NRK-EGFP3-Seh1

NRK-EGFP3-Seh1 ląstelių linija yra stabili kloninė linija, gauta iš normalių žiurkių inkstų (NRK) ląstelių. Ši ląstelių linija buvo sukurta transfekcijos būdu naudojant apvalią plazmidę, koduojančią EGFP3-Seh1 sintezės baltymą. Po transfekcijos ląstelės buvo atrinktos dėl atsparumo vaistams, taip užtikrinant, kad būtų sukurta stabili populiacija, ekspresuojanti norimą konstruktą.

Maždaug 50 % šios populiacijos ląstelių išreiškia EGFP3-Seh1 - sintezės baltymą, jungiantį sustiprintą žaliąjį fluorescencinį baltymą (EGFP) ir Seh1 - branduolinių porų komplekso baltymą. Esant EGFP lengviau vizualizuoti ir sekti sintezės baltymą ląstelėse, todėl mokslininkai gali tirti Seh1 dinamiką ir funkciją įvairiuose ląsteliniuose procesuose. Tačiau EGFP3-Seh1 raiška šioje ląstelių linijoje šiek tiek skiriasi, o tai rodo, kad atskirų populiacijos ląstelių raiškos lygis yra nevienodas.

Ši ląstelių linija ypač naudinga atliekant tyrimus, susijusius su branduolio porų komplekso surinkimu, nukleocitoplazminiu pernešimu ir Seh1 vaidmeniu šiuose procesuose. Dėl EGFP fluorescencijos galima matyti gyvąsias ląsteles ir realiuoju laiku analizuoti baltymų lokalizaciją ir sąveiką, todėl NRK-EGFP3-Seh1 yra vertinga priemonė ląstelių biologijos ir molekuliniams tyrimams.

37 °C, 5 %_CO2, drėkintoje atmosferoje.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mikoplazmos užterštumas atmetamas taikant PGR pagrįstus tyrimus ir liuminescencinius mikoplazmos aptikimo metodus.

Siekiant užtikrinti, kad nebūtų užteršimo bakterijomis, grybeliais ar mielėmis, ląstelių kultūros kasdien vizualiai tikrinamos.

Norėdami ilgai saugoti, įdėkite buteliukus į garų fazės skystą azotą maždaug -150-196 °C temperatūroje. Laikymas -80 °C temperatūroje yra priimtinas tik kaip trumpas tarpinis etapas prieš perkeliant į skystąjį azotą.

Kriokonservuotos ląstelių linijos gabenamos ant sauso ledo patvirtintoje, izoliuotoje pakuotėje su pakankamu kiekiu šaldymo skysčio, kad pervežimo metu būtų palaikoma maždaug -78 °C temperatūra. Gavę pakuotę, nedelsdami ją apžiūrėkite ir nedelsdami perkelkite mėgintuvėlius į tinkamą saugyklą.

" Cytion" garantuoja savo produktų kokybę ir gyvybingumą. Garantuojame, kad mūsų ląstelės bus gyvybingos kultūrų auginimo pradžioje 60 dienų po išsiuntimo iš mūsų gamyklos. Užtikriname, kad visos medžiagos atitinka analizės sertifikate ir (arba) gaminio lape aprašytas specifikacijas

Išsamią informaciją rasite mūsų <a href=""/Kas mes esame/garantijos/" hreflang=""x-default"">Garantijos pareiškime