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NRK-EGFP3-Seh1
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NRK EGFP3-Seh1

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NRK-EGFP3-Seh1

Cell line · 제품 번호 500731

NRK-EGFP3-Seh1 세포주는 정상 쥐 신장(NRK) 세포에서 유래한 클론 안정 세포주입니다. 이 세포주는 ...의 형질 도입을 통해 생성되었습니다.

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사용자 지정 / 추천 사항

재고 있음
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1

01일반 정보

설명

NRK-EGFP3-Seh1 세포주는 정상 쥐 신장(NRK) 세포에서 유래한 클론 안정주입니다. 이 세포주는 EGFP3-Seh1 융합 단백질을 코딩하는 원형 플라스미드의 감염을 통해 생성되었습니다. 감염 후, 약물 내성을 가진 세포를 선별하여 원하는 구조를 발현하는 안정적인 집단을 구축했습니다.

이 집단에 포함된 세포의 약 50%는 강화된 녹색 형광 단백질(EGFP)과 핵 기공 복합체의 단백질 구성 요소인 Seh1을 결합한 융합 단백질인 EGFP3-Seh1을 발현합니다. EGFP의 존재는 세포 내에서 융합 단백질의 시각화와 추적을 용이하게 하여 연구자들이 다양한 세포 과정에서 Seh1의 역학 및 기능을 연구할 수 있게 해줍니다. 그러나 이 세포주에서 EGFP3-Seh1의 발현은 집단 내 개별 세포 간의 발현 수준의 가변성을 나타내는 약간의 변이를 보입니다.

이 세포주는 핵 기공 복합체 조립, 핵 세포질 수송 및 이러한 과정에서 Seh1의 역할과 관련된 연구에 특히 유용합니다. EGFP가 제공하는 형광을 통해 살아있는 세포 이미징과 단백질 위치 및 상호작용의 실시간 분석이 가능하므로 NRK-EGFP3-Seh1은 세포 생물학 및 분자 연구에 유용한 도구가 될 수 있습니다.

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  • NRK EGFP3-Seh1

02분류

생물체
쥐
성장 특성
준수자
생물안전 등급
1

03특징

형태학
방추형 모양의 섬유아세포 유사 세포

04식별자

인용
NRK-EGFP3-Seh1(사이티온 카탈로그 번호 500731)
NCBI 세금 식별번호
10116
셀로사우루스
CVCL_AV94
예금자
엘렌버그 연구소(EMBL)

05발현 및 감수성

발현된 수용체
상피세포 성장인자(EGF), 증식 촉진 활성(MSA)
단백질 발현
EGFP3-Seh1
제품
SEH1(뉴클레오포린과 같은 SEH1)

06취급 및 배양

배지
DMEM, w: 4.5g/L 포도당, w: 4mM L-글루타민, w: 3.7g/L NaHCO3, w: 1.0mM 피루브산 나트륨(사이티온 제품 번호 820300a)
배양 조건

37°C, 5%CO2, 습한 대기.

건강보조식품
배지에 10% FBS, 0.5mg/mL G418을 보충합니다
분리 시약
아큐타제
재배양
부착된 세포에서 오래된 배지를 제거하고 칼슘과 마그네슘이 없는 PBS로 세척합니다. T25 플라스크의 경우 3~5ml, T75 플라스크의 경우 5~10ml의 PBS를 사용합니다. 그런 다음 T25 플라스크의 경우 1~2㎖, T75 플라스크의 경우 2.5㎖를 사용하여 세포를 Accutase로 완전히 덮습니다. 세포를 분리하기 위해 실온에서 8~10분간 배양합니다. 배양 후 세포를 배지 10ml와 부드럽게 혼합하여 재부유시킨 다음 300xg에서 3분간 원심분리합니다. 상층액을 버리고 세포를 신선한 배지에 다시 부유시킨 후 이미 신선한 배지가 들어 있는 새 플라스크에 옮깁니다.
파종 밀도
2~4 × 10⁴ 세포/cm²
유체 교체
주 2~3회
해동 및 배양

  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07품질 관리 및 냉동 보존

불임

마이코플라스마 오염은 PCR 기반 분석법과 발광 기반 마이코플라스마 검출법을 모두 사용하여 배제합니다.

박테리아, 곰팡이 또는 효모 오염이 없는지 확인하기 위해 세포 배양은 매일 육안 검사를 거칩니다.

배양액 동결
냉동 보존 배지로는 해동 후 충분한 생존력을 위해 완전 성장 배지(FBS 포함) + 10% DMSO를 사용하거나, 최적화된 삼투 보호제 및 대사 안정제가 포함된 CM-1(Cytion 카탈로그 번호 800100)을 사용하여 회복력을 높이고 냉동으로 인한 스트레스를 줄입니다.
보관 조건

장기 보존을 위해서는 바이알을 약 -150°C에서 -196°C의 증기상 액체 질소에 넣으세요. 80°C에서 보관하는 것은 액체 질소로 옮기기 전 짧은 중간 단계로만 허용됩니다.

배송 조건

냉동 보존 세포주는 운송 중 약 -78°C를 유지할 수 있는 충분한 냉매가 포함된 검증된 단열 포장에 드라이아이스를 넣어 배송됩니다. 수령 즉시 용기를 검사하고 바이알을 지체 없이 적절한 보관 장소로 옮깁니다.

08기부자

품종 / 아종
오스본멘델