NRK-EGFP3-Seh1

NRK-EGFP3-Seh1-cellelinjen er en klonal stabil linje, der stammer fra normale rotte-nyreceller (NRK). Denne cellelinje blev genereret gennem transfektion af et cirkulært plasmid, der koder for EGFP3-Seh1-fusionsproteinet. Efter transfektion blev cellerne udvalgt for lægemiddelresistens, hvilket sikrede etableringen af en stabil population, der udtrykte den ønskede konstruktion.

Omkring 50 % af cellerne i denne population udtrykker EGFP3-Seh1, et fusionsprotein, der kombinerer forstærket grønt fluorescerende protein (EGFP) med Seh1, en proteinkomponent i kerneporekomplekset. Tilstedeværelsen af EGFP gør det lettere at visualisere og spore fusionsproteinet i cellerne, hvilket gør det muligt for forskere at studere Seh1's dynamik og funktion i forskellige cellulære processer. Ekspressionen af EGFP3-Seh1 i denne cellelinje udviser dog en vis variation, hvilket indikerer variabilitet i ekspressionsniveauer mellem individuelle celler i populationen.

Denne cellelinje er især nyttig til undersøgelser, der involverer samling af nukleare porekomplekser, nukleocytoplasmatisk transport og Seh1's rolle i disse processer. Fluorescensen fra EGFP giver mulighed for billeddannelse af levende celler og realtidsanalyse af proteinlokalisering og interaktioner, hvilket gør NRK-EGFP3-Seh1 til et værdifuldt værktøj til cellebiologi og molekylær forskning.

37°C, 5%_CO2, befugtet atmosfære.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mycoplasma-kontaminering udelukkes ved hjælp af både PCR-baserede assays og luminescensbaserede mycoplasma-detektionsmetoder.

For at sikre, at der ikke er nogen bakterie-, svampe- eller gærforurening, underkastes cellekulturerne daglige visuelle inspektioner.

For langtidsopbevaring anbringes hætteglas i flydende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Opbevaring ved -80 °C er kun acceptabelt som et kort mellemtrin før overførsel til flydende nitrogen.

Kryopræserverede cellelinjer sendes på tøris i valideret, isoleret emballage med tilstrækkeligt kølemiddel til at opretholde ca. -78 °C under hele transporten. Ved modtagelse skal beholderen straks inspiceres, og hætteglassene skal straks overføres til passende opbevaring.

Hos Cytion står vi inde for vores produkters kvalitet og levedygtighed. Vi garanterer, at vores celler vil være levedygtige ved kulturens start i 60 dage efter afsendelse fra vores faciliteter. Vi sikrer, at alle materialer er i overensstemmelse med de specifikationer, der er beskrevet i analysecertifikatet og/eller produktarket

For alle detaljer henvises til vores <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garantierklæring