NRK-EGFP3-Seh1

NRK-EGFP3-Seh1 rakuliin on klonaalne stabiilne liin, mis on saadud normaalsetest roti neerurakkudest (NRK). See rakuliin on loodud EGFP3-Seh1 fusioonvalku kodeeriva tsüklilise plasmiidi transfektsiooni teel. Pärast transfektsiooni selekteeriti rakud ravimresistentsuse suhtes, et tagada soovitud konstruktsiooni ekspresseeriva stabiilse populatsiooni loomine.

Ligikaudu 50% selle populatsiooni rakkudest ekspresseerib EGFP3-Seh1, mis on fusioonvalk, mis ühendab tõhustatud roheliselt fluorestseeruvat valku (EGFP) ja Seh1, mis on tuumapoorikompleksi valgu komponent. EGFP olemasolu hõlbustab fusioonvalgu visualiseerimist ja jälgimist rakkudes, mis võimaldab teadlastel uurida Seh1 dünaamikat ja funktsiooni erinevates rakuprotsessides. EGFP3-Seh1 ekspressioon selles rakuliinis on siiski mõnevõrra varieeruv, mis viitab ekspressiooni taseme varieeruvusele üksikute rakkude vahel populatsiooni sees.

See rakuliin on eriti kasulik uuringute jaoks, mis hõlmavad tuumapoorikompleksi kokkupanekut, nukleotsütoplasma transporti ja Seh1 rolli nendes protsessides. EGFP fluorestsentsi abil on võimalik rakkude kujutamine ja valkude lokaliseerimise ja interaktsioonide reaalajas analüüs, mis muudab NRK-EGFP3-Seh1 väärtuslikuks vahendiks rakubioloogias ja molekulaaruuringutes.

37°C, 5%_CO2, niisutatud atmosfäär.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mükoplasmakontaminatsioon on välistatud nii PCR-põhiste analüüside kui ka luminestsentsil põhinevate mükoplasma tuvastamise meetodite abil.

Bakteriaalse, seene- või pärmsaaste puudumise tagamiseks kontrollitakse rakukultuure iga päev visuaalselt.

Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.

Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.

Cytion seisab oma toodete kvaliteedi ja elujõulisuse eest. Me garanteerime, et meie rakud on elujõulised kasvatamise alguses 60 päeva jooksul pärast meie rajatistest saatmist. Tagame, et kõik materjalid vastavad analüüsisertifikaadis ja/või tootelehel kirjeldatud spetsifikatsioonidele

Täielikke üksikasju leiate meie <a href="""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang="""x-default"">Tagatise avaldusest