NRK-EGFP3-Seh1

Dòng tế bào NRK-EGFP3-Seh1 là một dòng tế bào ổn định được phân lập từ tế bào thận chuột bình thường (NRK). Dòng tế bào này được tạo ra thông qua quá trình chuyển gen bằng plasmid tròn mã hóa protein liên hợp EGFP3-Seh1. Sau khi chuyển gen, các tế bào được chọn lọc dựa trên khả năng kháng thuốc, đảm bảo việc thiết lập một quần thể ổn định biểu hiện cấu trúc mong muốn.

Khoảng 50% tế bào trong quần thể này biểu hiện EGFP3-Seh1, một protein liên hợp kết hợp protein huỳnh quang xanh lá cây tăng cường (EGFP) với Seh1, một thành phần protein của phức hợp lỗ nhân. Sự hiện diện của EGFP giúp quan sát và theo dõi protein liên hợp trong tế bào, cho phép các nhà nghiên cứu nghiên cứu động học và chức năng của Seh1 trong các quá trình tế bào khác nhau. Tuy nhiên, sự biểu hiện của EGFP3-Seh1 trong dòng tế bào này có sự biến đổi, cho thấy sự khác biệt về mức độ biểu hiện giữa các tế bào riêng lẻ trong quần thể.

Dòng tế bào này đặc biệt hữu ích cho các nghiên cứu liên quan đến quá trình lắp ráp phức hợp lỗ nhân, vận chuyển nhân-chất tế bào và vai trò của Seh1 trong các quá trình này. Ánh sáng huỳnh quang do EGFP cung cấp cho phép quan sát tế bào sống và phân tích thời gian thực về vị trí và tương tác của protein, khiến NRK-EGFP3-Seh1 trở thành công cụ quý giá cho nghiên cứu sinh học tế bào và phân tử.

37°C, 5%_CO₂, môi trường ẩm.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Sự nhiễm khuẩn Mycoplasma được loại trừ bằng cả các phương pháp xét nghiệm dựa trên PCR và các phương pháp phát hiện Mycoplasma dựa trên phát quang.

Để đảm bảo không có nhiễm khuẩn vi khuẩn, nấm hoặc men, các mẫu nuôi cấy tế bào được kiểm tra trực quan hàng ngày.

Để bảo quản lâu dài, hãy đặt ống nghiệm vào nitơ lỏng ở pha hơi ở nhiệt độ khoảng −150 đến −196 °C. Việc bảo quản ở −80 °C chỉ được chấp nhận như một bước trung gian ngắn hạn trước khi chuyển sang nitơ lỏng.

Các dòng tế bào được bảo quản bằng phương pháp đông lạnh được vận chuyển trên đá khô trong bao bì cách nhiệt đã được kiểm định, kèm theo lượng chất làm lạnh đủ để duy trì nhiệt độ khoảng −78 °C trong suốt quá trình vận chuyển. Khi nhận hàng, hãy kiểm tra ngay lập tức bao bì và chuyển các ống nghiệm sang nơi lưu trữ phù hợp mà không chậm trễ.

Tại Cytion, chúng tôi cam kết về chất lượng và khả năng sống của các sản phẩm của mình. Chúng tôi đảm bảo rằng các tế bào của chúng tôi sẽ có khả năng sống tại thời điểm bắt đầu nuôi cấy trong 60 ngày kể từ khi vận chuyển từ cơ sở của chúng tôi. Chúng tôi cam kết rằng tất cả các vật liệu tuân thủ các thông số kỹ thuật được mô tả trong Giấy chứng nhận phân tích và/hoặc Tài liệu sản phẩm.

Để biết chi tiết đầy đủ, vui lòng tham khảo <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Tuyên bố Bảo hành.