NRK-EGFP3-Seh1

Az NRK-EGFP3-Seh1 sejtvonal egy normális patkányvese (NRK) sejtekből származó stabil klonális vonal. Ezt a sejtvonalat az EGFP3-Seh1 fúziós fehérjét kódoló cirkuláris plazmid transzfekciójával hozták létre. A transzfekciót követően a sejteket gyógyszerrezisztencia szempontjából szelektáltuk, biztosítva a kívánt konstrukciót expresszáló stabil populáció létrehozását.

A sejtek körülbelül 50%-a expresszálja az EGFP3-Seh1-et, amely egy fúziós fehérje, amely a fokozott zöld fluoreszcens fehérjét (EGFP) és a Seh1-et, a nukleáris pórus komplex egyik fehérjekomponensét kombinálja. Az EGFP jelenléte megkönnyíti a fúziós fehérje láthatóvá tételét és nyomon követését a sejteken belül, lehetővé téve a kutatók számára a Seh1 dinamikájának és működésének tanulmányozását a különböző sejtfolyamatokban. Az EGFP3-Seh1 expressziója azonban ebben a sejtvonalban némi variációt mutat, ami a populáción belüli egyes sejtek expressziós szintjének változékonyságára utal.

Ez a sejtvonal különösen hasznos a nukleáris pórus komplex összeszerelésével, a nukleocitoplazmatikus transzporttal és a Seh1 szerepével kapcsolatos vizsgálatokhoz. Az EGFP által biztosított fluoreszcencia lehetővé teszi az élő sejtek képalkotását és a fehérjék lokalizációjának és kölcsönhatásainak valós idejű elemzését, így az NRK-EGFP3-Seh1 értékes eszköz a sejtbiológiai és molekuláris kutatások számára.

37°C, 5%_CO2, párásított légkör.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

A mikoplazma-szennyeződést mind a PCR-alapú vizsgálatokkal, mind a lumineszcencia-alapú mikoplazma-kimutatási módszerekkel kizárják.

A bakteriális, gombás vagy élesztőgombás szennyeződés elkerülése érdekében a sejtkultúrákat napi vizuális ellenőrzésnek vetik alá.

Hosszú távú tartósítás céljából helyezze az üvegeket gőzfázisú folyékony nitrogénbe, körülbelül -150 és -196 °C közötti hőmérsékleten. A -80 °C-on történő tárolás csak rövid átmeneti lépésként fogadható el a folyékony nitrogénbe való átvitel előtt.

A kriokonzervált sejtvonalakat szárazjégen, validált, szigetelt csomagolásban szállítják, elegendő hűtőközeggel, hogy a szállítás során a hőmérsékletet körülbelül -78 °C-on tartsák. Átvételkor azonnal vizsgálja meg a tárolóedényt, és haladéktalanul helyezze át az injekciós üvegeket a megfelelő tárolóhelyre.

A Cytionnál kiállunk termékeink minősége és életképessége mellett. Garantáljuk, hogy sejtjeink a tenyésztés megkezdésekor életképesek lesznek, a létesítményünkből történő kiszállítás után 60 napig. Biztosítjuk, hogy minden anyag megfelel az analitikai tanúsítványban és/vagy a terméklapon leírt specifikációknak

A teljes részleteket lásd <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang="""x-default"">Garancia nyilatkozatunkban