NRK-EGFP3-Seh1

Buněčná linie NRK-EGFP3-Seh1 je klonální stabilní linie odvozená z buněk normální ledviny potkana (NRK). Tato buněčná linie byla vytvořena transfekcí kruhového plazmidu kódujícího fúzní protein EGFP3-Seh1. Po transfekci byly buňky selektovány na rezistenci k léčivům, čímž bylo zajištěno vytvoření stabilní populace exprimující požadovaný konstrukt.

Přibližně 50 % buněk v této populaci exprimuje EGFP3-Seh1, fúzní protein kombinující zesílený zelený fluorescenční protein (EGFP) s proteinem Seh1, který je součástí komplexu jaderných pórů. Přítomnost EGFP usnadňuje vizualizaci a sledování fúzního proteinu v buňkách, což vědcům umožňuje studovat dynamiku a funkci Seh1 v různých buněčných procesech. Exprese EGFP3-Seh1 v této buněčné linii však vykazuje určitou variabilitu, což naznačuje proměnlivost úrovně exprese mezi jednotlivými buňkami v rámci populace.

Tato buněčná linie je zvláště užitečná pro studie zahrnující sestavování komplexu jaderných pórů, nukleocytoplazmatický transport a úlohu Seh1 v těchto procesech. Fluorescence, kterou poskytuje EGFP, umožňuje zobrazování živých buněk a analýzu lokalizace a interakcí proteinů v reálném čase, což z NRK-EGFP3-Seh1 činí cenný nástroj pro buněčnou biologii a molekulární výzkum.

37 °C, 5 %_CO2, zvlhčená atmosféra.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Kontaminace mykoplazmaty je vyloučena jak pomocí testů založených na PCR, tak pomocí luminiscenčních metod detekce mykoplazmy.

Aby se zajistilo, že nedojde ke kontaminaci bakteriemi, plísněmi nebo kvasinkami, jsou buněčné kultury denně podrobovány vizuálním kontrolám.

Pro dlouhodobé uchování umístěte lahvičky do kapalného dusíku v plynné fázi při teplotě přibližně -150 až -196 °C. Skladování při -80 °C je přijatelné pouze jako krátký přechodný krok před přemístěním do kapalného dusíku.

Kryokonzervované buněčné linie se přepravují na suchém ledu v ověřených, izolovaných obalech s dostatečným množstvím chladiva, aby se po celou dobu přepravy udržovala teplota přibližně -78 °C. Po obdržení ihned zkontrolujte obal a neprodleně přeneste lahvičky do vhodného skladu.

Ve společnosti Cytion si stojíme za kvalitou a životaschopností našich produktů. Zaručujeme, že naše buňky budou životaschopné na začátku kultivace po dobu 60 dnů po odeslání z našich zařízení. Zaručujeme, že všechny materiály odpovídají specifikacím popsaným v certifikátu analýzy a/nebo v produktovém listu

Úplné informace naleznete v našem <a href=""/Kdo-jsme/Záruka/"" hreflang=""x-default"">Záručním prohlášení