NRK-EGFP3-Seh1

NRK-EGFP3-Seh1 šūnu līnija ir klonēta stabila līnija, kas iegūta no normālām žurku nieru (NRK) šūnām. Šī šūnu līnija tika radīta, transfekējot ar apļveida plazmīdu, kas kodē EGFP3-Seh1 saplūšanas proteīnu. Pēc transfekcijas šūnas atlasīja pēc rezistences pret zālēm, nodrošinot stabilas populācijas izveidi, kas ekspresē vēlamo konstrukciju.

Aptuveni 50 % šūnas šajā populācijā ekspresē EGFP3-Seh1 - saplūšanas proteīnu, kas apvieno uzlaboto zaļo fluorescējošo proteīnu (EGFP) ar Seh1 - kodola poru kompleksa proteīna sastāvdaļu. EGFP klātbūtne atvieglo saplūšanas proteīna vizualizāciju un izsekošanu šūnās, ļaujot pētniekiem pētīt Seh1 dinamiku un funkcijas dažādos šūnu procesos. Tomēr EGFP3-Seh1 ekspresija šajā šūnu līnijā ir nedaudz mainīga, kas norāda uz ekspresijas līmeņu dažādību starp atsevišķām šūnām populācijā.

Šī šūnu līnija ir īpaši noderīga pētījumiem, kas saistīti ar kodola poru kompleksa montāžu, nukleoplazmas transportu un Seh1 lomu šajos procesos. EGFP nodrošinātā fluorescence ļauj attēlot dzīvās šūnas un reāllaika proteīnu lokalizācijas un mijiedarbības analīzi, padarot NRK-EGFP3-Seh1 par vērtīgu rīku šūnu bioloģijā un molekulārajos pētījumos.

37°C, 5%_CO2, mitrināta atmosfēra.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mikoplazmas piesārņojums tiek izslēgts, izmantojot gan uz PCR balstītus testus, gan uz luminiscenci balstītas mikoplazmas noteikšanas metodes.

Lai pārliecinātos, ka nav baktēriju, sēnīšu vai rauga piesārņojuma, šūnu kultūras katru dienu vizuāli pārbauda.

Ilgstošai uzglabāšanai flakonus ievietojiet šķidrā slāpeklī ar tvaika fāzi aptuveni -150 līdz -196 °C temperatūrā. Uzglabāšana -80 °C temperatūrā ir pieļaujama tikai kā īss starpposms pirms pārvietošanas uz šķidro slāpekli.

Kriokonservētas šūnu līnijas tiek sūtītas uz sausā ledus apstiprinātā, izolētā iepakojumā ar pietiekamu dzesēšanas šķidruma daudzumu, lai visā transportēšanas laikā uzturētu aptuveni -78 °C temperatūru. Pēc saņemšanas nekavējoties pārbaudiet iepakojumu un nekavējoties pārvietojiet flakonus uz atbilstošu uzglabāšanas vietu.

Uzņēmumā Cytion mēs atbalstām savu produktu kvalitāti un dzīvotspēju. Mēs garantējam, ka mūsu šūnas būs dzīvotspējīgas kultivēšanas sākumā 60 dienas pēc nosūtīšanas no mūsu ražotnēm. Mēs nodrošinām, ka visi materiāli atbilst analīzes sertifikātā un/vai produkta lapā aprakstītajām specifikācijām

Lai iegūtu sīkāku informāciju, lūdzu, skatiet mūsu <a href=""/"/Kas mēs esam/garantija/"" hreflang=""x-default"">Garantijas paziņojumu