NRK-EGFP3-Seh1

NRK-EGFP3-Seh1細胞株は、正常ラット腎臓（NRK）細胞由来のクローン性安定株である。この細胞株は、EGFP3-Seh1融合タンパク質をコードする環状プラスミドをトランスフェクションすることによって作製された。トランスフェクション後、細胞は薬剤耐性について選択され、目的の構築物を発現する安定した集団が確立された。

この集団の細胞の約50％はEGFP3-Seh1を発現しており、これは強化型緑色蛍光タンパク質（EGFP）と核膜孔複合体の構成タンパク質であるSeh1を組み合わせた融合タンパク質である。EGFPの存在は、細胞内での融合タンパク質の可視化と追跡を容易にし、研究者が様々な細胞プロセスにおけるSeh1の動態と機能を研究することを可能にする。しかしながら、この細胞株におけるEGFP3-Seh1の発現は、集団内の個々の細胞間で発現レベルにばらつきがあることを示す、若干の変異を示す。

この細胞株は、核膜孔複合体のアセンブリー、核細胞質輸送、およびこれらのプロセスにおけるSeh1の役割を含む研究に特に有用である。EGFPによる蛍光は、ライブセルイメージングとタンパク質の局在と相互作用のリアルタイム解析を可能にし、NRK-EGFP3-Seh1を細胞生物学と分子研究のための貴重なツールにしている。

37℃、5%_CO2、加湿雰囲気。

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

マイコプラズマ汚染は、PCRベースのアッセイと発光ベースのマイコプラズマ検出法の両方を用いて除外される。

細菌、真菌、酵母のコンタミネーションがないことを確認するため、細胞培養物は毎日目視検査が行われる。

長期保存の場合、バイアルを-150～-196℃の気相液体窒素に入れる。80℃での保存は、液体窒素に移す前の短い暫定措置としてのみ許容される。

凍結保存された細胞株は、輸送中約-78℃を維持するのに十分な保冷剤とともに、有効な断熱包装でドライアイスとともに輸送される。受領後、直ちに容器を検査し、遅滞なくバイアルを適切な保管場所に移してください。

サイシオンは、製品の品質と生存率を保証します。 当社では、培養を開始した時点で、当社施設からの出荷後60日間、細胞が生存可能であることを保証しています。 すべての材料が、分析証明書および／または製品シートに記載された仕様に適合していることを保証します。

詳細については、<a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Warranty Statement をご参照ください。