NRK-EGFP3-Seh1

เซลล์ไลน์ NRK-EGFP3-Seh1 เป็นเซลล์ไลน์โคลนที่เสถียรซึ่งได้มาจากเซลล์ไตของหนูปกติ (NRK) เซลล์ไลน์นี้ถูกสร้างขึ้นโดยการถ่ายโอนพลาสมิดวงแหวนที่เข้ารหัสโปรตีนฟิวชัน EGFP3-Seh1 เข้าสู่เซลล์ หลังจากถ่ายโอนพลาสมิดแล้ว เซลล์จะถูกคัดเลือกให้มีความต้านทานต่อยา เพื่อให้มั่นใจในการสร้างประชากรเซลล์ที่เสถียรซึ่งแสดงโครงสร้างที่ต้องการ

ประมาณ 50% ของเซลล์ในประชากรนี้แสดงออกโปรตีน EGFP3-Seh1 ซึ่งเป็นโปรตีนฟิวชั่นที่รวมโปรตีนเรืองแสงสีเขียวที่ปรับปรุงแล้ว (EGFP) กับ Seh1 ซึ่งเป็นส่วนประกอบโปรตีนของคอมเพล็กซ์รูพรุนนิวเคลียร์การมีอยู่ของ EGFP ช่วยในการมองเห็นและติดตามโปรตีนฟิวชันภายในเซลล์ ทำให้ผู้วิจัยสามารถศึกษาพลวัตและการทำงานของ Seh1 ในกระบวนการเซลล์ต่างๆ ได้ อย่างไรก็ตาม การแสดงออกของ EGFP3-Seh1 ในสายเซลล์นี้แสดงให้เห็นถึงความหลากหลายบางประการ ซึ่งบ่งชี้ถึงความแปรปรวนในระดับการแสดงออกระหว่างเซลล์แต่ละเซลล์ภายในประชากร

เซลล์ไลน์นี้มีประโยชน์อย่างยิ่งสำหรับการศึกษาที่เกี่ยวข้องกับการประกอบของนิวเคลียร์พอร์คอมเพล็กซ์, การขนส่งนิวเคลียส-ไซโทพลาสซึม, และบทบาทของ Seh1 ในกระบวนการเหล่านี้ การเรืองแสงที่ให้โดย EGFP ช่วยให้สามารถถ่ายภาพเซลล์ที่มีชีวิตและการวิเคราะห์แบบเรียลไทม์ของการกระจายตัวของโปรตีนและการโต้ตอบ ทำให้ NRK-EGFP3-Seh1 เป็นเครื่องมือที่มีคุณค่าสำหรับการวิจัยทางชีววิทยาของเซลล์และโมเลกุล

37°C, 5%_CO2, บรรยากาศชื้น

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

การปนเปื้อนของไมโคพลาสมาถูกตัดออกโดยใช้ทั้งการทดสอบแบบ PCR และการตรวจหาไมโคพลาสมาโดยใช้วิธีการเรืองแสง

เพื่อให้แน่ใจว่าไม่มีการปนเปื้อนของแบคทีเรีย เชื้อรา หรือยีสต์ การเพาะเลี้ยงเซลล์จะถูกตรวจสอบด้วยสายตาทุกวัน

สำหรับการเก็บรักษาในระยะยาว ให้วางหลอดบรรจุในไนโตรเจนเหลวในสถานะไอที่อุณหภูมิประมาณ −150 ถึง −196 °C การเก็บรักษาที่อุณหภูมิ −80 °C สามารถใช้ได้เฉพาะในระยะสั้นก่อนการย้ายไปยังไนโตรเจนเหลวเท่านั้น

เซลล์ไลน์ที่แช่แข็งในไนโตรเจนเหลวจะถูกจัดส่งในบรรจุภัณฑ์ที่ผ่านการตรวจสอบแล้วและมีการเก็บรักษาความเย็นด้วยน้ำแข็งแห้ง พร้อมสารทำความเย็นที่เพียงพอเพื่อรักษาอุณหภูมิประมาณ −78 °C ตลอดการขนส่ง เมื่อได้รับสินค้า ให้ตรวจสอบภาชนะทันทีและถ่ายโอนหลอดทดลองไปยังที่เก็บที่เหมาะสมโดยไม่ล่าช้า

ที่Cytion เรามุ่งมั่นในคุณภาพและความมีชีวิตของผลิตภัณฑ์ของเรา เรารับประกันว่าเซลล์ของเราจะยังมีชีวิตอยู่เมื่อเริ่มการเพาะเลี้ยงเป็นเวลา 60 วันหลังจากจัดส่งจากโรงงานของเรา เรารับรองว่าวัสดุทั้งหมดเป็นไปตามข้อกำหนดที่ระบุไว้ใน ใบรับรองการวิเคราะห์ และ/หรือแผ่นข้อมูลผลิตภัณฑ์

สำหรับรายละเอียดเพิ่มเติม กรุณาดูที่ <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">นโยบายการรับประกัน.