NRK-EGFP3-Seh1

De NRK-EGFP3-Seh1 cellijn is een stabiele klonale lijn afgeleid van normale rattenniercellen (NRK). Deze cellijn werd gegenereerd door transfectie van een circulair plasmide dat codeert voor het fusie-eiwit EGFP3-Seh1. Na de transfectie werden de cellen geselecteerd op resistentie tegen geneesmiddelen, zodat er een stabiele populatie ontstond die het gewenste construct uitdrukt.

Ongeveer 50% van de cellen in deze populatie brengen EGFP3-Seh1 tot expressie, een fusie-eiwit dat versterkt groen fluorescerend eiwit (EGFP) combineert met Seh1, een eiwitcomponent van het nucleaire poriëncomplex. De aanwezigheid van EGFP maakt visualisatie en tracering van het fusie-eiwit in de cellen mogelijk, waardoor onderzoekers de dynamiek en functie van Seh1 in verschillende cellulaire processen kunnen bestuderen. De expressie van EGFP3-Seh1 in deze cellijn vertoont echter enige variatie, wat duidt op variabiliteit in expressieniveaus tussen individuele cellen binnen de populatie.

Deze cellijn is vooral nuttig voor studies waarbij de assemblage van het nucleaire poriëncomplex, nucleocytoplasmatisch transport en de rol van Seh1 in deze processen betrokken zijn. De fluorescentie van EGFP maakt live-cell beeldvorming en real-time analyse van eiwitlokalisatie en interacties mogelijk, waardoor NRK-EGFP3-Seh1 een waardevol hulpmiddel is voor celbiologie en moleculair onderzoek.

37°C, 5%_CO2, bevochtigde atmosfeer.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mycoplasmaverontreiniging wordt uitgesloten met zowel PCR-gebaseerde testen als op luminescentie gebaseerde mycoplasmadetectiemethoden.

Om er zeker van te zijn dat er geen besmetting is met bacteriën, schimmels of gisten, worden de celculturen dagelijks onderworpen aan visuele inspecties.

Voor langdurige bewaring plaatst u flesjes in vloeibare stikstof in dampfase bij ongeveer -150 tot -196 °C. Opslag bij -80 °C is alleen aanvaardbaar als korte tussenstap vóór overbrenging naar vloeibare stikstof.

Gecryopreserveerde cellijnen worden verzonden op droog ijs in gevalideerde, geïsoleerde verpakkingen met voldoende koelmiddel om gedurende het transport ongeveer -78 °C te handhaven. Inspecteer de verpakking onmiddellijk na ontvangst en breng de flacons onverwijld over naar de juiste opslagplaats.

Bij Cytion staan we achter de kwaliteit en levensvatbaarheid van onze producten. We garanderen dat onze cellen levensvatbaar zijn bij het begin van de kweek gedurende 60 dagen na verzending vanuit onze faciliteiten. We verzekeren dat alle materialen voldoen aan de specificaties beschreven in het analysecertificaat en/of productblad

Raadpleeg voor volledige informatie onze <a href=""/Wie-zijn-wij/Garantie/"" hreflang=""x-default"">Garantieverklaring