NRK-EGFP3-Seh1

Celična linija NRK-EGFP3-Seh1 je stabilna klonska linija, pridobljena iz celic normalnih ledvic podgan (NRK). Ta celična linija je bila ustvarjena s transfekcijo krožnega plazmida, ki kodira fuzijski protein EGFP3-Seh1. Po transfekciji so bile celice izbrane glede na odpornost proti zdravilom, kar je zagotovilo vzpostavitev stabilne populacije, ki izraža želeni konstrukt.

Približno 50 % celic v tej populaciji izraža EGFP3-Seh1, fuzijski protein, ki združuje izboljšan zeleni fluorescenčni protein (EGFP) in Seh1, beljakovino, ki je sestavni del kompleksa jedrnih por. Prisotnost EGFP omogoča vizualizacijo in sledenje fuzijskega proteina v celicah, kar raziskovalcem omogoča preučevanje dinamike in delovanja Seh1 v različnih celičnih procesih. Vendar pa izražanje EGFP3-Seh1 v tej celični liniji kaže na določeno raznolikost, kar kaže na spremenljivost ravni izražanja med posameznimi celicami znotraj populacije.

Ta celična linija je še posebej uporabna za študije, ki vključujejo sestavljanje kompleksa jedrnih por, nukleocitoplazemski transport in vlogo Seh1 v teh procesih. Fluorescenca, ki jo zagotavlja EGFP, omogoča slikanje celic v živo ter analizo lokalizacije in interakcij beljakovin v realnem času, zato je NRK-EGFP3-Seh1 dragoceno orodje za celično biologijo in molekularne raziskave.

37 °C, 5 %_CO2, vlažno ozračje.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Kontaminacija z mikoplazmo se izključi z uporabo testov na podlagi PCR in metod za odkrivanje mikoplazme na podlagi luminiscence.

Da se zagotovi, da ni kontaminacije z bakterijami, glivami ali kvasovkami, se celične kulture dnevno vizualno pregledujejo.

Za dolgotrajno shranjevanje viale postavite v tekoči dušik v parni fazi pri približno -150 do -196 °C. Shranjevanje pri -80 °C je sprejemljivo le kot kratek vmesni korak pred prenosom v tekoči dušik.

Kriokonzervirane celične linije se pošiljajo na suhem ledu v potrjeni, izolirani embalaži z zadostno količino hladilnega sredstva, da se med prevozom vzdržuje približno -78 °C. Ob prejemu takoj preglejte embalažo in viale nemudoma prenesite v ustrezno skladišče.

V podjetju Cytion stojimo za kakovostjo in uporabnostjo svojih izdelkov. Zagotavljamo, da bodo naše celice ob začetku gojenja še 60 dni po odpremi iz naših obratov vitalne. Zagotavljamo, da so vsi materiali skladni s specifikacijami, opisanimi v potrdilu o analizi in/ali listu izdelka

Za vse podrobnosti si oglejte našo <a href=""/Kdo smo/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garancijsko izjavo