NRK-EGFP3-Seh1

NRK-EGFP3-Seh1-cellinjen är en stabil klonal linje som härrör från normala råttnjurceller (NRK). Denna cellinje genererades genom transfektion av en cirkulär plasmid som kodar för fusionsproteinet EGFP3-Seh1. Efter transfektion valdes cellerna ut med avseende på läkemedelsresistens, vilket säkerställde att en stabil population som uttryckte den önskade konstruktionen etablerades.

Cirka 50% av cellerna i denna population uttrycker EGFP3-Seh1, ett fusionsprotein som kombinerar förstärkt grönt fluorescerande protein (EGFP) med Seh1, en proteinkomponent i kärnporkomplexet. Närvaron av EGFP underlättar visualisering och spårning av fusionsproteinet i cellerna, vilket gör det möjligt för forskare att studera Seh1:s dynamik och funktion i olika cellulära processer. Uttrycket av EGFP3-Seh1 i denna cellinje uppvisar dock en viss variation, vilket indikerar variabilitet i uttrycksnivåer mellan enskilda celler inom populationen.

Denna cellinje är särskilt användbar för studier som involverar kärnporskomplexets sammansättning, nukleocytoplasmatisk transport och Seh1:s roll i dessa processer. Den fluorescens som EGFP ger möjliggör avbildning av levande celler och analys i realtid av proteinlokalisering och interaktioner, vilket gör NRK-EGFP3-Seh1 till ett värdefullt verktyg för cellbiologi och molekylär forskning.

37°C, 5%_CO2, befuktad atmosfär.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mykoplasmakontaminering utesluts med hjälp av både PCR-baserade analyser och luminiscensbaserade metoder för mykoplasmadiagnostik.

För att säkerställa att det inte finns någon kontaminering av bakterier, svamp eller jäst utsätts cellkulturerna för dagliga visuella inspektioner.

För långtidsförvaring, placera flaskorna i flytande kväve i ångfas vid ca -150 till -196 °C. Förvaring vid -80 °C är acceptabelt endast som ett kort mellanliggande steg innan överföring till flytande kväve.

Kryopreserverade cellinjer skickas på torris i validerade, isolerade förpackningar med tillräckligt med kylmedel för att hålla cirka -78 °C under hela transporten. Vid mottagandet ska behållaren omedelbart inspekteras och flaskorna utan dröjsmål överföras till lämplig förvaring.

På Cytion står vi bakom våra produkters kvalitet och livskraft. Vi garanterar att våra celler är livsdugliga vid odlingens början i 60 dagar efter leverans från våra anläggningar. Vi försäkrar att allt material överensstämmer med de specifikationer som beskrivs i analyscertifikatet och/eller produktbladet

För fullständig information, se vår <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garantiförklaring