NRK-EGFP3-Seh1

La línea celular NRK-EGFP3-Seh1 es una línea clonal estable derivada de células renales normales de rata (NRK). Esta línea celular se generó mediante la transfección de un plásmido circular que codifica la proteína de fusión EGFP3-Seh1. Tras la transfección, las células se seleccionaron por su resistencia a los fármacos, lo que garantizó el establecimiento de una población estable que expresa el constructo deseado.

Aproximadamente el 50 % de las células de esta población expresan EGFP3-Seh1, una proteína de fusión que combina la proteína fluorescente verde mejorada (EGFP) con Seh1, un componente proteico del complejo de poros nucleares. La presencia de EGFP facilita la visualización y el seguimiento de la proteína de fusión dentro de las células, lo que permite a los investigadores estudiar la dinámica y la función de Seh1 en diversos procesos celulares. Sin embargo, la expresión de EGFP3-Seh1 en esta línea celular presenta cierta variabilidad, lo que indica diferencias en los niveles de expresión entre las células individuales de la población.

Esta línea celular es particularmente útil para estudios relacionados con el ensamblaje del complejo de poros nucleares, el transporte nucleocitoplasmático y el papel de Seh1 en estos procesos. La fluorescencia que proporciona la EGFP permite la obtención de imágenes de células vivas y el análisis en tiempo real de la localización e interacciones de las proteínas, lo que convierte a NRK-EGFP3-Seh1 en una herramienta valiosa para la biología celular y la investigación molecular.

37 °C, 5 % de CO₂, atmósfera humidificada.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Se descarta la contaminación por micoplasmas mediante ensayos basados en PCR y métodos de detección de micoplasmas basados en luminiscencia.

Para garantizar que no haya contaminación bacteriana, fúngica o por levaduras, los cultivos celulares se someten a inspecciones visuales diarias.

Para la conservación a largo plazo, coloque los viales en nitrógeno líquido en fase de vapor a una temperatura de entre −150 y −196 °C, aproximadamente. El almacenamiento a −80 °C solo es aceptable como un paso intermedio breve antes de transferirlos al nitrógeno líquido.

Las líneas celulares criopreservadas se envían en hielo seco, en un embalaje aislante validado que contiene suficiente refrigerante para mantener una temperatura de aproximadamente −78 °C durante todo el transporte. Al recibir el envío, revise el contenedor de inmediato y traslade los viales sin demora al lugar de almacenamiento adecuado.

En Cytion, respaldamos la calidad y la viabilidad de nuestros productos. Garantizamos que nuestras células serán viables al inicio del cultivo durante 60 días a partir de la fecha de envío desde nuestras instalaciones. Aseguramos que todos los materiales cumplen con las especificaciones descritas en el Certificado de Análisis y/o la Ficha del Producto.

Para obtener más detalles, consulte nuestra Declaración de garantía.