HBL-100-solut
Cell line · Tuotenumero 300178
HBL-100 on ihmisen rintaepiteelisolulinja, joka on alun perin peräisin imettävän äidin rintamaidosta. Maito kerättiin kolme päivää synnytyksen jälkeen...
Räätälöinti / Suositukset
- HBL-100-solutCell line€430.00
Suositeltava (tuorein erä)
01Yleistä tietoa
- Kuvaus
HBL-100 on ihmisen rintaepiteelisolulinja, joka on alun perin saatu imettävän äidin rintamaidosta. Maito kerättiin kolme päivää synnytyksen jälkeen, ja vaikka luovuttajalla ei ollut merkkejä rintamuutoksesta eikä suvussa esiintynyt rintasyöpää, solut osoittivat epänormaalia karyotyyppiä läpikäynnin 7 aikana. Tämä solulinja on tunnettu siitä, että se pystyy syntetisoimaan pienen määrän laktoosia ja reagoimaan prolaktiinin tai estrogeenin stimulaatioon lisäämällä kaseiinin tuotantoa. Mikroskooppiset analyysit, kuten elektronimikroskooppikuvaukset, ovat vahvistaneet mikrovillien, tonofibrillien ja desmosomien esiintymisen näissä soluissa, mikä korostaa niiden tyypillisiä epiteeliominaisuuksia.
HBL-100-solulinjalla on kuitenkin ollut huomattavia vaikeuksia sen tunnistamisessa ja karakterisoinnissa. Sen todettiin sisältävän Y-kromosomin, mikä viittaa virheelliseen tunnistukseen, sillä solulinjan luultiin alun perin olevan naisperäinen. Lisäkompleksisuutta aiheuttaa SV40-genomisekvenssien esiintyminen solulinjassa, mikä on ristiriidassa aikaisempien käsitysten kanssa, joiden mukaan solulinja oli spontaanisti kuolematon. Nämä havainnot ovat johtaneet keskusteluihin HBL-100:n alkuperästä ja geneettisestä koostumuksesta, mikä tekee siitä ongelmallisen solulinjan tutkimukseen ilman sen ominaisuuksien ja alkuperän perusteellista validointia.
- Kudos
- Rinta
- Sairaus
- Syöpä
- Synonyymit
- HBL 100
- HBL100
02Luokittelu
- Organismi
- Ihminen
- Sukupuoli
- Nainen
- Kasvuominaisuudet
- Kiinnittynyt
- Bioturvallisuustaso
- 1
03Ominaisuudet
- Morfologia
- Epiteelin kaltainen
- Kasvaimia aiheuttava
- Kyllä, alastomilla hiirillä. Alle 35:n läpivientitasoilla linja ei ole nude-hiirissä tumorigeeninen, mutta se muodostaa pesäkkeitä pehmeässä agarissa. Tumorigeenisyyden on raportoitu lisääntyvän yli 35. läpiviennin jälkeen.
- Ploidisuus
- Aneuploidinen
- MSI-tila
- Vakaa (MSS)
- Karyotyyppi
- Kromosomiluku on lähes triploidi, modaaliluku on 67 kromosomia, ja 2S-komponenttia esiintyy 0,6 prosenttia. Useimmat kromosomikomplementit koostuvat noin 39 normaalista ja 28 merkkikromosomista. Markkereita, kuten 2q, 11q+, 11q, t(2q.12), t(2q.5q?), t(6p?.16), 16pt ja monet muut ovat yleisiä useimmissa metafaaseissa. Normaalit kromosomit 11, 14, 15 ja 16 puuttuvat. kromosomit 2, 12, 17 ja 19 ovat monosomisia, ja x on disominen. DNA-profilointi amelogeniinille, joka on sukupuolikromosomispesifinen PCR-määritys, jolla voidaan erottaa x-kromosomispesifiset tuotteet Y-kromosomispesifisistä tuotteista, paljasti Y-kromosomien esiintymisen tässä oletettavasti naisperäisessä solulinjassa. Yleiset löydökset vahvistettiin QM-värjäyksellä, C-banding-menetelmällä ja FISH-menetelmällä, jossa käytettiin ihmisen Y-kromosomiin kohdistuvaa koko kromosomin maalauskoetinta.
04Tunnisteet
- Lähdeviite
- HBL-100 (Cytionin luettelonumero 300178)
- NCBI-verotunnus
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_4362
05Ilmentyminen ja alttius
- Antigeenin ilmentyminen
- HLA A1, A10, A11, B7 JA B8
- Isoentsyymit
- G6PD, B, PGM1, 1, PGM3, 2, ES-D, 1, Me-2, 0, GLO-1, 2, AK-1, 1-2, Fenotyypin frekvenssituote: 0.0008
- Virukset
- Solut sisältävät tamdemly-integroituneen SV40-genomin, ja on raportoitu, että ne saattavat sisältää D-tyypin retrovirusta, joka on samanlainen tai identtinen Mason-Pfizer-apinaviruksen (MPMV) kanssa.
- Käänteiskopioijaentsyymi
- Positiivinen
06Käsittely ja viljely
- Viljelyalusta
- McCoys 5a, w: 3,0 g/l glukoosia, w: vakaa glutamiini, w: 2,0 mM natriumpyruvaattia, w: 2,2 g/l NaHCO3 (Cytionin artikkelinumero 820200a)
- Inkubaatioilma
37 °C, 5 %CO2, kostutettu ilmakehä.
- Ravintolisät
- Täydennetään elatusainetta 10 %:lla FBS:llä
- Dissosiaatioreagenssi
- Accutase
- Soluviljely
- Poista vanha väliaine tarttuneista soluista ja pese ne PBS:llä, josta puuttuu kalsiumia ja magnesiumia. Käytä T25-pulloissa 3-5 ml PBS:ää ja T75-pulloissa 5-10 ml. Peitä sitten solut kokonaan Accutase-valmisteella, käyttäen 1-2 ml T25-pulloissa ja 2,5 ml T75-pulloissa. Anna solujen inkuboitua huoneenlämmössä 8-10 minuuttia solujen irtoamiseksi. Inkuboinnin jälkeen solut sekoitetaan varovasti 10 ml:n väliaineella niiden resuspendoimiseksi ja sentrifugoidaan sitten 300xg:n nopeudella 3 minuutin ajan. Hävitä supernatantti, suspendoi solut uudelleen tuoreeseen väliaineeseen ja siirrä ne uusiin pulloihin, jotka sisältävät jo tuoretta väliaineita.
- Kylvötiheys
- 1 x 104 solua/cm2
- Nesteen uusiminen
- 2-3 kertaa viikossa
- Sulamisen jälkeinen palautuminen
- Sulattamisen jälkeen levitä solut 5 x 104 solua/cm2 ja anna solujen toipua pakastusprosessista ja kiinnittyä vähintään 24 tunnin ajan.
- Sulatus ja viljely
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Laadunvalvonta ja kryosäilytys
- Hedelmättömyys
Mykoplasmakontaminaatio suljetaan pois sekä PCR-pohjaisilla määrityksillä että luminesenssiin perustuvilla mykoplasman osoitusmenetelmillä.
Bakteeri-, sieni- tai hiivakontaminaation välttämiseksi soluviljelmät tarkastetaan päivittäin silmämääräisesti.
- Jäädytysaine
- Kryosäilytysmediana käytämme täydellistä kasvualustaa (mukaan lukien FBS) + 10 % DMSO:ta riittävän sulatuksen jälkeisen elinkelpoisuuden varmistamiseksi tai CM-1:tä (Cytionin luettelonumero 800100), joka sisältää optimoituja osmoprotectantteja ja metabolisia stabilisaattoreita, jotka parantavat elpymistä ja vähentävät kryosäilytyksen aiheuttamaa stressiä.
- Säilytysolosuhteet
Pitkäaikaissäilytystä varten injektiopullot asetetaan höyryfaasissa olevaan nestemäiseen typpeen noin -150 - -196 °C:een. Säilytys -80 °C:ssa on hyväksyttävää vain lyhyenä välivaiheena ennen siirtoa nestemäiseen typpeen.
- Toimitusehdot
Kryosäilytetyt solulinjat kuljetetaan kuivajäässä validoidussa, eristetyssä pakkauksessa, jossa on riittävästi kylmäainetta, jotta lämpötila pysyy noin -78 °C:ssa koko kuljetuksen ajan. Pakkaus on tarkastettava välittömästi sen vastaanottamisen jälkeen ja injektiopullot on siirrettävä viipymättä asianmukaiseen varastoon.
08Lahjoittaja
- Luovuttajan ikä
- 27 vuotta
- Etnisyys
- Kaukasialainen
09Oikeudelliset ja turvallisuusasiat
- Turvallisuusohjeet
- Kun suunnitellaan kryoputken säilyttämistä nestemäisessä typessä sulatusta varten, on noudatettava tiukkoja turvatoimenpiteitä. Asianmukaiset suojakäsineet ja -vaatteet ovat välttämättömiä, ja kasvonaamarin tai suojalasien käyttö on välttämätöntä siirrettäessä jäädytettyjä näytteitä nestetyppisäiliöön tai siitä pois. Tällä pyritään pienentämään loukkaantumisriskiä, joka aiheutuu kryoputkien mahdollisista räjähdyksistä, jotka voivat aiheuttaa terävien sirpaleiden sinkoutumisen.
- Takuu
Me Cytionilla seisomme tuotteidemme laadun ja elinkelpoisuuden takana. Takaamme, että solumme ovat elinkelpoisia viljelyn alkaessa 60 päivän ajan sen jälkeen, kun ne on lähetetty laitoksestamme. Vakuutamme, että kaikki materiaalit ovat analyysitodistuksessa ja/tai tuoteselosteessa kuvattujen eritelmien mukaisia
Lisätietoja on <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang="""x-default"">Takuulausumassa
- Aineiden siirtoa koskeva sopimus vaaditaan
- Kyllä
.jpg)