adicional resulta da presença de sequências genómicas de SV40 na linha celular, o que contradiz as crenças anteriores de que se tratava de uma imortalização espontânea. Estas descobertas conduziram a debates sobre a origem e a composição genética da HBL-100, tornando-a uma linha celular problemática para a investigação sem uma validação exaustiva das suas caraterísticas e origem.

37°C, 5%_CO2, atmosfera humidificada.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

A contaminação por micoplasma é excluída utilizando ensaios baseados em PCR e métodos de deteção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não há contaminação bacteriana, fúngica ou de leveduras, as culturas de células são sujeitas a inspecções visuais diárias.

Para conservação a longo prazo, colocar os frascos em azoto líquido em fase de vapor a uma temperatura entre -150 e -196 °C. O armazenamento a -80 °C é aceitável apenas como um curto passo intermédio antes da transferência para azoto líquido.

As linhas celulares criopreservadas são expedidas em gelo seco em embalagens validadas e isoladas com refrigerante suficiente para manter aproximadamente -78 °C durante o transporte. Aquando da receção, inspecionar imediatamente o recipiente e transferir sem demora os frascos para um local de armazenamento adequado.

Na Cytion, nós garantimos a qualidade e a viabilidade de nossos produtos. Garantimos que nossas células serão viáveis no início da cultura por 60 dias após o envio de nossas instalações. Asseguramos que todos os materiais estão em conformidade com as especificações descritas no Certificado de Análise e/ou Folha de Produto

Para mais informações, consulte a nossa <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Declaração de Garantia