NRK-EGFP3-Seh1

La línea celular NRK-EGFP3-Seh1 es una línea clonal estable derivada de células normales de riñón de rata (NRK). Esta línea celular se generó mediante la transfección de un plásmido circular que codifica la proteína de fusión EGFP3-Seh1. Tras la transfección, las células se seleccionaron en función de su resistencia a los fármacos, lo que garantizó el establecimiento de una población estable que expresaba la construcción deseada.

Aproximadamente el 50% de las células de esta población expresan EGFP3-Seh1, una proteína de fusión que combina la proteína verde fluorescente mejorada (EGFP) con Seh1, una proteína componente del complejo del poro nuclear. La presencia de EGFP facilita la visualización y el seguimiento de la proteína de fusión dentro de las células, lo que permite a los investigadores estudiar la dinámica y la función de Seh1 en diversos procesos celulares. Sin embargo, la expresión de EGFP3-Seh1 en esta línea celular presenta cierta variegación, lo que indica variabilidad en los niveles de expresión entre células individuales dentro de la población.

Esta línea celular es especialmente útil para estudios relacionados con el ensamblaje del complejo de poros nucleares, el transporte nucleocitoplasmático y el papel de Seh1 en estos procesos. La fluorescencia proporcionada por la EGFP permite la obtención de imágenes de células vivas y el análisis en tiempo real de la localización y las interacciones de las proteínas, lo que convierte a NRK-EGFP3-Seh1 en una valiosa herramienta para la biología celular y la investigación molecular.

37°C, 5%_CO2, atmósfera humidificada.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

La contaminación por micoplasma se excluye utilizando tanto ensayos basados en la PCR como métodos de detección de micoplasma basados en la luminiscencia.

Para garantizar la ausencia de contaminación bacteriana, fúngica o por levaduras, los cultivos celulares se someten a inspecciones visuales diarias.

Para la conservación a largo plazo, colocar los viales en nitrógeno líquido en fase vapor a una temperatura aproximada de -150 a -196 °C. El almacenamiento a -80 °C sólo es aceptable como breve paso intermedio antes de la transferencia al nitrógeno líquido.

Las líneas celulares crioconservadas se envían en hielo seco en envases validados y aislados con suficiente refrigerante para mantener aproximadamente -78 °C durante el tránsito. A la recepción, inspeccione el envase inmediatamente y transfiera los viales sin demora al almacenamiento adecuado.

En Cytion, respaldamos la calidad y viabilidad de nuestros productos. Garantizamos que nuestras células serán viables al inicio del cultivo durante los 60 días posteriores al envío desde nuestras instalaciones. Aseguramos que todos los materiales se ajustan a las especificaciones descritas en el Certificado de Análisis y/o Hoja de Producto

Para más información, consulte nuestra <a href=""/Quiénes somos/Garantía/"" hreflang=""x-default"">Declaración de garantía