NRK-EGFP3-Seh1

الخط الخلوي NRK-EGFP3-Seh1 هو خط خلوي مستقر مستنسخ مشتق من خلايا كلية الفئران الطبيعية (NRK). تم توليد هذا الخط الخلوي من خلال نقل بلازميد دائري يشفر بروتين الاندماج EGFP3-Seh1. بعد نقل التشفير، تم اختيار الخلايا لمقاومة العقاقير، مما يضمن إنشاء مجموعة مستقرة تعبر عن التركيب المطلوب.

تعبّر 50% تقريبًا من الخلايا في هذه المجموعة عن بروتين EGFP3-Seh1 وهو بروتين اندماجي يجمع بين البروتين الفلوري الأخضر المعزز (EGFP) وبروتين Seh1، وهو أحد مكونات البروتين في مجمع المسام النووية. يسهّل وجود البروتين الفلوري الأخضر المعزز (EGFP) رؤية وتتبع البروتين المدمج داخل الخلايا، مما يمكّن الباحثين من دراسة ديناميكيات ووظيفة Seh1 في مختلف العمليات الخلوية. ومع ذلك، يُظهر التعبير عن بروتين EGFP3-Seh1 في هذا الخط الخلوي بعض التباين، مما يشير إلى التباين في مستويات التعبير بين الخلايا الفردية داخل المجموعة.

ويُعد هذا الخط الخلوي مفيدًا بشكل خاص للدراسات التي تنطوي على تجميع مجمع المسام النووية، والنقل النووي الخلوي، ودور Seh1 في هذه العمليات. ويسمح التألق الذي يوفره EGFP بتصوير الخلايا الحية والتحليل في الوقت الحقيقي لتوطين البروتين وتفاعلاته، مما يجعل NRK-EGFP3-Seh1 أداة قيّمة لبيولوجيا الخلية والأبحاث الجزيئية.

37 درجة مئوية، و5% من _ثاني أكسيد الكربون في جو مرطب.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

يُستبعد التلوث بالميكوبلازما باستخدام كل من المقايسات القائمة على تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR) وطرق الكشف عن الميكوبلازما القائمة على التألق.

ولضمان عدم وجود تلوث بكتيري أو فطري أو خميرة يتم إخضاع مزارع الخلايا للفحص البصري اليومي.

للحفظ طويل الأمد، ضع القوارير في نيتروجين سائل في طور البخار عند درجة حرارة تتراوح بين -150 و -196 درجة مئوية تقريباً. يُقبل التخزين عند درجة حرارة -80 درجة مئوية فقط كخطوة مؤقتة قصيرة قبل النقل إلى النيتروجين السائل.

تُشحن خطوط الخلايا المحفوظة بالتبريد على ثلج جاف في عبوات معزولة وموثوقة مع مبرد كافٍ للحفاظ على درجة حرارة -78 درجة مئوية تقريبًا طوال فترة النقل. عند الاستلام، افحص الحاوية على الفور وانقل القوارير دون تأخير إلى المخزن المناسب.

في Cytion، نلتزم في Cytion بجودة منتجاتنا وحيويتها. نحن نضمن أن تكون خلايانا قابلة للحياة في بداية الاستزراع لمدة 60 يومًا بعد الشحن من منشآتنا. نؤكد أن جميع المواد مطابقة للمواصفات الموضحة في شهادة التحليل و/أو ورقة المنتج

للحصول على التفاصيل الكاملة، يُرجى الرجوع إلى <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">بيان الضمان