NRK-EGFP3-Seh1

NRK-EGFP3-Seh1 hücre hattı, normal sıçan böbrek (NRK) hücrelerinden türetilen klonal stabil bir hattır. Bu hücre hattı, EGFP3-Seh1 füzyon proteinini kodlayan dairesel bir plazmidin transfeksiyonu yoluyla oluşturulmuştur. Transfeksiyonun ardından, hücreler ilaç direnci açısından seçilerek istenen yapıyı ifade eden stabil bir popülasyonun oluşturulması sağlanmıştır.

Bu popülasyondaki hücrelerin yaklaşık %50'si, gelişmiş yeşil floresan proteini (EGFP) nükleer gözenek kompleksinin bir protein bileşeni olan Seh1 ile birleştiren bir füzyon proteini olan EGFP3-Seh1'i ifade eder. EGFP'nin varlığı, füzyon proteininin hücreler içinde görselleştirilmesini ve izlenmesini kolaylaştırarak araştırmacıların çeşitli hücresel süreçlerde Seh1'in dinamiklerini ve işlevini incelemelerini sağlar. Bununla birlikte, bu hücre hattındaki EGFP3-Seh1 ekspresyonu, popülasyon içindeki tek tek hücreler arasında ekspresyon seviyelerindeki değişkenliği gösteren bir miktar alacalanma sergiler.

Bu hücre hattı, nükleer gözenek kompleksi montajı, nükleositoplazmik taşıma ve Seh1'in bu süreçlerdeki rolünü içeren çalışmalar için özellikle yararlıdır. EGFP tarafından sağlanan floresan, canlı hücre görüntülemesine ve protein lokalizasyonu ve etkileşimlerinin gerçek zamanlı analizine izin vererek NRK-EGFP3-Seh1'i hücre biyolojisi ve moleküler araştırmalar için değerli bir araç haline getirir.

37°C, %5_CO2, nemlendirilmiş atmosfer.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mikoplazma kontaminasyonu hem PCR tabanlı tahliller hem de lüminesans tabanlı mikoplazma tespit yöntemleri kullanılarak dışlanır.

Bakteriyel, fungal veya maya kontaminasyonu olmadığından emin olmak için hücre kültürleri günlük görsel incelemelere tabi tutulur.

Uzun süreli muhafaza için flakonları yaklaşık -150 ila -196 °C'de buhar fazlı sıvı nitrojen içine yerleştirin. 80 °C'de saklama yalnızca sıvı nitrojene aktarılmadan önce kısa bir ara adım olarak kabul edilebilir.

Kriyoprezerve edilmiş hücre hatları, nakliye boyunca yaklaşık -78 °C'yi korumak için yeterli soğutucu akışkan içeren, onaylanmış, yalıtılmış ambalajlarda kuru buz üzerinde gönderilir. Teslim aldığınızda, kabı hemen inceleyin ve flakonları gecikmeden uygun depoya aktarın.

Cytion olarak ürünlerimizin kalitesinin ve canlılığının arkasındayız. Hücrelerimizin, tesislerimizden sevkiyattan sonra 60 gün boyunca kültürün başlangıcında canlı olacağını garanti ediyoruz. Tüm malzemelerin Analiz Sertifikası ve/veya Ürün Sayfasında açıklanan özelliklere uygun olduğunu garanti ediyoruz

Tüm ayrıntılar için lütfen <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garanti Beyanımıza bakın