NRK-EGFP3-Seh1

Garis sel NRK-EGFP3-Seh1 adalah garis stabil klonal yang berasal dari sel ginjal tikus normal (NRK). Garis sel ini dihasilkan melalui transfeksi plasmid melingkar yang mengkode protein fusi EGFP3-Seh1. Setelah transfeksi, sel dipilih untuk resistensi obat, memastikan pembentukan populasi yang stabil yang mengekspresikan konstruk yang diinginkan.

Sekitar 50% sel dalam populasi ini mengekspresikan EGFP3-Seh1, protein fusi yang menggabungkan protein fluoresen hijau yang disempurnakan (EGFP) dengan Seh1, komponen protein dari kompleks pori nuklir. Kehadiran EGFP memfasilitasi visualisasi dan pelacakan protein fusi di dalam sel, sehingga memungkinkan para peneliti untuk mempelajari dinamika dan fungsi Seh1 dalam berbagai proses seluler. Namun, ekspresi EGFP3-Seh1 dalam garis sel ini menunjukkan beberapa variasi, yang menunjukkan variabilitas tingkat ekspresi di antara sel-sel individu dalam populasi.

Garis sel ini sangat berguna untuk penelitian yang melibatkan perakitan kompleks pori nuklir, transpor nukleositoplasma, dan peran Seh1 dalam proses ini. Fluoresensi yang disediakan oleh EGFP memungkinkan pencitraan sel hidup dan analisis waktu nyata dari lokalisasi dan interaksi protein, menjadikan NRK-EGFP3-Seh1 alat yang berharga untuk biologi sel dan penelitian molekuler.

37°C, 5%_CO2, atmosfer yang dilembabkan.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Kontaminasi mikoplasma disingkirkan dengan menggunakan tes berbasis PCR dan metode deteksi mikoplasma berbasis pendaran.

Untuk memastikan tidak ada kontaminasi bakteri, jamur, atau ragi, kultur sel menjalani inspeksi visual setiap hari.

Untuk pengawetan jangka panjang, tempatkan botol dalam nitrogen cair fase uap pada suhu sekitar -150 hingga -196 °C. Penyimpanan pada suhu -80 °C hanya dapat diterima sebagai langkah sementara sebelum dipindahkan ke nitrogen cair.

Lini sel kriopreservasi dikirim di atas es kering dalam kemasan terisolasi yang divalidasi dengan refrigeran yang cukup untuk mempertahankan suhu sekitar -78 ° C selama perjalanan. Setelah diterima, segera periksa wadah dan pindahkan botol tanpa penundaan ke tempat penyimpanan yang sesuai.

Di Cytion, kami mendukung kualitas dan kelangsungan hidup produk kami. Kami menjamin bahwa sel kami akan dapat bertahan hidup pada awal kultur selama 60 hari setelah pengiriman dari fasilitas kami. Kami menjamin bahwa semua bahan sesuai dengan spesifikasi yang dijelaskan dalam Sertifikat Analisis dan / atau Lembar Produk

Untuk detail lengkap, silakan merujuk ke <a href=""/Siapa-kami-Garansi/Garansi/"" hreflang=""x-default"">Pernyataan Jaminan kami