الانتقال إلى المحتوى
خلايا HBL-100
الأنسجة
الثدي
المرض
الورم السرطاني
المرادفات
HBL 100, HBL100

المستندات

خلايا HBL-100

Cell line · رقم المنتج 300178

HBL-100 هو خط خلايا ظهارية ثديية بشرية مستمد في الأصل من حليب ثدي أم مرضعة. وقد تم جمع الحليب بعد ثلاثة أيام من الولادة...

€430.00باستثناء الضريبة وتكاليف الشحن
مخزون منخفض
لوت
موصى بها (أحدث دفعة)
  • CoA
1

01معلومات عامة

الوصف

HBL-100 هو خط خلايا طلائية ثديية بشرية مشتقة في الأصل من حليب ثدي أم مرضعة. تم جمع الحليب بعد ثلاثة أيام من الولادة، وعلى الرغم من عدم وجود دليل على وجود آفة في الثدي لدى المتبرعة وعدم وجود تاريخ عائلي للإصابة بسرطان الثدي، أظهرت الخلايا نمطاً نووياً غير طبيعي عند مرور 7. يتميز هذا الخط الخلوي بقدرته على تخليق كمية صغيرة من اللاكتوز والاستجابة لتحفيز البرولاكتين أو الإستروجين عن طريق زيادة إنتاج الكازين. وقد أكدت التحليلات المجهرية، مثل الصور المجهرية الإلكترونية، وجود ميكروفيليات، ولييفات توتونية، وديسموسومات في هذه الخلايا، مما يبرز خصائصها الظهارية النموذجية.

ومع ذلك، واجه خط خلايا HBL-100 تعقيدات كبيرة فيما يتعلق بتحديد هويتها وتوصيفها. فقد وُجد أنه يحتوي على كروموسوم Y، مما يشير إلى وجود خطأ في تحديد هويته حيث كان يُعتقد في البداية أنه من أصل أنثوي. ينشأ المزيد من التعقيد من وجود تسلسل جينوم SV40 داخل خط الخلية، مما يتناقض مع المعتقدات السابقة التي كانت تعتقد أنه خلد تلقائيًا. وقد أدت هذه النتائج إلى جدل حول أصل HBL-100 وتركيبته الجينية، مما يجعله خطاً خلوياً إشكالياً في الأبحاث دون التحقق من خصائصه وأصله.

الأنسجة
الثدي
المرض
الورم السرطاني
المرادفات
  • HBL 100
  • HBL100

02التصنيف

كائن حي
إنسان
الجنس
أنثى
خصائص النمو
الملتزم
مستوى السلامة البيولوجية
1

03الخصائص

المورفولوجيا
شبيه بالظهارة
مُسبِّب للأورام
نعم، في الفئران العارية. عند مستويات مرور أقل من 35، لا يكون السلالة مولِّداً للأورام في الفئران العارية، لكنها تشكل مستعمرات في أجار طري. تم الإبلاغ عن زيادة التولّد الورمي فوق مستوى مرور 35.
حالة البلويدية
أنيوبلويد
حالة MSI
مستقر (MSS)
النمط الكروموسومي
ويقترب عدد الكروموسومات الجذعية من ثلاثي الصبغيات حيث يبلغ العدد النموذجي 67 كروموسومًا، ويوجد مكون 2S بنسبة 0.6%. تتكون معظم الكروموسومات المكملة من حوالي 39 كروموسومًا طبيعيًا و28 كروموسومًا واضعًا علامات. العلامات مثل 2q، و11q+، و11q، وT(2q.12)، وT(2q.5q؟)، وT(6p؟.16)، و16pt وغيرها الكثير من العلامات المشتركة في معظم الميتافازات. الكروموسومات الطبيعية 11 و14 و15 و16 غير موجودة. 2 و12 و12 و17 و19 أحادية الصبغيات و(x) ثنائي الصبغيات. كشف تحليل الحمض النووي للأميلوجينين، وهو اختبار تفاعل البوليميراز المتسلسل الخاص بالكروموسوم الجنسي الذي يمكنه تمييز المنتجات الخاصة بالكروموسوم x عن المنتجات الخاصة بالكروموسوم Y عن وجود كروموسومات Y في هذا الخط الخلوي من أصل أنثوي مفترض. تم تأكيد النتائج العامة عن طريق التلوين الكمي والتلوين الكمي والترابط الكمي والتلوين الكيمائي، باستخدام مسبار طلاء كروموسوم كامل لكروموسوم Y البشري.

04المعرّفات

المرجع
HBL-100 (كتالوج سايتون رقم 300178)
رقم التعريف الضريبي لدى NCBI
9606
سيلوصور
CVCL_4362

05التعبير والقابلية للإصابة

التعبير عن المستضد
HLA A1، A10، A11، B7، B8، B7، B8
الإيزوزيمات
G6PD, B, PGM1, 1, PGM3, 2, ES-D, 1, Me-2, 0, GLO-1, 2, AK-1, 1-2, منتج تردد النمط الظاهري: 0.0008
الفيروسات
تحتوي الخلايا على جينوم SVV40 مدمج بشكل تامديملي تم الإبلاغ عن احتمال احتوائها على فيروس ارتجاعي من النوع D مشابه أو مطابق لفيروس القرد ماسون-فايزر (MPMV).
إنزيم النسخ العكسي
موجب

06التعامل مع النباتات وزراعتها

وسط الاستزراع
مكويز 5 أ، ث: 3.0 جم/لتر جلوكوز، ث: جلوتامين مستقر، ث: 2.0 ملي مولار بيروفات الصوديوم، ث: 2.2 جم/لتر NaHCO3 (رقم المادة 820200 أ)
بيئة الحضانة

37 درجة مئوية، و5% من ثاني أكسيد الكربون في جو مرطب.

المكملات الغذائية
قم بتزويد الوسط ب 10٪ من ال FBS
كاشف التفكك
أكوتاس
إعادة الاستنبات
قم بإزالة الوسط القديم من الخلايا الملتصقة واغسلها باستخدام PBS الذي يفتقر إلى الكالسيوم والمغنيسيوم. بالنسبة لقوارير T25، استخدم 3-5 مل من PBS، وبالنسبة لقوارير T75، استخدم 5-10 مل. ثم، قم بتغطية الخلايا بالكامل باستخدام أكوتاز، باستخدام 1-2 مل لقوارير T25 و2.5 مل لقوارير T75. دع الخلايا تحتضن في درجة حرارة الغرفة لمدة 8-10 دقائق لفصلها. بعد الحضانة، اخلط الخلايا برفق مع 10 مل من الوسط لإعادة ترسيبها، ثم اطردها مركزيًا بسرعة 300xg لمدة 3 دقائق. تخلص من المادة الطافية، وأعد غمر الخلايا في وسط جديد وانقلها إلى قوارير جديدة تحتوي بالفعل على وسط جديد.
كثافة البذر
1 × 104 خلية/سم2
تجديد السوائل
2 إلى 3 مرات في الأسبوع
التعافي بعد ذوبان الجليد
بعد الذوبان، ضع الخلايا في طبق بمعدل 5 × 104 خلية/سم2 واترك الخلايا تتعافى من عملية التجميد وتلتصق لمدة 24 ساعة على الأقل.
إذابة الثلج والزراعة
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07مراقبة الجودة والحفظ بالتبريد

العقم

يُستبعد التلوث بالميكوبلازما باستخدام كل من المقايسات القائمة على تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR) وطرق الكشف عن الميكوبلازما القائمة على التألق.

ولضمان عدم وجود تلوث بكتيري أو فطري أو خميرة يتم إخضاع مزارع الخلايا للفحص البصري اليومي.

وسط التجميد
كوسيط للحفظ بالتبريد، نستخدم وسط نمو كامل (بما في ذلك FBS) + 10% DMSO من أجل الحفاظ على حيوية كافية بعد ذوبان الجليد أو CM-1 (كتالوج Cytion رقم 800100)، والذي يتضمن مواد حماية أسموزموبيروتيكتية ومثبتات أيضية مُحسّنة لتعزيز التعافي وتقليل الإجهاد الناجم عن التبريد.
شروط التخزين

للحفظ طويل الأمد، ضع القوارير في نيتروجين سائل في طور البخار عند درجة حرارة تتراوح بين -150 و -196 درجة مئوية تقريباً. يُقبل التخزين عند درجة حرارة -80 درجة مئوية فقط كخطوة مؤقتة قصيرة قبل النقل إلى النيتروجين السائل.

شروط الشحن

تُشحن خطوط الخلايا المحفوظة بالتبريد على ثلج جاف في عبوات معزولة وموثوقة مع مبرد كافٍ للحفاظ على درجة حرارة -78 درجة مئوية تقريبًا طوال فترة النقل. عند الاستلام، افحص الحاوية على الفور وانقل القوارير دون تأخير إلى المخزن المناسب.

08المانح

عمر المتبرع
27 سنة
الأصل العرقي
قوقازي