Pereiti prie turinio
ATDC5
Audinys
Embrionas
Liga
Teratokarcinoma
Metastazių vieta
Netaikoma (gauta iš pelių embrioninės teratokarcinomos; nemetastazinis modelis)
Sinonimai
ATDC-5

Dokumentai

ATDC5

Cell line · Prekės numeris 305427

ATDC5 is a murine chondrogenic cell line derived from mouse teratocarcinoma cells and is widely used as an in vitro model for studying chondrogenesis and ...

€650.00neįskaitant mokesčių ir pristatymo išlaidų
Yra sandėlyje
Lot
Rekomenduojama (šviežiausia partija)
  • CoA
  • CoA
1

01Bendra informacija

Aprašymas

ATDC5 yra pelės chondrogeninių ląstelių linija, gauta iš pelės teratokarcinomos ląstelių ir plačiai naudojama kaip in vitro modelis chondrogenezei ir kremzlės vystymuisi tirti. Šioje ląstelių linijoje vyksta nuosekli chondrogeninė diferenciacija, imituojanti in vivo vykstančius procesus, tokius kaip ląstelių kondensacija, ankstyvųjų chondrocitų žymenų, tokių kaip II tipo kolagenas ir agrekanas, raiška ir perėjimas į hipertrofinius chondrocitus, pasižyminčius X tipo kolageno raiška ir matrikso mineralizacija. Dėl gebėjimo veiksmingai daugintis ir diferencijuotis ATDC5 yra vertingas modelis, kuriuo galima tirti molekulinius mechanizmus, susijusius su skeleto vystymusi, ypač su endochondraline kaulėjimu.

ATDC5 ląstelės plačiai naudojamos tiriant įvairių augimo veiksnių, hormonų ir transkripcijos veiksnių įtaką chondrogenezei. Pavyzdžiui, nustatyta, kad transformuojantis augimo veiksnys beta (TGF-β) skatina ankstyvąją chondrogeninę diferenciaciją, moduliuodamas ekstraląstelinio matrikso komponentų, tokių kaip fibronektinas, raišką. Panašiai ir kaulų morfogenetiniai baltymai (BMP), ypač BMP-2, -4 ir -7, atlieka lemiamą vaidmenį skatinant skirtingus ATDC5 chondrocitų diferenciacijos etapus. Be to, įrodyta, kad šiose ląstelėse aktyvuojant pereinamojo receptoriaus potencialo vaniljoido 4 (TRPV4) kanalus kartu su hialuronu sustiprinama pagrindinių chondrogeninių žymenų, tokių kaip SOX9 ir Aggrecan, raiška, o tai dar labiau patvirtina jų naudingumą kremzlės audinių inžinerijos tyrimuose.

Ši ląstelių linija taip pat padėjo atlikti proteomikos tyrimus, kurie parodė, kad ATDC5 ląstelės gali sintetinti pagrindinius kremzlės ekstraląstelinio matrikso (ECM) komponentus, tokius kaip agrekanas ir II tipo kolagenas, kartu su tinkamomis potransliacinėmis modifikacijomis, reikalingomis kremzlės funkcijai. Dėl gebėjimo atkartoti svarbiausius ECM biosintezės procesus ATDC5 tampa nepakeičiamu modeliu tiriant kremzlės formavimąsi ir susijusias patologijas.

Audinys
Embrionas
Liga
Teratokarcinoma
Metastazių vieta
Netaikoma (gauta iš pelių embrioninės teratokarcinomos; nemetastazinis modelis)
Paraiškos
Chondrogenezės tyrimai; kremzlės vystymasis ir endochondralinis kaulėjimas; chondrocitų diferenciacija (II tipo kolageno, aggrekanio, SOX9 ekspresija); BMP-2/-4/-7 ir TGF-β signalizacija chondrocituose; osteoartrito modeliavimas; kremzlių audinių inžinerija; proteoglikanų biosintezė; TRPV4 kanalų biologija kremzliuose
Sinonimai
  • ATDC-5

02Klasifikacija

Organizmas
Pele
Seksas
Vyras
Augimo savybės
Prisijungęs
GMO statusas
Be GMO
Išsami informacija apie GMO statusą
No genetic modification; wildtype murine teratocarcinoma-derived chondrogenic cell line
Biologinio saugumo lygis
1

03Charakteristikos

Morfologija
Daugiakampis
Ląstelių tipas
Chondrocitų pirmtakinės ląstelės

04Identifikatoriai

Nuoroda
ATDC5 (Cytion katalogo numeris 305427)
NCBI mokesčių identifikavimo kodas
10090
Cellosaurus
CVCL_0225

05Laikymas ir auginimas

Maitinamoji terpė
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/l gliukozės, w: 2,5 mM L-glutamino, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM natrio piruvato, w: 1,2 g/l NaHCO3 (Cytion gaminio numeris 820400a)
Inkubacijos aplinka

37 °C, 5 %CO2, drėkintoje atmosferoje.

Maisto papildai
Papildykite terpę 5 % FBS
Disociacijos reagentas
Accutase
Subkultūrinis auginimas
Įprastinėms adherentinėms ląstelių kultūroms: Kad pašalintumėte visą likusią terpę, iš adherentinių ląstelių išsiurbkite seną terpę ir nuplaukite jas PBS. Išsiurbę PBS, įpilkite reikiamą kiekį "Accutase" tirpalo, atsižvelgiant į kultūros indo dydį (pvz., 1 ml T25 kolboje, 3 ml T75 kolboje), ir inkubuokite kambario arba 37 °C temperatūroje 5-10 minučių arba tol, kol ląstelės atsiskirs. Stebėkite atsiskyrimą per mikroskopą ir, jei reikia, švelniai palieskite indą, kad ląstelės išsilaisvintų. Kai ląstelės atsiskiria, įpilkite pilną terpę, kad būtų inaktyvuota "Accutase", atsargiai reuspenduokite ląsteles ir perkelkite alikvotą ląstelių suspensijos į naują indą su šviežia terpe. Įstatykite indą į 37 °C temperatūroje su 5 %CO2 įkaitintą inkubatorių ir kas 2-3 dienas keiskite terpę.
Sėjos tankis
2 x 104 ląstelės/cm2
Atšildymas ir auginimas
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kokybės kontrolė ir kriokonservavimas

Sterilumas

Mikoplazmos užterštumas atmetamas taikant PGR pagrįstus tyrimus ir liuminescencinius mikoplazmos aptikimo metodus.

Siekiant užtikrinti, kad nebūtų užteršimo bakterijomis, grybeliais ar mielėmis, ląstelių kultūros kasdien vizualiai tikrinamos.

Šaldymo terpė
Kaip kriokonservavimo terpę naudojame visišką augimo terpę (įskaitant FBS) + 10 % DMSO, kad būtų užtikrintas tinkamas gyvybingumas po atšildymo, arba CM-1 (Cytion katalogo numeris 800100), kurioje yra optimizuotų osmoprotektorių ir medžiagų apykaitos stabilizatorių, kad būtų pagerintas atsigavimas ir sumažintas kriokonservavimo sukeltas stresas.
Laikymo sąlygos

Norėdami ilgai saugoti, įdėkite buteliukus į garų fazės skystą azotą maždaug -150-196 °C temperatūroje. Laikymas -80 °C temperatūroje yra priimtinas tik kaip trumpas tarpinis etapas prieš perkeliant į skystąjį azotą.

Pristatymo sąlygos

Kriokonservuotos ląstelių linijos gabenamos ant sauso ledo patvirtintoje, izoliuotoje pakuotėje su pakankamu kiekiu šaldymo skysčio, kad pervežimo metu būtų palaikoma maždaug -78 °C temperatūra. Gavę pakuotę, nedelsdami ją apžiūrėkite ir nedelsdami perkelkite mėgintuvėlius į tinkamą saugyklą.

07Donoras

Veislė / porūšis
129
Donoro amžius
Embrionas