NRK-EGFP3-Seh1

Die NRK-EGFP3-Seh1-Zelllinie ist eine klonale stabile Linie, die von normalen Rattennierenzellen (NRK) abstammt. Diese Zelllinie wurde durch die Transfektion eines zirkulären Plasmids erzeugt, das für das EGFP3-Seh1-Fusionsprotein kodiert. Nach der Transfektion wurden die Zellen auf Medikamentenresistenz selektiert, um die Etablierung einer stabilen Population zu gewährleisten, die das gewünschte Konstrukt exprimiert.

Etwa 50 % der Zellen in dieser Population exprimieren EGFP3-Seh1, ein Fusionsprotein, das ein verstärkt grün fluoreszierendes Protein (EGFP) mit Seh1, einer Proteinkomponente des Kernporenkomplexes, kombiniert. Das Vorhandensein von EGFP erleichtert die Visualisierung und Verfolgung des Fusionsproteins in den Zellen und ermöglicht es den Forschern, die Dynamik und Funktion von Seh1 in verschiedenen zellulären Prozessen zu untersuchen. Die Expression von EGFP3-Seh1 in dieser Zelllinie weist jedoch eine gewisse Variabilität auf, was auf unterschiedliche Expressionsniveaus in den einzelnen Zellen der Population hinweist.

Diese Zelllinie ist besonders nützlich für Studien, die sich mit dem Aufbau des Kernporenkomplexes, dem nukleozytoplasmatischen Transport und der Rolle von Seh1 bei diesen Prozessen befassen. Die von EGFP bereitgestellte Fluoreszenz ermöglicht die Bildgebung in lebenden Zellen und die Echtzeitanalyse der Proteinlokalisierung und -interaktionen, was NRK-EGFP3-Seh1 zu einem wertvollen Werkzeug für die Zellbiologie und die Molekularforschung macht.

37°C, 5%_CO2, befeuchtete Atmosphäre.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Eine Kontamination mit Mykoplasmen wird sowohl durch PCR-basierte Assays als auch durch lumineszenzbasierte Mykoplasmen-Nachweisverfahren ausgeschlossen.

Um sicherzustellen, dass keine Kontamination mit Bakterien, Pilzen oder Hefen vorliegt, werden die Zellkulturen täglich visuell überprüft.

Zur Langzeitkonservierung werden die Fläschchen in flüssigem Stickstoff bei etwa -150 bis -196 °C gelagert. Eine Lagerung bei -80 °C ist nur als kurzer Zwischenschritt vor der Überführung in flüssigen Stickstoff akzeptabel.

Kryokonservierte Zelllinien werden auf Trockeneis in einer validierten, isolierten Verpackung mit ausreichend Kühlmittel versandt, um während des gesamten Transports eine Temperatur von etwa -78 °C aufrechtzuerhalten. Prüfen Sie den Behälter bei Erhalt sofort und bringen Sie die Fläschchen unverzüglich in ein geeignetes Lager.

Bei Cytion stehen wir hinter der Qualität und Lebensfähigkeit unserer Produkte. Wir garantieren, dass unsere Zellen zu Beginn der Kultur für 60 Tage nach dem Versand aus unseren Einrichtungen lebensfähig sind. Wir versichern, dass alle Materialien mit den im Analysezertifikat und/oder Produktblatt beschriebenen Spezifikationen übereinstimmen

Ausführliche Informationen finden Sie in unserer <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garantieerklärung