Komórki HBL-100
Cell line · Numer produktu 300178
HBL-100 to ludzka linia komórek nabłonkowych piersi, pierwotnie wyizolowana z mleka matki karmiącej. Mleko pobrano trzy dni po porodzie...
Dostosowanie / Zalecenia
- Komórki HBL-100Cell line€430.00
Polecane (najświeższa partia)
01Informacje ogólne
- Opis
HBL-100 to ludzka linia komórek nabłonkowych piersi, pierwotnie uzyskana z mleka matki karmiącej. Mleko zostało pobrane trzy dni po porodzie i pomimo braku dowodów na uszkodzenie piersi u dawczyni i braku rodzinnej historii raka piersi, komórki wykazywały nieprawidłowy kariotyp do 7. przejścia. Ta linia komórkowa wyróżnia się zdolnością do syntezy niewielkiej ilości laktozy i reagowania na stymulację prolaktyną lub estrogenem poprzez zwiększenie produkcji kazeiny. Analizy mikroskopowe, takie jak mikrografie elektronowe, potwierdziły obecność mikrokosmków, tonofibryli i desmosomów w tych komórkach, podkreślając ich typowe cechy nabłonkowe.
Jednakże, linia komórkowa HBL-100 napotkała znaczące komplikacje dotyczące jej identyfikacji i charakterystyki. Stwierdzono, że zawiera chromosom Y, co sugeruje błędną identyfikację, ponieważ początkowo uważano, że linia komórkowa jest pochodzenia żeńskiego. Dalsza złożoność wynika z obecności sekwencji genomowych SV40 w linii komórkowej, co zaprzecza wcześniejszym przekonaniom, że została ona spontanicznie unieśmiertelniona. Odkrycia te doprowadziły do debat dotyczących pochodzenia i składu genetycznego HBL-100, czyniąc ją problematyczną linią komórkową do badań bez dokładnego potwierdzenia jej cech i pochodzenia.
- Chusteczka
- Pierś
- Choroba
- Rak
- Synonimy
- HBL 100
- HBL100
02Klasyfikacja
- Organizm
- Człowiek
- Seks
- Kobieta
- Właściwości związane ze wzrostem
- Zwolennik
- Poziom bezpieczeństwa biologicznego
- 1
03Cechy charakterystyczne
- Morfologia
- Podobny do nabłonka
- Nowotworotwórczy
- Tak, u nagich myszy. Przy poziomach pasażowania poniżej 35 linia nie jest nowotworowa u nagich myszy, ale tworzy kolonie w miękkim agarze. Stwierdzono, że nowotworowość wzrasta powyżej 35. pasażowania.
- Status ploidii
- Aneuploid
- Stan MSI
- Stabilny (MSS)
- Karyotyp
- Liczba chromosomów linii macierzystej jest bliska triploidalnej z modalną liczbą 67 chromosomów i składnikiem 2S występującym na poziomie 0,6%. Większość chromosomów składa się z około 39 normalnych i 28 markerowych chromosomów. Markery takie jak 2q, 11q+, 11q, t(2q.12), t(2q.5q?), t(6p?.16), 16pt i wiele innych są wspólne dla większości metafaz. Normalne chromosomy 11, 14, 15 i 16 są nieobecne. 2, 12, 17 i 19 są monosomiczne, a x jest disomiczny. Profilowanie DNA pod kątem amelogeniny, test PCR specyficzny dla chromosomów płciowych, który może odróżnić produkty specyficzne dla chromosomu x od produktów specyficznych dla chromosomu Y, ujawnił obecność chromosomów Y w tej linii komórkowej domniemanego pochodzenia żeńskiego. Potwierdzenie ogólnych ustaleń zostało osiągnięte poprzez barwienie QM, C-banding i FISH, z sondą do malowania całego chromosomu do ludzkiego chromosomu Y.
04Identyfikatory
- Źródło
- HBL-100 (numer katalogowy Cytion 300178)
- Numer identyfikacji podatkowej NCBI
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_4362
05Ekspresja i podatność
- Ekspresja antygenu
- HLA A1, A10, A11, B7, B8
- Izoenzymy
- G6PD, B, PGM1, 1, PGM3, 2, ES-D, 1, Me-2, 0, GLO-1, 2, AK-1, 1-2, produkt częstotliwości fenotypu: 0.0008
- Wirusy
- Komórki zawierają tamdemalnie zintegrowany genom SV40, donoszono, że mogą zawierać retrowirusa typu D, który jest podobny lub identyczny z wirusem małp Mason-Pfizer (MPMV).
- Transkryptaza odwrotna
- Pozytywny
06Postępowanie i hodowla
- Pożywka hodowlana
- McCoys 5a, w: 3,0 g/l glukozy, w: stabilna glutamina, w: 2,0 mM pirogronianu sodu, w: 2,2 g/l NaHCO3 (numer artykułu Cytion 820200a)
- Atmosfera inkubacyjna
37°C, 5%CO2, nawilżona atmosfera.
- Suplementy
- Uzupełnić podłoże 10% FBS
- Odczynnik dysocjacyjny
- Accutase
- Hodowla komórek w subkulturze
- Usuń starą pożywkę z przylegających komórek i przemyj je PBS, który nie zawiera wapnia i magnezu. W przypadku kolb T25 należy użyć 3-5 ml PBS, a w przypadku kolb T75 5-10 ml. Następnie całkowicie pokryj komórki Accutase, używając 1-2 ml dla kolb T25 i 2,5 ml dla kolb T75. Pozwól komórkom inkubować w temperaturze pokojowej przez 8-10 minut, aby je oddzielić. Po inkubacji delikatnie wymieszaj komórki z 10 ml pożywki, aby ponownie je zawiesić, a następnie odwiruj przy 300xg przez 3 minuty. Odrzucić supernatant, ponownie zawiesić komórki w świeżej pożywce i przenieść je do nowych kolb zawierających już świeżą pożywkę.
- Gęstość wysiewu
- 1 x 104 komórek/cm2
- Odnawianie płynów
- 2 do 3 razy w tygodniu
- Powrót do stanu sprzed rozmrożenia
- Po rozmrożeniu umieść komórki na płytce w ilości 5 x 104 komórek/cm2 i pozostaw je na co najmniej 24 godziny, aby mogły się zregenerować po procesie zamrażania i przylgnąć do podłoża.
- Rozmrażanie i hodowla
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Kontrola jakości i kriokonserwacja
- Bezpłodność
Zanieczyszczenie mykoplazmą jest wykluczane przy użyciu zarówno testów opartych na PCR, jak i metod wykrywania mykoplazmy opartych na luminescencji.
Aby upewnić się, że nie ma zanieczyszczenia bakteriami, grzybami lub drożdżami, hodowle komórkowe są poddawane codziennym kontrolom wizualnym.
- Pożywka do zamrażania
- Jako pożywki do kriokonserwacji używamy kompletnej pożywki wzrostowej (w tym FBS) + 10% DMSO w celu zapewnienia odpowiedniej żywotności po rozmrożeniu lub CM-1 (numer katalogowy Cytion 800100), która zawiera zoptymalizowane osmoprotektanty i stabilizatory metaboliczne w celu zwiększenia regeneracji i zmniejszenia stresu wywołanego kriokonserwacją.
- Warunki przechowywania
W celu długotrwałego przechowywania należy umieścić fiolki w ciekłym azocie w fazie lotnej w temperaturze od -150 do -196 °C. Przechowywanie w temperaturze -80 °C jest dopuszczalne tylko jako krótki etap przejściowy przed przeniesieniem do ciekłego azotu.
- Warunki wysyłki
Linie komórkowe poddane kriokonserwacji są wysyłane w suchym lodzie w zatwierdzonych, izolowanych opakowaniach z wystarczającą ilością czynnika chłodniczego, aby utrzymać temperaturę około -78°C przez cały czas transportu. Po otrzymaniu przesyłki należy natychmiast sprawdzić pojemnik i bezzwłocznie przenieść fiolki do odpowiedniego miejsca przechowywania.
08Darczyńca
- Wiek dawcy
- 27 lat
- Pochodzenie etniczne
- Kaukaski
09Kwestie prawne i bezpieczeństwo
- Środki bezpieczeństwa
- Planując przechowywanie kriofiolek w ciekłym azocie w celu ich późniejszego rozmrożenia, należy bezwzględnie przestrzegać rygorystycznych środków bezpieczeństwa. Niezbędne są odpowiednie rękawice i odzież ochronna, a podczas przenoszenia zamrożonych próbek do lub ze zbiornika z ciekłym azotem wymagane jest stosowanie maski lub okularów ochronnych. Ma to na celu zmniejszenie ryzyka obrażeń spowodowanych potencjalnymi eksplozjami kriowialu podczas wyjmowania, które mogą skutkować wyrzuceniem ostrych fragmentów.
- Gwarancja
W Cytion gwarantujemy jakość i żywotność naszych produktów. Gwarantujemy, że nasze komórki będą żywotne na początku hodowli przez 60 dni po wysyłce z naszych zakładów. Zapewniamy, że wszystkie materiały są zgodne ze specyfikacjami opisanymi w certyfikacie analizy i/lub karcie produktu
Szczegółowe informacje można znaleźć w naszej <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Oświadczeniu gwarancyjnym
- Wymagana umowa o transferze materiałów
- Tak
.jpg)